一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法技术

本发明专利技术涉及药物检测技术领域，更具体而言，涉及一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法。所述多种杂质为呋喃西林、糠醛、5

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物检测
，更具体而言，涉及一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法。

技术介绍

[0002]呋喃妥因于1953年在美国上市，在20世纪70～80年代被广泛地应用，是一个经典的治疗尿路感染的药物。在60多年的应用历史中未发生耐药性问题，可以有效地治疗急性下尿路感染、慢性尿路感染和预防导管相关的感染，可以作为预防经尿道前列腺电切术感染的基础药物，并阻止再感染。其作用主要归功于其在尿液中的高浓度和血浆的低浓度，有效的覆盖革兰氏阳性和阴性细菌，且很少有耐药菌株的产生，而优于其他的新药。
[0003]呋喃西林是呋喃妥因合成副产物，毒性较大，中国药典2020年版与美国药典USP
‑
NF 2021呋喃妥因的质量标准中，均采用HPLC法对呋喃西林进行控制，限度均为0.01％。
[0004]5‑
硝基糠醛二乙酯为合成呋喃妥因的起始物料，在最后一步缩合反应中带入，应在呋喃妥因中进行控制，目前，各国药典中仅美国药典USP
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NF 2021采用薄层色谱法控制，但方法灵敏度较低，限度为不得过1.0％。
[0005]糠醛为起始物料(5
‑
硝基糠醛二乙酯)合成所用物料。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单，糠醛在3类致癌物清单中。根据CPDB数据库，糠醛的TD
50
为683mg/kg/天(大鼠)和197mg/kg/天(小鼠)，采用较低的小鼠值计算人类可接受摄入量为197μg/天，呋喃妥因的日最大剂量为400mg，从而计算该杂质在呋喃妥因中控制限度应为0.05％，而各国药典中均未对糠醛进行控制。
[0006]对于呋喃妥因中可能存在其他有关物质，美国药典中未进行控制，中国药典、欧洲药典、英国药典中均仅采用薄层色谱法控制，方法灵敏度低，无法满足ICHQ3A控制要求。ICH Q3A要求对于每日最大剂量小于等于2g的原料药，规定杂质的鉴定限度为0.10％或每天摄入1.0mg(取限度低者)，呋喃妥因每日最大服用量小于2g，未知单杂控制限度应在0.10％以下。
[0007]现有技术中仅有对呋喃妥因中杂质呋喃西林和糠醛的检测，且需要在不同的色谱条件下分别检测，检测成本高、耗时长且灵敏度不高给制药企业带来成本上的问题，不利于推广和使用。

技术实现思路

[0008]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一，为此，本专利技术的一个方面的目的在于，提供一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法，所述多种杂质为呋喃西林、糠醛、5
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硝基糠醛二乙酯、杂质D、杂质J和杂质K；所述检测方法使用高效液相色谱仪进行，流动相由流动相A和流动相B组成，采用梯度洗脱。所述杂质化学结构式如下所示：
[0009][0010][0011]本专利技术发现，采用高效液相色谱法对呋喃妥因中呋喃西林、5
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硝基糠醛二乙酯、糠醛及其他有关物质进行检测时，流动相的选择对杂质分离有较大影响，当采用固定比例的流动相A和流动相B进行检测时，难以将杂质很好的分离；经过大量尝试发现，当采用上述洗脱方式，可将呋喃妥因与呋喃西林、5
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硝基糠醛二乙酯、糠醛及其他各杂质有效分离，同时缩短运行时间。
[0012]优选的，所述检测方法的具体操作步骤为：
[0013]S1.供试品溶液：取呋喃妥因，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成供试品溶液；
[0014]S2.对照溶液：精密量取供试品溶液，用溶剂定量稀释制成呋喃妥因对照溶液；
[0015]S3混合溶液：取呋喃妥因对照品，加溶剂溶解，精密加入呋喃西林对照品、糠醛对照品、5
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硝基糠醛二乙酯对照品、杂质D对照品、杂质J对照品、杂质K对照品，定量稀释制成混合溶液；
[0016]S4.各杂质定位溶液：取呋喃西林对照品，精密称定，加溶剂溶解制成呋喃西林定位溶液；取糠醛对照品，精密称定，加溶剂溶解制成糠醛定位溶液；取5
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硝基糠醛二乙酯对照品，精密称定，加溶剂溶解制成5
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硝基糠醛二乙酯定位溶液；取杂质D对照品，精密称定，加溶剂溶解制成杂质D定位溶液；取杂质J对照品，精密称定，加溶剂溶解制成杂质J定位溶液；取杂质K对照品，精密称定，加溶剂溶解制成杂质K定位溶液；
[0017]S5.调节仪器：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A，流动相B，调节柱温，调节流动相流速，调节检测波长，采用梯度洗脱；
[0018]S6.测定：精密量取S2～S4制成的各溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
[0019]优选的，所述S1中供试品溶液的浓度为0.8～1.2mg/ml。
[0020]优选的，所述S2中对照溶液的浓度为0.08～0.12μg/ml。
[0021]优选的，所述S3中混合溶液呋喃妥因对照品的浓度为0.8～1.2mg/ml，呋喃西林对照品的浓度为0.08～0.12μg/ml，糠醛对照品浓度为0.4～0.6μg/ml，5
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硝基糠醛二乙酯对照品、杂质D对照品、杂质J对照品和杂质K对照品的浓度均为0.8～1.2μg/ml。
[0022]优选的，所述S4中各杂质定位溶液呋喃西林定位溶液浓度为0.08～0.12μg/ml；糠醛定位溶液浓度为0.4～0.6μg/ml；5
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硝基糠醛二乙酯定位溶液浓度为0.8～1.2μg/ml；杂质D定位溶液浓度为0.8～1.2μg/ml；杂质J定位溶液浓度为0.8～1.2μg/ml；杂质K定位溶液浓度为0.8～1.2μg/ml。
[0023]优选的，所述溶剂为50％乙腈。
[0024]优选的，所述S5中色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，规格为Inertsil ODS
‑
3，250mm
×
4.6mm，5μm。
[0025]优选的，所述的流动相A为磷酸盐缓冲液，磷酸盐缓冲液浓度为0.05mol/L，用氢氧化钠溶液调节pH值至7.1
±
0.1，所述流动相B为100％乙腈；调节柱温为25～35℃，调节流动相流速为0.9～1.1ml/min，调节检测波长分别为375nm检测呋喃妥因、杂质呋喃西林、杂质D和杂质K，304nm检测5
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硝基糠醛二乙酯、糠醛和杂质J。磷酸盐缓冲液的pH值对呋喃妥因与呋喃西林的分离度有较大影响，当磷酸盐缓冲液的pH值为7.1
±
0.1时，分离效果更好；不仅能使呋喃妥因与呋喃西林的分离度达到4.0以上，还能使其他杂质均达到有效分离。因呋喃妥因中各杂质紫外吸收波长相差较大，难以在同一波长下对所有杂质同时进行检测，本专利技术用波长375nm和304nm可对6种杂质进行检测。
[0026]优选的，所述采用梯度洗脱，流动相的总体积为100％计，
[0027]在第0～4min，所述的流动相A本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法，其特征在于：所述多种杂质为呋喃西林、糠醛、5
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硝基糠醛二乙酯、杂质D、杂质J和杂质K；所述检测方法使用高效液相色谱仪进行，流动相由流动相A和流动相B组成，采用梯度洗脱。2.根据权利要求1所述的一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法，其特征在于：所述检测方法的具体操作步骤为：S1.供试品溶液：取呋喃妥因，精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成供试品溶液；S2.对照溶液：精密量取供试品溶液，用溶剂定量稀释制成呋喃妥因对照溶液；S3混合溶液：取呋喃妥因对照品，加溶剂溶解，精密加入呋喃西林对照品、糠醛对照品、5
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硝基糠醛二乙酯对照品、杂质D对照品、杂质J对照品、杂质K对照品，定量稀释制成混合溶液；S4.各杂质定位溶液：取呋喃西林对照品，精密称定，加溶剂溶解制成呋喃西林定位溶液；取糠醛对照品，精密称定，加溶剂溶解制成糠醛定位溶液；取5
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硝基糠醛二乙酯对照品，精密称定，加溶剂溶解制成5
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硝基糠醛二乙酯定位溶液；取杂质D对照品，精密称定，加溶剂溶解制成杂质D定位溶液；取杂质J对照品，精密称定，加溶剂溶解制成杂质J定位溶液；取杂质K对照品，精密称定，加溶剂溶解制成杂质K定位溶液；S5.调节仪器：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A，流动相B，调节柱温，调节流动相流速，调节检测波长，采用梯度洗脱；S6.测定：精密量取S2～S4制成的各溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。3.根据权利要求2所述的一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法，其特征在于：所述S1中供试品溶液的浓度为0.8～1.2mg/ml。4.根据权利要求2所述的一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法，其特征在于：所述S2中对照溶液的浓度为0.08～0.12μg/ml。5.根据权利要求2所述的一种同时测定呋喃妥因中多种杂质的检测方法，其特征在于：所述S3中混合溶液呋喃妥因对照品的浓度为0.8～1.2mg/ml，呋喃西林对照品的浓度为0.08～0.12μg/ml，糠醛对照品浓度为0.4～0.6μg/ml，5
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硝基糠醛二乙酯对照品、杂质D对照品、杂质J对照品和杂质K对照品的浓度均为0.8～1.2μg/ml。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：赵文普，梁通达，马宪真，王鑫，宿铭，陈梦雪，
申请(专利权)人：北京云鹏鹏程医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：