【技术实现步骤摘要】
Acta,2001.1518(3):p.237
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48)。GPCR家族C组5受体(GPRC5受体)共有4种亚型，即GPRC5A、GPRC5B、GPRC5C和GPRC5D，它们由视黄酸诱导表达，所以也称为视黄酸诱导的孤儿G蛋白偶联受体(Inoue,S.,T.Nambu,and T.Shimomura,The RAIG family member,GPRC5D,is associated with hard
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keratinized structures.Journal of Investigative Dermatology,2004.122(3):p.565
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573)。
[0005]GPRC5D先前已在多发性骨髓瘤患者的细胞中被鉴定发现，然而因为缺少蛋白表达谱研究，一直未被应用于临床开发。直至2019年的研究报道显示，GPRC5D在多发性骨髓瘤的浆细胞中高表达，在正常组织中多不表达，仅在具有免疫赦免性的毛囊区域有表达(Smith,E.L.,et al.,GPRC5D is a target for the immunotherapy of multiple myeloma with rationally designed CAR T cells.Science Translational Medicine,2019.11(485))。有研究报道，GPRC5D的高表达与多发性骨髓瘤的不良预后相关(Atamaniuk,J.,et al.,Overexpression of G protein>‑
coupled receptor 5D in the bone marrow is associated with poor prognosis in patients with multiple myeloma.European Journal of Clinical Investigation,2012.42(9):p.953
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960)。此外，另一重要的发现是GPRC5D的表达谱与BCMA并不重叠，因此将可能成为BCMA低/不表达或继BCMA治疗复发后的全新治疗靶点。专利技术人团队长期深耕GPCR与肿瘤免疫领域，在关注到该项目研究成果时，随即启动了一项关于GPRC5D特异性抗体新药研发项目。然而，由于GPCR蛋白属于7跨膜蛋白，结构复杂且抗原难以获取，传统的抗体开发方案基本不可行。基于专利技术人团队长期以来致力于抗体新药开发领域关键性技术的创新研发积累，突破了该靶点免疫、单抗产生及筛选等多项关键技术难点，成功筛选到了多个特异、灵敏的GPRC5D抗体，并验证了其药学活性。
[0006]GPRC5D是一种有望用于MM免疫治疗的表面抗原，但目前大多数GPRC5D药物还处于临床试验阶段或者研发阶段，还没有靶向GPRC5D的药物上市，因此，有必要进一步开发具有更高活性、更高亲和力、更高特异性和更好治疗效果的GPRC5D药物，以进行相关疾病的治疗研究和应用。
技术实现思路
[0007]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种抗体，能够高特异性结合G蛋白偶联受体C5家族亚型D(GPRC5D)。
[0008]本专利技术还提出与上述抗体相关的重组蛋白、药物组合物、多核苷酸、重组质粒和分离细胞。
[0009]本专利技术还提出上述抗体的制备方法。
[0010]本专利技术还提出上述抗体在制备抗癌药物中的应用。
[0011]本专利技术还提出上述抗体在制备抗体检测试剂盒中的应用。
[0012]根据本专利技术的第一方面实施方式的抗体，所述抗体包含重链可变区和/或轻链可变区：
[0013]所述重链可变区，其包含：由SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR1，由SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR2，由SEQ ID NO:31所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR3；
[0014]所述轻链可变区，其包含：由SEQ ID NO:47所示的氨基酸序列组成的轻链互补决
定区LCDR1，由YAS氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR2，由SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR3。
[0015]根据本专利技术实施方式的抗体，至少具有如下有益效果：本专利技术的抗体具有(1)结合活性好，与GPRC5D蛋白较强的结合能力；(2)特异性强，与CD19、CD3、CD11b和CD14等抗体均不结和，能够更特异性靶向GPRC5D从而减少脱靶带来的毒性，因此安全性更佳；(3)物种交叉反应性，与猴GPRC5D具有交叉反应性，利于开展验证实验和便于后续有治疗用途的产品开发；(4)抗体内吞作用，在细胞中具有内吞活性，适合ADC药物的开发。
[0016]根据本专利技术的一些实施方式，所述为鼠源抗体、嵌合抗体或人源抗体。
[0017]在本专利技术中，人GPRC5D基因CDS区碱基序列如SEQ ID NO:3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0018]在本专利技术中，所述抗体除重链可变区和轻链可变区的序列外，还包括含有lgG1的重链恒定区氨基酸序列和含有Kappa的轻链恒定区氨基酸序列。
[0019]根据本专利技术的一些实施方式，所述重链可变区选自如SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:65或SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列；所述轻链可变区选自如SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:75或SEQ ID NO:77所示的氨基酸序列。
[0020]根据本专利技术的一些实施方式，所述重链可变区为SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区为SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列；
[0021]或所述重链可变区为SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列；
[0022]或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列；
[0023]或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列；
[0024]或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列；
[0025]或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列；
[0026]或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列，和/或所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列。
[0027]根据本专利技术的一本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种抗体，其特征在于，所述抗体包含重链可变区和/或轻链可变区：所述重链可变区，其包含：由SEQ ID NO:29所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR1，由SEQ ID NO:30所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR2，由SEQ ID NO:31所示的氨基酸序列组成的重链互补决定区HCDR3；所述轻链可变区，其包含：由SEQ ID NO:47所示的氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR1，由YAS氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR2，由SEQ ID NO:48所示的氨基酸序列组成的轻链互补决定区LCDR3。2.根据权利要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体为鼠源抗体、嵌合抗体或人源抗体。3.根据权利要求1或2所述的抗体，其特征在于，所述重链可变区选自如SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:65或SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列；所述轻链可变区选自如SEQ ID NO:69、SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:73、SEQ ID NO:75或SEQ ID NO:77所示的氨基酸序列。4.根据权利要求3所述的抗体，其特征在于，所述重链可变区为SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区为SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列；或所述重链可变区为SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列；或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列；或所述重链可变区的序列为SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列，且所述轻链可变区的序列为SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列；或所述重链可...
【专利技术属性】
技术研发人员：魏海涛，褚敏，尚玉栓，李亚男，王平，董国良，李秀兰，罗雪琴，
申请(专利权)人：上海祥耀生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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