一种可重复使用的固定金属离子亲和色谱吸附剂及其制备和应用制造技术

本发明专利技术涉及一种可重复使用的固定化金属离子亲和色谱(Immobilizedmetal affinity chromatography，IMAC)吸附剂及其制备和应用。具体是以二缩三丙二醇二丙烯酸酯和甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，采用悬浮聚合法制备带有环氧官能团的聚合物微球，然后用乙二胺将微球表面进行氨基功能化，接着以3,4,5

【技术实现步骤摘要】
一种可重复使用的固定金属离子亲和色谱吸附剂及其制备和应用


[0001]本专利技术涉及一种可重复使用的固定金属离子亲和色谱吸附剂的制备及其在富集磷酸肽方面的应用。具体是以带有环氧基团的聚合物微球为基质，分别用3,4,5
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三羟基苯甲醛和Ti
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进行修饰，制备一种可用于磷酸肽富集的固定化金属离子亲和色谱功能材料，由于富集
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洗脱磷酸肽过程的可逆性，该材料用作吸附剂可被重复使用。

技术介绍

[0002]在人体生命中，蛋白质的磷酸化修饰是一种非常复杂的蛋白质翻译后修饰，其参与了几乎所有的生命活动过程，包括细胞的繁殖、发育、分化和凋亡等。磷酸化的异常通常都与疾病相关，如白血病，老年痴呆，癌症等，因此研究蛋白质的磷酸化过程和机理具有重要的理论和现实意义(文献1，Ubersax J.A.,et.al"Mechanism of specificity in protein phosphorylation"Nat.Mol.Cell.2007,8,530
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541；文献2，Huttlin E本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种固定化金属离子亲和色谱吸附剂的制备方法，首先以带有环氧官能团的聚合物微球为基质，乙二胺为氨基化试剂，利用环氧
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胺开环反应，对微球表面进行氨基化处理，再以3,4,5
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三羟基苯甲醛为修饰剂，利用氨醛缩合反应在微球表面引入邻苯三酚基团，形成席夫碱，还原后，与Ti
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离子进行螯合，即制备出Ti
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IMAC功能材料，该材料可用作固定化金属离子亲和色谱的吸附剂。2.按照权利要求1所述固定化金属离子亲和色谱吸附剂的制备方法，其特征在于：(1)以二缩三丙二醇二丙烯酸酯和甲基丙烯酸缩水甘油酯为单体，聚乙烯醇为分散剂，过氧化苯甲酰为引发剂，采用悬浮聚合法制备带有环氧官能团的聚合物微球；(2)以乙二胺为氨基化试剂，利用环氧
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胺开环反应，对微球表面进行氨基化处理；(3)以3,4,5
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三羟基苯甲醛为修饰剂，利用氨醛缩合反应，在微球表面形成含邻苯三酚基团的席夫碱，再用硼氢化钠将席夫碱中可逆的的氨氮双键还原为不可逆的氨氮单键，增加材料的稳定性；(4)以硫酸钛为螯合剂在微球表面螯合Ti
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离子，制备Ti
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IMAC功能材料。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：可按如下步骤操作，(1)带有环氧官能团的聚合物微球的制备：先将0.2～0.6g的聚乙烯醇加入到20～60mL水
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甲苯的混合溶剂中(水/甲苯＝5/1～5/3，体积比)，在50～150rpm的机械搅拌下，升温到70～85℃使其完全溶解后再冷却至室温；然后逐滴加入2.0～4.0mL甲基丙烯酸缩水甘油酯和3.0～6.0mL二缩三丙二醇二丙烯酸酯，接着加入50～100mg的过氧化苯甲酰，继续以50～150rpm的搅拌速率进行机械搅拌，2～...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧俊杰，孙传盛，马淑娟，
申请(专利权)人：威高集团有限公司，
类型：发明
国别省市：