一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺制造技术

本发明专利技术涉及DNA质粒磁珠纯化提取技术领域，具体为一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺，包括以下步骤：加液稀释、过滤、摇匀、纯化、多次漂洗、脱离，其中摇匀步骤中，通过摇晃所述摇匀试管配合上方插入的磁棒模块进行摇晃摇匀处理，并通过该磁棒模块吸附磁珠置入到所述摇匀试管内，利用磁珠吸附DNA质粒，摇匀出DNA质粒，并且，通过将磁棒进行改进，在磁棒外部套设一组棒套，在利用磁棒提纯DNA质粒时，磁珠吸附的DNA质粒受到磁棒磁力吸附，附着于棒套上，在磁棒脱离棒套后，磁珠失去吸附力，直接脱离棒套掉落，无需利用药剂冲刷，反应快速，并且简便。并且简便。并且简便。

【技术实现步骤摘要】
一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺


[0001]本专利技术涉及DNA质粒磁珠纯化提取
，具体为一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺。

技术介绍

[0002]磁珠纯化法通常使用纯化系统通过磁场摇匀磁珠而达到摇匀和纯化细胞、蛋白或核酸等物质的目的。与常用的沉淀法、摇匀法、柱膜法相比，磁珠纯化法具有提取效率高、摇匀速度快、所需设备简单等特点。
[0003]与树脂纯化(Resin)相比，基于磁力吸附的磁珠纯化法依靠磁力原理和孵育的结合方式可以快速有效的富集样品中的目标蛋白，有效避免了树脂对样品预处理和对上样方式的限制等弊端，摆脱了装柱和流速等的限制。采用磁摇匀的纯化方法较易实现自动化，可满足快速、自动化、多通道同时处理的高通量纯化需求。
[0004]目前市面上仅有的磁珠纯化设备是Thermo Scientific公司推出的Kingfisher磁珠蛋白自动纯化仪，其利用的磁珠法采用磁棒插入到容器内部进行蛋白质的纯化。但其能纯化的最大样品体积只有5ml，液体转移处理需人工参与，并且采用敞口式的工作工位，不能控制污染，不能满足客户对自动化实现几十毫升和一两百毫升样本处理的需求。
[0005]在专利申请号为201820632856.4的中国专利中公开了一种磁珠纯化系统，其特征在于包括：外壳；设置在外壳中的液路处理系统，所述液路处理系统能够与试剂桶和废液桶连接；与所述液路处理系统连接的加样针组，所述加样针组能够在外壳内移动并且连接到所述液路处理系统，以从所述液路处理系统接收试剂或者向所述液路处理系统排出废液；纯化磁摇匀系统，包括磁元件，所述纯化磁摇匀系统能够被控制以通过所述磁元件向外壳中的纯化处理位置处施加侧向的磁力或者停止施加磁力；和纯化工位系统，能够在外壳中的纯化处理位置与外壳外的装载位置之间移动，所述纯化工位系统适于装载容器。
[0006]但是，上述的专利文献记载的技术方案存在以下的技术问题：1、在纯化磁摇匀过程中，磁元件上吸附的磁珠需要通过反复被药剂进行冲刷才会掉落，十分的繁琐；2、在DNA质粒纯化过程中，通过磁珠吸附DNA质粒过程用时长，磁珠吸附不充分；3、在DNA质粒提纯过程中，自动化程度仍较低，无法有效的衔接DNA质粒提纯的前后步骤。

技术实现思路

[0007]针对以上问题，本专利技术提供了一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺，通过在摇匀步骤中对摇匀试管进行水平摇匀震荡，使得摇匀试管内的溶液形成旋涡，配合往复偏心插入的试管套对旋涡的破坏，使得DNA质粒与磁珠充分混合摇匀，达到磁珠充分吸附DNA质粒的目的。
[0008]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺，包括以下步骤：步骤一、加液稀释，将含有DNA质粒的上清液加入到过滤容器内后，通过自动加液模块依次向该过滤容器内加入至少一种试剂；步骤二、过滤，通过过滤泵模块将过滤容器内含有DNA质粒溶液过滤后通过泵送到下方的摇匀试管内；步骤三、摇匀，通过水平摇晃所述摇匀试管，且配合上方偏心插入的磁棒模块中的磁棒套进行搅拌处理，使得试管内溶液中的DNA质粒与磁珠摇晃均匀，磁珠吸附DAN质粒；步骤四、纯化，将所述磁棒模块中的磁棒再次插入到所述棒套内，所述磁棒模块置入到所述摇匀试管内，将所述摇匀试管内吸附了DNA质粒的磁珠再次吸附集中，磁珠通过所述磁棒模块转移到纯化试管内进行漂洗提纯；步骤五、多次漂洗，将所述纯化试管内的磁珠再次通过所述磁棒模块吸附转移到一组新的所述纯化试管内再次进行漂洗提纯，重复该步骤2
‑
3次；步骤六、脱离，完成多次漂洗后的磁珠通过所述磁棒模块吸附转移到一组空白的试管内，利用试管内液体将磁珠上吸附的DNA质粒冲洗脱离。
[0009]作为改进，所述步骤一中，所述自动加液模块包括试剂容器及加液头；所述试剂容器设置有四组，分别容纳有试剂A、试剂B、试剂C及试剂D；所述加液头设置有四组，分别用于加注试剂A、试剂B、试剂C及试剂D；所述加液头通过管道与所述试剂容器连通。
[0010]作为改进，所述加液头移动设置，在若干的所述过滤容器之间进行切换。
[0011]作为改进所述管道插入所述试剂容器内的端部升降设置。
[0012]作为改进，所述步骤二中，所述过滤泵模块包括注液头及蠕动泵；所述注液头通过管道与所述过滤容器连通，且管道经过所述蠕动泵，由所述蠕动泵将DNA质粒溶液泵送至所述注液头。
[0013]作为改进，初始时，所述注液头的下方设置有废液槽，所述注液头自所述废液槽移动切换至所述摇匀试管上方加液。
[0014]作为改进，所述步骤三中，所述摇匀试管通过下方设置的摇晃模块，相对于所述磁棒套进行水平面与竖直平面上的运动。
[0015]作为改进，所述步骤三至步骤六中，所述磁棒及所述棒套均通过一侧的升降模组带动进行升降设置，且所述磁棒及所述棒套分别单独进行升降移动。
[0016]作为改仅，所述步骤三中，所述摇匀试管通过下方设置的摇晃模块在水平面上进行摇晃动作，所述磁棒套通过所述升降模组带动在竖直平面上进行移动。
[0017]作为改进，所述步骤三至步骤七中，所述磁棒及所述棒套均通过移动模组沿所述摇匀试管、纯化试管及试管的排列方向往复移动设置。
[0018]本专利技术的有益效果在于：（1）本专利技术在摇匀步骤中，为了使得DNA质粒快速的被摇匀出，通过摇晃模块带动摇匀试管在水平面上进行摇晃，使得摇匀试管内的溶液形成旋涡的同时，配合设置磁棒模块的棒套的偏心插入，破坏摇匀试管内形成的旋涡，加快DNA质粒的摇匀，提高DNA质粒摇匀的速度；（2）本专利技术通过设置自动加液模块，利用自动加液模块对过滤容器进行自动的试
剂加注，使得试剂A、试剂B、试剂C及试剂D逐一的加入到过滤容器内，自动化程度高，使得试剂的加注精度得到保证，更加有效的对DNA质粒的上清液进行稀释；（3）本专利技术通过将连通加液头与试剂容器的管道进行升降设置，使得管道全部同步抬升，使得试剂容器可以轻松、快速的抽出，更换新的试剂容器，且更换了新的试剂容器后，管道仍能自动插入到试剂容器内，整个过程，操作人员无需接触管道，能很好的保证管道的洁净程度；（4）本专利技术通过在注液头的下方设置废液槽，使得注液头在不进行DNA质粒溶液加注时，使得注液头滴落的DNA质量溶液不会污染设备内部，保证提纯的DNA质粒的纯净度，同时在每次加液时，可以将注液头内的废液排出，保证每次加液的精度；（5）本专利技术通过将线性排列设置的棒套安装到条形板上，之后再将条形板穿插卡合到安装板上，再将安装板安装到升降模组上，使得棒套在拆卸安装时，能更加的准确，使得棒套与磁棒的配合精度更准。
[0019]综上所述，本专利技术具有自动化程度高、摇匀纯化过程简洁、污染低、配合精度高等优点，尤其适用于DNA质粒磁珠纯化提取

附图说明
[0020]图1为本专利技术工艺流程示意图；图2为本专利技术DNA质粒磁珠纯化提取系统立体结构示意图；图3为本专利技术DNA质粒磁珠纯化提取系统正视结构示意图；图4为本专利技术立体过滤泵模块立体结构示意本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺，包括以下步骤：步骤一、加液稀释，将含有DNA质粒的上清液加入到过滤容器内后，通过自动加液模块依次向该过滤容器内加入至少一种试剂；步骤二、过滤，通过过滤泵模块将过滤容器内含有DNA质粒溶液过滤后通过泵送到下方的摇匀试管内；步骤三、摇匀，通过水平摇晃所述摇匀试管，且配合上方偏心插入的磁棒模块中的磁棒套进行搅拌处理，使得试管内溶液中的DNA质粒与磁珠摇晃均匀，磁珠吸附DNA质粒；步骤四、纯化，将所述磁棒模块中的磁棒再次插入到所述棒套内，所述磁棒模块置入到所述摇匀试管内，将所述摇匀试管内吸附了DNA质粒的磁珠再次吸附集中，磁珠通过所述磁棒模块转移到纯化试管内进行漂洗提纯；步骤五、多次漂洗，将所述纯化试管内的磁珠再次通过所述磁棒模块吸附转移到一组新的所述纯化试管内再次进行漂洗提纯，重复该步骤2
‑
3次；步骤六、脱离，完成多次漂洗后的磁珠通过所述磁棒模块吸附转移到一组空白的试管内，利用试管内液体将磁珠上吸附的DNA质粒冲洗脱离。2.根据权利要求1所述的一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺，其特征在于：所述步骤一中，所述自动加液模块包括试剂容器及加液头；所述试剂容器设置有四组，分别容纳有试剂A、试剂B、试剂C及试剂D；所述加液头设置有四组，分别用于加注试剂A、试剂B、试剂C及试剂D；所述加液头通过管道与所述试剂容器连通。3.根据权利要求2所述的一种磁珠纯化法提取DNA质粒的工艺，其特征在于：所述加液头移动设置，在若干的所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁新辉，胡正义，陈勇龙，丁尉原，
申请(专利权)人：杭州倍沃医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：