本发明专利技术公开了一种同时检测黄酒中多种甜味剂(甜蜜素、安赛蜜、糖精钠、三氯蔗糖、阿力甜、纽甜、阿斯巴甜、甜菊糖苷、爱德万甜)的检测方法，包括以下步骤：(1)配制标准工作液；(2)样品制备；(3)检测；(4)确证。本发明专利技术前处理简单快捷，基质配标定性准确，灵敏度高，定量结果稳定可靠，且具有良好的准确度和精密度，可用于黄酒中多种甜味剂的检测。对黄酒中甜味剂的风险监测对促进地方产业发展、预防和控制食品安全危害、保障人民群众的身体健康均有重要意义。保障人民群众的身体健康均有重要意义。保障人民群众的身体健康均有重要意义。
【技术实现步骤摘要】
一种同时检测黄酒中多种甜味剂的检测方法
[0001]本专利技术涉及成分检测
，特别是涉及一种同时检测黄酒中多种甜味剂的检测方法。
技术介绍
[0002]高甜味、低热量的甜味剂被广泛用于食品中，且大部分甜味剂通过人工合成获取，如安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、阿力甜、三氯蔗糖、纽甜等。近年来发现人造甜味剂长期摄入可能导致高血糖、葡萄糖耐受不良、肥胖等代谢系统性疾病，易怒、抑郁、记忆衰退、阿尔兹海默症等神经系统异常，甚至具有遗传毒性和致癌性。近年来黄酒造假案屡禁不止，假冒黄酒以原酒为主，添加香精和甜味剂勾兑而成，严重影响了黄酒的品牌形象。因此，对黄酒中甜味剂的风险监测对促进地方产业发展、预防和控制食品安全危害、保障人民群众的身体健康均具有重要意义。
[0003]目前，黄酒检测共涉及2个产品标准和8个相关甜味剂检测方法标准，产品标准分别为GB/T 13662
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2018《黄酒》、GB/T 17946
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2008《地理标志产品黄酒(绍兴黄酒)》，检测方法标准分别为SN/T 3538
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2013《出口食品中六种合成甜味剂的检测方法液相色谱
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质谱/质谱法》、GB/T 5009.140
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2003《饮料中乙酰磺胺酸钾的测定》、GB 5009.28
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2016《食品安全国家标准食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》、GB 5009.97
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2016《食品安全国家标准食品中环己基氨基磺酸钠的测定》、GB 5009.263
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2016《食品安全国家标准食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》、GB 22255
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2014《食品安全国家标准食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》、SN/T 3854
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2014《出口食品中天然甜味剂甜菊糖苷、甜菊双糖苷、甘草酸、甘草次酸的测定高效液相色谱法》、GB 5009.247
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2016《食品安全国家标准食品中纽甜的测定》。
[0004]用上述标准测定黄酒中的甜味剂存在两方面的缺陷：第一，标准太多(即需要结合多种检测方法才能完成多种甜味剂的检测)，前处理方法不尽相同，涉及仪器有气相色谱仪、液相色谱仪、液相色谱
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三重四级杆串联质谱仪，浪费大量人力、物力、财力；第二：上述方法中黄酒中三氯蔗糖采用蒸发光散射测定，由于黄酒基质复杂，容易出现假阳性，同时黄酒中甜蜜素用液相色谱串联质谱法测定过程中，低浓度的甜蜜素检出存在定性困难的问题。因此，开发一种快速、灵敏的多种甜味剂分析方法，对保障黄酒的食用安全尤为重要。
技术实现思路
[0005]本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种同时检测黄酒中多种甜味剂的检测方法，前处理简单快捷，基质配标定性准确，灵敏度高，定量结果稳定可靠，且具有良好的准确度和精密度，可用于黄酒中多种甜味剂的检测。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]一种同时检测黄酒中多种甜味剂的检测方法，包括以下步骤：
[0008](1)配制标准工作液：
[0009]a、配制标准储备液：分别配制浓度均为500mg/L的甜蜜素、安赛蜜、糖精钠、三氯蔗
糖、阿力甜、纽甜、阿斯巴甜、甜菊糖苷、爱德万甜标准储备液，冷藏保存；
[0010]b、配制第一标准中间工作液：移取上述9种标准储备液各0.20mL，配制成含9种甜味剂的浓度为10mg/L的第一标准中间工作液；
[0011]c、配制第二标准中间工作液：取1.0mL第一标准中间工作液，配制成浓度为1mg/L第二标准中间工作液；
[0012]d、分别取0.10mL、0.25mL、0.50mL的第二标准中间工作液，各加入1.0mL的黄酒空白基质，配制成浓度分别为10、25、50μg/L的标准工作溶液；再分别取0.10mL、0.25mL、0.50mL的第一标准中间工作液，各加入1.0mL的黄酒空白基质，配制成浓度分别为100、250、500μg/L的标准工作溶液；
[0013](2)样品制备：
[0014]称取黄酒样品1.0g于10.0mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，过滤膜，得到待测样品；
[0015](3)检测：
[0016]采用液相色谱
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串联四极杆复合线性离子阱质谱仪对步骤(1)制备的6种不同浓度的标准工作溶液进行测试，拟合标准曲线，以性噪比S/N≥3和S/N≥10计算出9种甜味剂的方法检出限和定量限；
[0017]在相同条件下采用液相色谱
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串联四极杆复合线性离子阱质谱仪对步骤(2)制备的待测样品进行测试，根据不同甜味剂的标准曲线，计算样品中9种甜味剂的含量；
[0018](4)确证：
[0019]各取步骤(a)中的9种标准储备液分别配制成浓度为250μg/L的基质标准品溶液，采用液相色谱
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串联四极杆复合线性离子阱质谱仪进行检测，得到标准品溶液二级质谱图，以此建立标准品二级质谱库；
[0020]搭配SCIEX OS软件系统，将样品实测二级质谱图与标准品二级质谱图进行对比；当样品中检测出甜味剂时，其保留时间和二级碎片比率满足要求，且实测二级质谱图与标准品二级质谱库匹配Purity得分为90分以上，则可确证有甜味剂检出。
[0021]步骤(1)中，标准储备液的具体配制方法为：分别称取甜蜜素、安赛蜜、糖精钠、三氯蔗糖、阿力甜、纽甜、阿斯巴甜、甜菊糖苷、爱德万甜标准品于10mL容量瓶中，分别用超纯水溶解定容至刻度，得500mg/L标准储备液，于4℃冷藏保存。
[0022]步骤(1)中，第一标准中间工作液的具体配制方法为：分别移取9种标准储备液0.20mL于10.0mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，得浓度为10mg/L标准中间工作液。
[0023]步骤(1)中，第二标准中间工作液的具体配制方法为：取1.0mL第一标准中间工作液于10.0mL容量瓶中,用超纯水定容至刻度,得浓度为1mg/L标准中间工作液。
[0024]不同浓度标准工作溶液的具体配制方法为：分别取0.10mL、0.25mL、0.50mL的第二标准中间工作液于10.0mL容量瓶中，各加入1.0mL的黄酒空白基质，用超纯水定容至刻度，得到浓度分别为10、25、50μg/L的标准工作溶液；再分别取0.10mL、0.25mL、0.50mL的第一标准中间工作液于10.0mL容量瓶中，各加入1.0mL的黄酒空白基质，用超纯水定容至刻度，得到浓度分别为100、250、500μg/L的标准工作溶液。
[0025]色谱条件为：Kinetex 2.6μm F5 100A色谱柱，规格为100
×
2.1mm，1.8μm；流动相A：5mmol/L乙酸铵水溶液，流动相B：甲醇；流速：0.30mL/min；进样量：5μL；柱温：40℃；梯度
洗脱。
...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种同时检测黄酒中多种甜味剂的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)配制标准工作液：a、配制标准储备液：分别配制浓度均为500mg/L的甜蜜素、安赛蜜、糖精钠、三氯蔗糖、阿力甜、纽甜、阿斯巴甜、甜菊糖苷、爱德万甜标准储备液，冷藏保存；b、配制第一标准中间工作液：移取上述9种标准储备液各0.20mL，配制成含9种甜味剂的浓度为10mg/L的第一标准中间工作液；c、配制第二标准中间工作液：取1.0mL第一标准中间工作液，配制成浓度为1mg/L第二标准中间工作液；d、分别取0.10mL、0.25mL、0.50mL的第二标准中间工作液，各加入1.0mL的黄酒空白基质，配制成浓度分别为10、25、50μg/L的标准工作溶液；再分别取0.10mL、0.25mL、0.50mL的第一标准中间工作液，各加入1.0mL的黄酒空白基质，配制成浓度分别为100、250、500μg/L的标准工作溶液；(2)样品制备：称取黄酒样品1.0g于10.0mL容量瓶中，用超纯水定容至刻度，过滤膜，得到待测样品；(3)检测：采用液相色谱
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串联四极杆复合线性离子阱质谱仪对步骤(1)制备的6种不同浓度的标准工作溶液进行测试，拟合标准曲线，以性噪比S/N≥3和S/N≥10计算出9种甜味剂的方法检出限和定量限；在相同条件下采用液相色谱
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串联四极杆复合线性离子阱质谱仪对步骤(2)制备的待测样品进行测试，根据不同甜味剂的标准曲线，计算样品中9种甜味剂的含量；(4)确证：各取步骤(a)中的9种标准储备液分别配制成浓度为250μg/L的基质标准品溶液，采用液相色谱
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串联四极杆复合线性离子阱质谱仪进行检测，得到标准品溶液二级质谱图，以此建立标准品二级质谱库；搭配SCIEX OS软件系统，将样品实测二级质谱图与标准品二级质谱图进行对比；当样品中检测出甜味剂时，其保留时间和二级碎片比率满足要求，且实测二级质谱图与标准品二级质谱库匹配Purity得分为90分以上，则可确证有甜味剂检出。2.如权利要求1所述一种同时检测黄酒中多种甜味剂的检测方法，其特征在于：步骤(1)中，标准储备液的具体配制方法为：分别称取甜蜜素、安赛蜜、糖精钠、三氯蔗糖、阿力甜、纽甜、阿斯巴甜、甜菊糖苷、爱德万甜标准品于10mL容量瓶中，分别用超纯水溶解定容至刻度，得500mg/L标准储备液，于4℃冷藏保存。3.如权利要求1所述一种同时检测黄...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡建刚，吴坚，魏晓蕾，毛威，何雨欣，平恬敏，王彩霞，杨瑞，陶永超，李丹，竹惠燕，俞雅各，屠生辉，王佳丽，
申请(专利权)人：绍兴市食品药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：
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