戊酮噻吩类化合物及其制备方法和在抗炎药物中的应用技术

本发明专利技术公开了戊酮噻吩类化合物及其制备方法和在抗炎药物中的应用。本发明专利技术人通过对南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702液体发酵提取物分离纯化，从中获得了化合物Ochrathinols A和B((

【技术实现步骤摘要】
戊酮噻吩类化合物及其制备方法和在抗炎药物中的应用


[0001]本专利技术属于海洋天然产物化学领域，具体涉及戊酮噻吩类化合物及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用。

技术介绍

[0002]天然化合物是创新药物研究的重要源泉。统计表明，从1981年至2019年共计三十九年的时间里批准的小分子药物约有1602个，这些小分子药物中有三分之二可追溯到天然产物，或受天然产物启迪。目前，从南极等极端环境来源微生物中，获得骨架新颖的活性次生代谢产物已逐渐成为天然药物研究的重要方向之一。

技术实现思路

[0003]本专利技术的第一个目的是具有抗炎活性的戊酮噻吩类化合物Ochrathinols((
±
)
‑
1和(
±
)
‑
2)。
[0004]本专利技术的戊酮噻吩类化合物，其结构如式(Ⅰ)中的任一所示：
[0005][0006]本专利技术的第二个目的是提供如式(Ⅰ)所示的化合物Ochrathinols A和B((
±
)
‑
1和(
±
)
‑
2)在制备抗炎药物中的应用。
[0007]本专利技术的第三个目的是提供南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702在制备上述戊酮噻吩类化合物的应用。
[0008]本专利技术的第四个目的是提供一种戊酮噻吩类化合物的制备方法，包括以下步骤：
[0009]制备南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702的发酵培养物；
[0010]将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离，发酵液用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩后得到浸膏A；菌丝体先用丙酮浸提，合并浸提液，浸提液回收丙酮后剩余水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩后得到浸膏B，将浸膏A和浸膏B合并，得到粗提物；粗提物经中压正相硅胶柱层析，二氯甲烷/甲醇从100:0梯度洗脱至0:100，收集二氯甲烷/甲醇体积比为92:8洗脱的馏分fr5；将该馏分进行葡聚糖凝胶Sephadex LH
‑
20层析纯化处理，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1作为流动相洗脱，收集含有210和300nm特征波长的吸收峰
的馏分fr5
‑
2，再经纯化得到戊酮噻吩类化合物。
[0011]优选，所述的发酵培养物是将南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702接种到发酵培养基中，培养获得发酵培养物；
[0012]所述的发酵培养基：每1000mL培养基是这样配制的：甘露醇20g、麦芽糖20g、葡萄糖 10g、谷氨酸钠10g、KH2PO
4 0.5g、MgSO4·
7H2O 0.3g、酵母浸膏3g、玉米干粉0.3g，然后溶于适量的水中，用水定容至1000mL。
[0013]优选，所述的培养是25℃，180rpm，培养制得种子液，将种子液以体积百分比5％的接种量接入到发酵培养基中，25℃，摇床培养35天，得到南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702 的发酵产物。
[0014]优选，所述的纯化是以210和300nm波长做检测、采用4mL/min的流速，以乙腈：水(9:91, v/v)进行等梯度洗脱进行半制备高效液相分离，HPLC(YMC
‑
pack ODS
‑
A,10
×
250mm, 5μm)，得到Ochrathinol A和Ochrathinol B。
[0015]本专利技术人通过对南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702液体发酵提取物分离纯化，从中获得了化合物Ochrathinols A和B((
±
)
‑
1和(
±
)
‑
2)。经结构分析，化合物1和2均为新化合物，具体结构如式(Ⅰ)所示。通过对化合物1和2的抗炎活性评价，发现化合物新化合物Ochrathinol A (1)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞株RAW264.7产生的一氧化氮具有显著的抑制作用，同时抑制IL
‑
6和TNF
‑
α等促炎因子的mRNA表达，在相同浓度下，对RAW264.7细胞无细胞毒活性，可以作为抗炎药物开发的先导化合物。
[0016]曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702于2015年1月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中科院微生物研究所，保藏编号为：CGMCC No.10279。
附图说明
[0017]图1：戊酮噻吩类化合物1和2主要的1H
‑1H COSY,HMBC和NOESY信息；
[0018]图2：戊酮噻吩类化合物1和2的单晶X
‑
Ray；
[0019]图3：戊酮噻吩类化合物1和2抑制NO释放活性；
[0020]图4：戊酮噻吩类化合物1和2抑制炎症因子活性。其中control代表空白对照，LPS代表脂多糖处理，LPS+(+)
‑
1，LPS+(
‑
)
‑
1，LPS+(
±
)
‑
1，LPS+(+)
‑
2，LPS+(
‑
)
‑
2，LPS+(
±
)
ꢀ‑
2代表LPS+各化合物处理，A中每组柱形图从左至右依次为control，LPS，LPS+(+)
‑
1，LPS+ (
‑
)
‑
1，LPS+(
±
)
‑
1，LPS+(+)
‑
2，LPS+(
‑
)
‑
2，LPS+(
±
)
‑
2；B中每组柱形图从左至右依次为control，LPS，LPS+(+)
‑
1，LPS+(
‑
)
‑
1，LPS+(
±
)
‑
1。
具体实施方式
[0021]以下结合实施例来进一步解释本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。
[0022]实施例1：化合物1和2的制备及结构鉴定
[0023]1、制备南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702的发酵培养物。
[0024]发酵培养基：每1000mL培养基是这样配制的：甘露醇20g、麦芽糖20g、葡萄糖10g、谷氨酸钠10g、KH2PO
4 0.5g、MgSO4·
7H2O 0.3g、酵母浸膏3g、玉米干粉0.3g，然后溶于适量
的水中，用水定容至1000mL，121℃高温灭菌20min，备用。
[0025]将南极曲霉Aspergillus sp.S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.戊酮噻吩类化合物，其结构如式(Ⅰ)中的任一所示：2.权利要求1所述的戊酮噻吩类化合物在制备抗炎药物中的应用。3.一种抗炎药物，其特征在于，含有权利要求1所述的戊酮噻吩类化合物作为活性成分。4.南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702在制备权利要求1所述的戊酮噻吩类化合物中的应用。5.一种权利要求1所述的戊酮噻吩类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：制备南极曲霉Aspergillus sp.SCSIO 05702的发酵培养物；将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离，发酵液用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩后得到浸膏A；菌丝体先用丙酮浸提，合并浸提液，浸提液回收丙酮后剩余水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液浓缩后得到浸膏B，将浸膏A和浸膏B合并，得到粗提物；粗提物经中压正相硅胶柱层析，二氯甲烷/甲醇从100:0梯度洗脱至0:100，收集二氯甲烷/甲醇体积比为92:8洗脱的馏分fr5；将该馏分进行葡聚糖凝胶Sephadex LH
‑
20层析纯化处理，以二氯甲烷/甲醇体积比1:1作为流动相洗脱，收集含有210和300nm特征波长的吸收峰的馏分fr5
‑
2，再经纯化得到戊酮噻吩类化合物。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：±，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：