N-(3-甲基-5-异噻唑基)-2-氧代-3-(2H)-苯并噁唑乙酰胺的药物应用制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，公开了N

【技术实现步骤摘要】
N
‑
(3
‑
甲基
‑5‑
异噻唑基)
‑2‑
氧代
‑3‑
(2H)
‑
苯并噁唑乙酰胺的药物应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉N
‑
(3
‑
甲基
‑5‑
异噻唑基)
‑2‑
氧代
‑3‑
(2H)
‑
苯并噁唑乙酰胺在制备阿尔茨海默病防治药物中的应用。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默症(Alzheimer
’
s disease，AD)又名老年痴呆，是一种进行性、破坏认知与记忆功能的持续性神经退行性疾病。它的主要病理特征是以β淀粉样蛋白(β
‑
amyloid protein,Aβ)沉积和Tau蛋白过度磷酸化形成的神经原纤维缠结(neurofibrillary tangle,NFT)为主。AD患者的表现为自主行为能力下降，认知能力丧失，如记忆和语言障碍、行为紊乱和情绪障碍。据世界卫生组织报告，每年约有990万新的痴呆症病例被诊断出来。据预测，到2032年，痴呆症患者的总数将接近7500万。在过去的20年里，AD的治疗一直是药物发现和临床研究领域的热门话题。
[0003]目前，治疗AD的药物是胆碱酯酶抑制剂5和(N
‑
甲基
‑
D
‑
天门冬氨酸)NMDA受体拮抗剂。不幸的是，这些药物只能缓解AD的症状，但不能逆转AD的病理过程。AD患者脑组织出现明显的萎缩，在这些部位可见明显的由β淀粉样蛋白(Aβ)沉积形成的老年斑，是AD发展的关键因素。近年来，许多研究表明AD的神经化学和神经病理学改变均与Aβ有着密切联系，当Aβ产生过多或者清除减少时，Aβ蛋白聚集成为具有高度神经毒性的多聚体并引起机体产生氧化应激、炎症及Tau蛋白高度磷酸化等诱导神经元死亡的因素。因此，Aβ是AD发病中最重要的病理因素，基于淀粉样蛋白级联假说的药物治疗策略可以降低Aβ的水平，这可能与AD的治疗有关。因此，寻找新药的工作正在兴起。
[0004]FoxO1是FoxO家族中最重要的转录因子，在调节细胞增殖、氧化应激、脑缺血、自噬、神经退行性疾病等方面起着重要作用。FoxO1可能是一个潜在的治疗AD的目标。但到目前为止，还没有用于治疗AD的FoxO1激动剂。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供N
‑
(3
‑
甲基
‑5‑
异噻唑基)
‑2‑
氧代
‑3‑
(2H)
‑
苯并噁唑乙酰胺在制备阿尔茨海默病防治药物中的应用。将该化合物简称化合物D，其结构式如下所示：
[0006]通过一系列的下游生物学实验验证了该化合物对于FoxO1的调节能力。发现该化合物D是一个FoxO1激动剂，可以上调FoxO1下游基因转录活性。同时发现在体外的细胞实验
体系中，化合物D可以抑制BACE1的活性，并且可以减少SH
‑
SY5Y细胞中Aβ的生成。因此，化合物D可用于制备阿尔茨海默病防治药物。本专利技术优点：通过计算机辅助药物设计技术发现了FoxO1的天然化合物D，通过体外生物学实验，证明了该分子是FoxO1的天然激动剂；在人源细胞系中，证明了化合物D可以作为FoxO1激动剂，抑制BACE1活性并且减少Aβ的生成。具有开发防治阿尔茨海默病药物价值。
附图说明
[0007]图1为本专利技术化合物D与FoxO1的分子对接结果。
[0008]图2为本专利技术化合物D与FoxO1复合物的分子动力学模拟结果。
[0009]图3为本专利技术不同剂量的化合物D对SH
‑
SY5Y细胞活力影响结果。
[0010]图4为本专利技术化合物D能提高FoxO1下游相关基因的转录活性。
[0011]图5为本专利技术化合物D降低SH
‑
SY5Y细胞中Aβ的产生结果。
[0012]图6为本专利技术化合物D通过抑制BACE1的活性减少Aβ的产生。
具体实施方式
[0013]在既往的研究中，专利技术人发现了转录因子FoxO1可能在AD的发病过程中起到了调控作用。相对于目前正在开发的药物来说，FoxO1作为药物靶点的优势在于其是FoxO家族中最重要的转录因子，在调节细胞增殖、氧化应激、脑缺血、自噬、神经退行性疾病等方面起着重要作用。FoxO1在不同的脑区都有表达，尤其是在海马和皮层区。专利技术人发现FoxO1在6月龄APP/PS1转基因小鼠的皮层组织的表达量明显低于野生小鼠。在AD细胞模型中过表达FoxO1可以有效地降低Aβ和Tau蛋白过度磷酸化水平。这些结果表明，FoxO1可能是一个潜在的治疗AD的药物靶标。
[0014]本专利技术化合物D对于AD治疗的药理作用属于“first in class”范畴，而不属于“me too”或者“me better”范畴。
[0015]以下实施例进一步说明本专利技术的内容，但不应理解为对本专利技术的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改和替换，均属于本专利技术的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。实施例1
[0016]1、使用AutoDock Vina软件进行FoxO1蛋白准备。从附图1的分子对接结果显示，化合物D能够与FoxO1具有较好的结合，主要结合力为氢键，对接的能量为：
‑
7.9Kcal/mol，提示该小分子具有较好的结合。
[0017]2、使用GROMACS进行分子动力学模拟试验。从附图2的RMSD、RMSF和Rg图结果可以看出化合物D和FoxO1复合物在50ns模拟过程保持稳定，说明化合物D稳定可靠，可以有效靶向FoxO1，整个复合物系统结构稳定。
[0018]3、将SH
‑
SY5Y细胞以每孔1.5
×
104的数目种在96孔板里，培养24h后换上含有不同浓度化合物D的培养液，继续培养细胞。24h后进行CCK
‑
8细胞毒性试验。
[0019]如图3的结果可知，在显微镜下观察经化合物D处理后的细胞密度，结果与CCK
‑
8检测结果一致。80μΜ、100μM药物作用24小时后，SH
‑
SY5Y细胞出现明显的核聚集、碎裂等明显
的细胞凋亡症状，20、40、60、80、100μM药物作用24小时后SH
‑
SY5Y细胞数依次减少，表明在化合物D作用24小时后，SH
‑
SY5Y细胞活性降低具有浓度依赖性。用CCK
‑
8检测不同浓度的化合物D对SH
‑
SY5Y细胞活力的影响。与对照组相比，化合物D处理的SH
‑
SY5Y细胞的细胞活力随着浓度的增加而逐渐降低。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.N
‑
(3
‑
甲基
‑5‑
异噻唑基)
‑2‑
氧代
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟，吕明媞，张毅敏，单琳琳，张一帆，王明永，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：