抗GPRC5D抗体、其制备方法与用途技术

本发明专利技术公开了抗GPRC5D抗体、其制备方法与用途，所述抗体包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:44(HCDR1)、SEQ ID NO:99(HCDR2)和SEQID NO:100(HCDR3)所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:101(LCDR1)、SAS(LCDR2)和SEQ ID NO:102(LCDR3)所示的氨基酸序列；或，所述重链可变区包含SEQ ID NO:29(HCDR1)、SEQ ID NO:30(HCDR2)和SEQ ID NO:31(HCDR3)所示的氨基酸序列，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:47(LCDR1)、YAS(LCDR2)和SEQ ID NO:48(LCDR3)所示的氨基酸序列。所述抗GPRC5D抗体具有较强的结合活性、反应特异性、物种交叉反应性和内吞活性，适应于后续癌症等相关疾病的治疗和产品开发。开发。开发。

【技术实现步骤摘要】
抗GPRC5D抗体、其制备方法与用途
[0001]本专利技术要求在2021年5月23日提交中国专利局、申请号为202110561818.0、申请名称为“抗GPRC5D抗体、其制备方法与用途”的中国专利申请的优先权，其全部内容通过引用结合在本申请中。


[0002]本专利技术涉及抗体
，具体涉及抗GPRC5D抗体、其制备方法与用途。

技术介绍

[0003]多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)是全球仅次于非霍奇金氏淋巴瘤的第二常见血液肿瘤，约占血液系统恶性肿瘤的10％。根据WHO发布的全球癌症统计报告，2018年中国新发多发性骨髓瘤患者20,066例，死亡患者14,665例；5年累计发病人数44,643例。且患者的发病率和死亡率随着年龄增长而逐步上升。因此，随着我国人口老龄化程度不断加剧，患病总人数也将逐渐增多，临床需求巨大。近十年来，以沙利度胺及其衍生物来那度胺为代表的免疫调节剂和以硼替佐米为代表的小分子蛋白酶体抑制剂的应用，极大地提高了MM患者的缓解率和生存期。目前我国针对多发性骨髓瘤的治疗方案可分为三类：免疫调节剂、蛋白酶体抑制剂和抗CD38单抗的靶向治疗。免疫调节剂和蛋白酶体抑制剂主要用于符合干细胞移植条件的患者在移植前接受的一线联合治疗及移植后的维持治疗。一线治疗复发或难治性多发性骨髓瘤的二线治疗方案则考虑使用2019年国家药监局(NMPA)有条件批准的通过进口注册上市的抗CD38单抗Daratumumab。然而经过短周期的治疗之后，再次复发病人便陷入无药可用的尴尬处境。因此，MM的复发性和难治性依旧困扰着人们，促使人们不断寻求新的治疗靶点和方法应用于MM复发/难治性的情况中。
[0004]小分子抑制剂治疗复发及生物药相关技术的快速发展，加速了针对MM靶向性疗法的研发。目前被FDA批准的生物大分子靶向疗法包括靶向浆细胞表面蛋白CD38、信号淋巴细胞激活分子家族成员7(Signaling Lymphocytes Activating Molecule Factor 7，SLAMF7)和B细胞成熟抗原(B Cell Maturation Antigen，BCMA)等三大靶点，获批的药物的类型主要包括：单抗和抗体偶联药物(Antibody
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Drug Conjugate，ADC)。相较于CD38、SLAMF7靶点，BCMA蛋白在MM细胞上的表达更特异性。2020年8月美国FDA加速批准了靶向BMCA的ADC药物Blenrep用于治疗中位7线复发的患者，总体缓解率仍能达到31％，中位缓解持续时间(DoR)大于6个月。此外，靶向BCMA的CAR
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T或CD3双特异性抗体通过介导T细胞起到的抗肿瘤疗效亦然显著。BCMA药物研发赛道有包括蓝鸟、BMS、安进、强生、再生原以及南京传奇等众多国际著名生物医药公司参与，竞争十分激烈。近年来在我国政府的大力引导下，中国生物医药行业也在迅速崛起，涌现出了多家布局MM的靶向性新药研发公司，但多是集中在CD38、BCMA靶点的双抗和CAR
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T方向，面临极大的国内外同质化竞争压力。此外，虽然靶向BCMA的ADC、双抗及CAR
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T疗法已显示出了积极的临床效果，但有关BCMA阴性(或低表达)及相关的治疗后复发病例已见报道，突显多发性骨髓瘤治疗亟需更多靶点。
[0005]G蛋白偶联受体(G protein
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coupled receptor，GPCR)是具有7个跨膜螺旋的蛋白
质受体，根据其序列的相似性以及与配基的结合情况，共分为5个亚家族，是人体内最大的蛋白质家族，也是重要的药物靶标。G蛋白偶联受体C5家族亚型D(GPRC5D)是最早于2001年鉴定出的孤儿非典C类GPCR(Brauner
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Osborne,H.,et al.Cloning and characterization of a human orphan family C G
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protein coupled receptor GPRC5D.Biochim Biophys Acta,2001.1518(3):p.237
‑
48)。GPCR家族C组5受体(GPRC5受体)共有4种亚型，即GPRC5A、GPRC5B、GPRC5C和GPRC5D，它们由视黄酸诱导表达，所以也称为视黄酸诱导的孤儿G蛋白偶联受体(Inoue,S.,T.Nambu,and T.Shimomura,The RAIG family member,GPRC5D,is associated with hard
‑
keratinized structures.Journal of Investigative Dermatology,2004.122(3):p.565
‑
573)。
[0006]GPRC5D先前已在多发性骨髓瘤患者的细胞中被鉴定发现，然而因为缺少蛋白表达谱研究，一直未被应用于临床开发。直至2019年的研究报道显示，GPRC5D在多发性骨髓瘤的浆细胞中高表达，在正常组织中多不表达，仅在具有免疫赦免性的毛囊区域有表达(Smith,E.L.,et al.,GPRC5D is a target for the immunotherapy of multiple myeloma with rationally designed CAR T cells.Science Translational Medicine,2019.11(485))。有研究报道，GPRC5D的高表达与多发性骨髓瘤的不良预后相关(Atamaniuk,J.,et al.,Overexpression of G protein
‑
coupled receptor 5D in the bone marrow is associated with poor prognosis in patients with multiple myeloma.European Journal of Clinical Investigation,2012.42(9):p.953
‑
960)。此外，另一重要的发现是GPRC5D的表达谱与BCMA并不重叠，因此将可能成为BCMA低/不表达或继BCMA治疗复发后的全新治疗靶点。然而，由于GPCR蛋白属于7跨膜蛋白，结构复杂且抗原难以获取，特异性抗体较难获取，目前仅少数靶向GPRC5D药物还处于临床试验阶段或者研发阶段。有鉴于此，本专利技术通过组合免疫方法与抗体库技术开发了具有更高活性、更高亲和力、更高特异性和更好治疗效果的GPRC5D药物，以进行相关疾病的诊断、治疗研究和应用。

技术实现思路

[0007]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种抗体，能够高特异性结合G蛋白偶联受体C5家族亚型D(GPRC5D)。
[0008]本专利技术还提出与上述抗体相关的重组蛋白、药物组合物、多核苷酸、重组质粒和分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和/或轻链可变区：所述重链可变区，其包含：由SEQ ID NO:44所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR1，由INPX1NGX2T的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR2，由ARX3ALRYAMDY氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR3；所述轻链可变区，其包含：由QX4X5X6TX7的氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR1，由SAS的氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR2，由QQX8X9X
10
X
11
PVT的氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR3；其中，X1:代表Y、P、R、L、D、S、G、K、V、T、M和Q的任一氨基酸，X2:代表R和A的任一氨基酸，X3:代表V和A的任一氨基酸，X4:代表S和A的任一氨基酸，X5:代表V和A的任一氨基酸，X6:代表S、V、L、R、H、E、G、Q、M和Y的任一氨基酸，X7:代表R、P、H、S、W、I、G、V和N的任一氨基酸，X8:代表Y和A的任一氨基酸，X9:代表N和A的任一氨基酸，X
10
:代表S和A的任一氨基酸，X
11
:代表Y和A的任一氨基酸。2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体为鼠源抗体、嵌合抗体或人源抗体。3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，所述重链可变区选自如SEQ ID NO:79、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:85或SEQ ID NO:87所示的氨基酸序列；所述轻链可变区选自如SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：宁婷婷，魏海涛，李亚男，王平，董国良，李秀兰，罗雪琴，
申请(专利权)人：上海祥耀生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：