一种同时测定维生素制造技术

本发明专利技术涉及药品检测技术领域，更具体而言，涉及一种同时测定维生素

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定维生素B2中多种遗传毒杂质的检测方法


[0001]本专利技术涉及药品检测
，更具体而言，涉及一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法
。

技术介绍

[0002]维生素
B2
又名核黄素，是人体必需的
13
种维生素之一，参与细胞的生长代谢，对人体正常的生理功能有非常重要的调控作用，是机体组织代谢和修复必须要的营养素，可促进细胞再生，促使皮肤
、
指甲
、
毛发的正常生长，预防和消除炎症，增进视力
。
常用于口角炎
、
唇炎
、
舌炎
、
眼结膜炎和阴囊炎等疾病的防治
。
[0003]杂质
G、
杂质
I、
杂质
J
分别为维生素
B2的合成中间体和起始物料，其结构中含苯肼
、
苯胺类警示结构，按
ICHM7
指导原则要求，应按潜在致突变杂质进行研究和控制，基于
TTC
计算可接受摄入量，各杂质每日最大摄入量
1.5
μ
g
，按照维生素
B2的日最大服用剂量为
30mg
计算，上述杂质在维生素
B2中控制限度应为不得过
50ppm
，该限度远低于普通杂质的控制限度，对检测方法灵敏度有较高要求，而各国药典
、
及公开文献中均未对上述杂质进行控制，现有技术中常采用的高效液相色谱法对维生素
B2中杂质
G、
杂质
I
和杂质
J
进行检测时，维生素
B2
中的未知杂质可能对上述杂质的检测造成干扰，流动相组成
、
比例的选择对杂质的分离有较大影响
。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一，为此，本专利技术的一个方面的目的在于，提供一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法，所述多种遗传毒杂质为杂质
G、
杂质
I
和杂质
J
；所述检测方法使用高效液相色谱仪进行，流动相为磷酸盐缓冲液与乙腈的混合溶液，采用等度洗脱；
[0005]所述杂质化学结构式如下所示：
[0006] 。
[0007]优选的，所述检测方法具体操作步骤如下：
[0008]S1.
制备供试品溶液：取维生素
B2精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成供试品溶液；
[0009]S2.
制备对照品溶液：分别取杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品精密称定，用溶剂定量稀释制成各杂质对照品溶液；
[0010]S3.
制备混合溶液：取维生素
B2对照品加溶剂溶解，再精密加入杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品，定量稀释制成混合溶液；
[0011]S4.
制备杂质定位溶液：取杂质
G
对照品精密称定，加溶剂溶解制成杂质
G
定位溶液；取杂质
I
对照品精密称定，加溶剂溶解制成杂质
I
定位溶液；取杂质
J
对照品精密称定，加溶剂溶解制成杂质
J
定位溶液；
[0012]S5.
调节仪器：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相，调节柱温，调节流动相流速，调节检测波长，采用等度洗脱；
[0013]S6.
测定：精密量取
S2
～
S4
制成的各溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图
。
[0014]优选的，所述溶剂为
0.1mol/L
氢氧化钠溶液
‑
水，氢氧化钠
‑
水质量比为
10
：
90。
[0015]优选的，所述
S1
供试品溶液中维生素
B2的浓度为
1.8
～
2.2mg/ml。
[0016]优选的，所述
S2
对照品溶液中杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品的浓度均为
0.08
～
0.12
μ
g/ml。
[0017]优选的，所述
S3
中混合溶液维生素
B2对照品的浓度为
1.8
～
2.2mg/ml
，杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品浓度均为
0.08
～
0.12
μ
g/ml。
[0018]优选的，所述
S4
中杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品定位溶液浓度均为
0.1
μ
g/ml。
[0019]优选的，所述
S5
中色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，规格为
Shim
‑
packGIST C18 4.6mm
×
250mm
，5μ
m。
[0020]优选的，所述流动相为
10mmol/L
磷酸二氢钾溶液
‑
乙腈，磷酸二氢钾溶液
‑
乙腈质量比为
65
～
61
：
35
～
39
，调节柱温为
25
～
35℃
，调节流动相流速为
0.9
～
1.1ml/min
，调节检测波长
225
～
235nm
进行检测
。
[0021]优选的，所述磷酸二氢钾溶液用三乙胺调节
pH
至
6.8。
[0022]本专利技术所具有的有益效果如下：
[0023]本专利技术根据产品结构特点及化合物性质，提供了一种采用高效液相色谱仪即可同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法
。
采用等度色谱条件，进一步能同时测定上述3种遗传毒杂质并分离，各杂质之间及各杂质与维生素
B2均可有效分离，选择各杂质均适合的检测波长，使各杂质的响应值符合要求，确保准确定量，通过对条件的优化，使得对各组分检测的灵敏度和准确度进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法，其特征在于：所述多种遗传毒杂质为杂质
G、
杂质
I
和杂质
J
；所述检测方法使用高效液相色谱仪进行，流动相为磷酸盐缓冲液与乙腈的混合溶液，采用等度洗脱；所述杂质化学结构式如下所示：
。2.
根据权利要求1所述的一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法，其特征在于：所述检测方法具体操作步骤如下：
S1.
制备供试品溶液：取维生素
B2精密称定，加溶剂溶解并定量稀释制成供试品溶液；
S2.
制备对照品溶液：分别取杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品精密称定，用溶剂定量稀释制成各杂质对照品溶液；
S3.
制备混合溶液：取维生素
B2对照品加溶剂溶解，再精密加入杂质
G
对照品
、
杂质
I
对照品和杂质
J
对照品，定量稀释制成混合溶液；
S4.
制备杂质定位溶液：取杂质
G
对照品精密称定，加溶剂溶解制成杂质
G
定位溶液；取杂质
I
对照品精密称定，加溶剂溶解制成杂质
I
定位溶液；取杂质
J
对照品精密称定，加溶剂溶解制成杂质
J
定位溶液；
S5.
调节仪器：色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相，调节柱温，调节流动相流速，调节检测波长，采用等度洗脱；
S6.
测定：精密量取
S2
～
S4
制成的各溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图
。3.
根据权利要求2所述的一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法，其特征在于：所述溶剂为
0.1mol/L
氢氧化钠溶液
‑
水，氢氧化钠
‑
水质量比为
10
：
90。4.
根据权利要求2所述的一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法，其特征在于：所述
S1
供试品溶液中维生素
B2的浓度为
1.8
～
2.2mg/ml。5.
根据权利要求2所述的一种同时测定维生素
B2中多种遗传毒杂质的检测方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁通达，宿铭，范晶，李仁钊，
申请(专利权)人：北京云鹏鹏程医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：