离子交换填料的表面修饰方法技术

本发明专利技术公开了一种离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，包括如下步骤：基球修饰：在修饰釜中加入纯化水以及氢氧化钠固体，搅拌均匀；向修饰釜内加入聚丙烯酸酯基球，搅拌均匀；向修饰釜内滴加入丙三醇缩水甘油醚，进行搅拌反应至少3小时；反应结束，将物料转移入离心机，甩滤；键合反应：在键合釜中加入纯化水以及硝酸，搅拌均匀；向键合釜内加入基球修饰后的得到的修饰物料、甲基丙烯酸缩水甘油酯以及1,4

【技术实现步骤摘要】
离子交换填料的表面修饰方法


[0001]本专利技术涉及离子交换填料领域，特别涉及一种离子交换填料的表面修饰方法。

技术介绍

[0002]现在液相色谱填料材料广泛应用在药物开发、物质分析分离等
，其中高效液相色谱技术(HPLC)是一种最常用的分析分离手段。而液相色谱填料(即液相色谱层析介质)则是高效液相色谱技术赖以建立和发展的关键性基础。其中，离子交换填料即为一种常见的液相色谱填料。随着细胞技术和生物工程的发展，存在着大量的蛋白质、酶等生物分子的纯化、分析工作，离子交换填料需要具有更高的动态载量(Dynamic Binding Capacity，DBC)，使其在相同甚至更少的用量下分离纯化更多的目标蛋白。
[0003]现有的离子交换填料的动态载量一般不超过60mg/mL，而随着蛋白分离纯化要求的提高以现有的离子交换填料已逐渐无法满足产业的需求，迫切需要快速、高载量的离子交换填料以满足蛋白纯化的需求。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种离子交换填料的表面修饰方法，可增大离子交换材料的动态载量。
[0005]本专利技术通过以下技术方案实现：
[0006]一种离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，包括如下步骤：
[0007]基球修饰：在修饰釜中加入纯化水以及氢氧化钠固体，搅拌均匀；向修饰釜内加入聚丙烯酸酯基球，搅拌均匀；向修饰釜内滴加入丙三醇缩水甘油醚，进行搅拌反应至少3小时；反应结束后，将物料转移入离心机进行甩滤得到修饰物料；
[0008]键合反应：在键合釜中加入纯化水以及硝酸，搅拌均匀；向键合釜内加入基球修饰后的得到的修饰物料、甲基丙烯酸缩水甘油酯以及1,4
‑
二氧六环，进行第一次搅拌反应；反应结束后，向键合釜内加入三甲胺水溶液，进行第二次搅拌反应；反应结束后，将物料转移入离心机进行甩滤。
[0009]进一步的，所述基球修饰步骤中聚丙烯酸酯基球、氢氧化钠固体以及丙三醇缩水甘油醚的重量比为1：2.8～3.1:9.3～9.5。
[0010]进一步的，所述聚丙烯酸酯基球与丙三醇缩水甘油醚的重量比为1:9.4。
[0011]进一步的，所述键合反应步骤中修饰物料、硝酸、甲基丙烯酸缩水甘油酯、1,4
‑
二氧六环以及三甲胺的重量比为1：0.09～0.11：0.23～0.25:1.4～1.6:1.8～2.2。
[0012]进一步的，所述丙三醇缩水甘油醚的滴加方式为在温度30～35℃下匀速滴加丙三醇缩水甘油醚，滴加时间为2.5～3.0小时。
[0013]进一步的，所述键合反应中第一次搅拌反应的搅拌反应的时间至少1小时，搅拌反应的温度为20～30℃。
[0014]进一步的，所述键合反应中第二次搅拌反应的搅拌反应的时间至少18小时，搅拌
反应的温度为20～30℃。
[0015]进一步的，所述基球修饰还包括如下步骤：
[0016]漂洗：使用纯化水对离心过滤后的得到的物料进行洗涤，洗涤完毕后滤干；使用无水乙醇对滤干后的物料进行洗涤，洗涤完毕后滤干；使用纯化水对滤干后的物料进行洗涤，洗涤结束后滤干；
[0017]洗涤：使用0.5M硫酸水溶液对漂洗后的物料进行洗涤；使用纯化水进行再次洗涤，洗涤完毕后滤干；将滤干后的物料装入物料桶备用。
[0018]进一步的，所述键合反应还包括如下步骤：
[0019]纯化水漂洗：将离心滤干后的物料使用纯化水进行洗涤，洗涤结束后滤干；
[0020]硫酸洗涤：将漂洗后的物料使用0.5M硫酸水溶液进行洗涤，之后使用纯化水进行洗涤，洗涤完毕后滤干；
[0021]沉降：将滤干后的物料转移至沉积桶，加入20％乙醇水溶液，搅拌均匀，沉降，填料分层后，抽去上层清液；重复沉降多次；
[0022]离心过滤：将沉降后的物料转移至离心机进行离心过滤。
[0023]进一步的，所述键合反应中沉降次数为2次。
[0024]相比于现有技术，本专利技术的优点在于：
[0025]1、本专利技术提供了一种离子交换填料的表面修饰方法，通过对聚丙烯酸酯基球进行修饰后进行表面活化以及键合反应，实现了增大离子交换的材料的动态载量，进而具有离子交换容量高、蛋白结合载量高、操作流速快等特点。
[0026]2、通过控制聚丙烯酸酯基球与丙三醇缩水甘油醚的重量比为1:9.3～9.5并选用匀速滴加甲基丙烯酸缩水甘油酯的方式，使得丙三醇缩水甘油醚在添加过程中不会因用量过多或分散不均匀而将聚丙烯酸酯基球表面的孔覆盖，进而避免内部孔隙的官能团不能与丙三醇缩水甘油醚接触、被修饰的官能团变少进而影响产品载量；并且也不会因丙三醇缩水甘油醚过少而导致聚丙烯酸酯基球内部的官能团无法完全被修饰；进一步增大离子交换的材料的动态载量。
附图说明
[0027]图1为本专利技术一种离子交换填料的表面修饰方法中基球修饰步骤的流程图；
[0028]图2为本专利技术一种离子交换填料的表面修饰方法中键合反应步骤的流程图。
具体实施方式
[0029]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术作进一步的详细说明，以使本领域技术人员能够充分理解本专利技术的
技术实现思路
。应理解，以下实施例用于对本专利技术进行进一步说明，不能理解为对本专利技术保护范围的限制，本领域的技术人员根据本专利技术的上述内容作出的一些非本质的改进和调整均属于本专利技术的保护范围。下述示例具体的工艺参数等也仅是合适范围中的一个示例，即本领域技术人员可以通过本文的说明做合适的范围内选择，而并非要限定于下文示例的具体数值。
[0030]参照图1至图2，本专利技术提供一种离子交换填料的表面修饰方法，包括以下主要步骤：
[0031]S1基球修饰：
[0032]修饰：在修饰釜中加入纯化水以及氢氧化钠固体，搅拌均匀；向修饰釜内加入聚丙烯酸酯基球，搅拌均匀；向修饰釜内加入丙三醇缩水甘油醚，进行搅拌反应至少3小时。其中，氢氧化钠固体、聚丙烯酸酯基球以及丙三醇缩水甘油醚的重量比为2.8～3.1:1:8.4～10.4，优选为2.8～3.1:1:9.3～9.5。进一步的，聚丙烯酸酯基球与丙三醇缩水甘油醚的重量比为优选为1:9.4。优选的，丙三醇缩水甘油醚的滴加方式为在温度30～35℃下匀速滴加丙三醇缩水甘油醚，滴加时间为2.5～3.0小时。
[0033]离心过滤：将反应结束得到的修饰物料移入离心机进行甩滤。
[0034]纯化水漂洗：使用纯化水对离心过滤后的得到的物料进行洗涤，其中，纯化水与聚丙烯酸酯基球的重量比为6～7:1，洗涤完毕后将物料滤干。
[0035]乙醇漂洗：使用无水乙醇对滤干后的物料进行洗涤，其中，无水乙醇与聚丙烯酸酯基球的重量比为5～6:1，洗涤完毕后将物料滤干。
[0036]纯化水漂洗：使用纯化水对离心过滤后的得到的物料进行洗涤，其中，纯化水与聚丙烯酸酯基球的重量比为6～7:1，洗涤完毕后将物料滤干。
[0037]硫酸洗涤：使用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，包括如下步骤：基球修饰：在修饰釜中加入纯化水以及氢氧化钠固体，搅拌均匀；向修饰釜内加入聚丙烯酸酯基球，搅拌均匀；向修饰釜内滴加入丙三醇缩水甘油醚，进行搅拌反应至少3小时；反应结束后，将物料转移入离心机进行甩滤得到修饰物料；键合反应：在键合釜中加入纯化水以及硝酸，搅拌均匀；向键合釜内加入基球修饰后的得到的修饰物料、甲基丙烯酸缩水甘油酯以及1,4
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二氧六环，进行第一次搅拌反应；反应结束后，向键合釜内加入三甲胺水溶液，进行第二次搅拌反应；反应结束后，将物料转移入离心机进行甩滤。2.根据权利要求1所述的离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，所述基球修饰步骤中聚丙烯酸酯基球、氢氧化钠固体以及丙三醇缩水甘油醚的重量比为1：2.8～3.1:9.3～9.5。3.根据权利要求2所述的离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，所述聚丙烯酸酯基球与丙三醇缩水甘油醚的重量比为1:9.4。4.根据权利要求1所述的离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，所述键合反应步骤中修饰物料、硝酸、甲基丙烯酸缩水甘油酯、1,4
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二氧六环以及三甲胺的重量比为1：0.09～0.11：0.23～0.25:1.4～1.6:1.8～2.2。5.根据权利要求2所述的离子交换填料的表面修饰方法，其特征在于，所述丙三醇缩水甘油醚的滴加方式为在温度30～35℃下匀速滴加丙三醇缩水甘油醚，滴加时间为...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈德君，管晨曦，徐新东，孙鹏，
申请(专利权)人：赛分科技扬州有限公司，
类型：发明
国别省市：