一种抗GPRC5D的多特异性抗体制造技术

技术编号：41130752 阅读：2 留言：0更新日期：2024-04-30 18:00

本发明专利技术涉及一种结合GPRC5D和CD3抗原的多特异性抗体及其抗原结合分子，编码该多特异性抗体及其抗原结合分子的核酸分子，包含该核酸分子的载体，包含该载体的宿主细胞，包含该多特异性抗体及其抗原结合分子的重组蛋白或免疫缀合物，以及它们在在制备治疗或预防疾病，特别是治疗多发性骨髓瘤的药物方面的用途，以及在检测产品方面的应用。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种抗gprc5d的多特异性抗体，属于生物医药领域。

技术介绍

1、多发性骨髓瘤(multiple myeloma，mm)是全球仅次于非霍奇金氏淋巴瘤的第二常见血液肿瘤，约占血液系统恶性肿瘤的10％。根据who发布的全球癌症统计报告，2018年中国新发多发性骨髓瘤患者20,066例，死亡患者14,665例；5年累计发病人数44,643例。并且，患者的发病率和死亡率随着年龄增长而逐步上升，随着我国人口老龄化程度不断加剧，患病总人数也将逐渐增多，临床需求巨大。

2、目前我国针对多发性骨髓瘤的治疗方案可分为三类：免疫调节剂、蛋白酶体抑制剂和生物分子靶向性疗法。其中，免疫调节剂和蛋白酶体抑制剂主要用于符合干细胞移植条件的患者在移植前接受的一线联合治疗及移植后的维持治疗；例如，近十年来，以沙利度胺及其衍生物来那度胺为代表的免疫调节剂和以硼替佐米为代表的小分子蛋白酶体抑制剂的应用，极大地提高了mm患者的缓解率和生存期。

3、针对mm的生物分子靶向药物，主要涉及三大靶点：浆细胞表面蛋白cd38、信号淋巴细胞激活分子家族成员7(signaling lymphocytes activating molecule factor 7，slamf7)和b细胞成熟抗原(b cell maturation antigen，bcma)，

4、其中，抗cd38单抗(例如，2019年国家药监局(nmpa)有条件批准并进口注册上市的daratumumab)主要用于一线治疗复发或二线治疗难治性多发性骨髓瘤。

<p>5、此外，bcma蛋白因其在mm细胞上的高表达特异性也成为本领域的研究热点。2020年8月美国fda加速批准了靶向bmca的抗体偶联药物(antibody-drug conjugate，adc)blenrep用于治疗中位7线复发的患者；该药总体缓解率仍能达到31％，中位缓解持续时间(dor)大于6个月。此外，靶向bcma的car-t或cd3双特异性抗体通过介导t细胞起到的抗肿瘤疗效亦然显著。

6、然而，虽然靶向bcma的adc、双抗及car-t疗法已显示出了积极的临床效果，但有关bcma阴性(或低表达)及相关的治疗后复发病例已见报道，mm的复发性和难治性仍然是mm临床治疗的难点，寻找新的有效靶点仍然是本领域亟待解决的问题。

7、已有研究报道，gprc5d的高表达与多发性骨髓瘤的不良预后相关(atamaniuk,j.,et al.,overexpression of g protein-coupled receptor 5d in the bone marrow isassociated with poor prognosis in patients with multiple myeloma.europeanjournal of clinical investigation,2012.42(9):p.953-960)。

8、gprc5d属于g蛋白偶联受体(gprotein-coupled receptor，gpcr)家族；具体的，其为g蛋白偶联受体c5家族亚型d，是最早于2001年鉴定出的孤儿非典c类gpcr(brauner-osborne,h.,et al.cloning and characterization of a human orphan family c g-protein coupled receptor gprc5d.biochim biophys acta,2001.1518(3):p.237-48)。

9、虽然，gprc5d先前已在多发性骨髓瘤患者的细胞中被鉴定发现，但因为缺少蛋白表达谱研究，一直未被应用于临床开发。直至2019年的研究报道显示，gprc5d在多发性骨髓瘤的浆细胞中高表达，在正常组织中多不表达，仅在具有免疫赦免性的毛囊区域有表达(smith,e.l.,et al.,gprc5d is a target for the immunotherapy of multiplemyeloma with rationally designed car t cells.science translational medicine,2019.11(485))。更为让人惊讶的发现是，gprc5d的表达谱与bcma并不重叠——该发现让本领域研究人员意识到gprc5d有望成为替代bcma靶向治疗、或者治疗bcma低/不表达的患者或者，承继bcma治疗复发后的全新治疗靶点。

技术实现思路

1、本专利技术的专利技术人基于gprc5d抗原开发了一种新的特异性结合gprc5d的抗体及其抗原结合分子，并进一步开发了结合靶细胞上的gprc5d抗原和t细胞上的活化性t细胞抗原(诸如cd3)的双/多特异性抗体及其抗原结合分子；本专利技术的双/多特异性抗体及其抗原结合分子同时结合靶细胞和t细胞并使得它们相互作用，从而引起细胞毒性t细胞活化，靶细胞被裂解。

2、本专利技术的第一个方面提供了一种多特异性抗体或其抗原结合分子，其中，

3、所述多特异性抗体或其抗原结合分子包含第一抗原结合模块和第二抗原结合模块；

4、其中，所述第一抗原结合模块结合gprc5d，所述第二抗原结合模块结合cd3或cd3ε；

5、所述第一抗原结合模块包含重链可变区i-vh和轻链可变区i-vl，所述重链可变区i-vh包含如seq id no.1所示的i-hcdr1、如seq id no.2所示的i-hcdr2和如seq id no.3所示的i-hcdr3；所述轻链可变区i-vl包含如seq id no.4所示的i-lcdr1、氨基酸序列为sas的i-lcdr2和如seq id no.5所示的i-lcdr3；

6、所述第二抗原结合模块包含重链可变区ii-vh和轻链可变区ii-vl，所述重链可变区ii-vh包含如seq id no.6所示的ii-hcdr1、如seq id no.7所示的ii-hcdr2和如seq idno.8所示的ii-hcdr3；所述轻链可变区ii-vl包含如seq id no.9所示的ii-lcdr1、氨基酸序列为gtn的ii-lcdr2和如seq id no.10所示的ii-lcdr3。

7、在本专利技术的一个更优选实施方案中，所述第一抗原结合模块的重链可变区i-vh的序列如seq id no.11所示，或者其与seq id no.11所示序列有80％以上的序列同源性。例如，所述第一抗原结合模块的重链可变区i-vh的序列与seq id no.11所示序列具有80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同源性。

8、在本专利技术的另一个更优选实施方案中，所述第一抗原结合模块的轻链可变区i-vl的序列如seq id no.12所示，或者其与seq id no.12所示序列本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

2.如权利要求1所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

3.如权利要求1或2所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：所述第一抗原结合模块选自Fv、Fab、F(ab’)2、Fab’、dsFv、scFv、sc(Fv)2或单链抗体中的任意一种；

4.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：所述第一抗原结合模块和所述第二抗原结合模块是Fab分子。

5.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：所述第一抗原结合模块与所述第二抗原结合模块之间通过接头肽融合。

6.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

7.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

8.一种核酸分子，所述核酸分子编码如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子的核酸分子。

9.包含如权利要求8中所述核酸分子的载体。

10.包含如权利要求8所述核酸分子或权利要求9所述载体的宿主细胞。

11.一种重组蛋白，其特征在于：所述重组蛋白包含如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子。

12.一种免疫缀合物，其包含如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子。

13.一种药物组合物，其特征在于：所述药物组合物包含如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，或者包含如权利要求8所述的核酸分子，或者包含如权利要求10所述载体，或者包含如权利要求10所述宿主细胞，或者包含如权利要求12所述的重组蛋白，或者包含如权利要求12所述的免疫缀合物，以及药学上可接受的载剂。

14.一种检测产品，其特征在于：所述检测产品包含如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，或者包含如权利要求8所述的核酸分子，或者包含如权利要求9所述载体，或者包含如权利要求10所述宿主细胞，或者包含如权利要求11所述的重组蛋白，或者权利要求12所述的免疫缀合物。

15.如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，或者如权利要求8所述的核酸分子，或者如权利要求9所述载体，或者如权利要求10所述宿主细胞，或者如权利要求11所述的重组蛋白，或者权利要求12所述的免疫缀合物，或者如权利要求13所述药物组合物，在制备治疗或预防疾病的药物方面的用途；较佳的，所述疾病为癌症或自身免疫疾病；较佳的，所述疾病为多发性骨髓瘤。

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【技术特征摘要】

1.一种多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

2.如权利要求1所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

3.如权利要求1或2所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：所述第一抗原结合模块选自fv、fab、f(ab’)2、fab’、dsfv、scfv、sc(fv)2或单链抗体中的任意一种；

4.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：所述第一抗原结合模块和所述第二抗原结合模块是fab分子。

5.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：所述第一抗原结合模块与所述第二抗原结合模块之间通过接头肽融合。

6.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

7.如权利要求3所述的多特异性抗体或其抗原结合分子，其特征在于：

8.一种核酸分子，所述核酸分子编码如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗原结合分子的核酸分子。

9.包含如权利要求8中所述核酸分子的载体。

10.包含如权利要求8所述核酸分子或权利要求9所述载体的宿主细胞。

11.一种重组蛋白，其特征在于：所述重组蛋白包含如权利要求1至7中任意一项所述的多特异性抗体或其抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵文祥，魏海涛，宁婷婷，李亚男，董国良，李秀兰，
申请(专利权)人：上海祥耀生物科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：

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