一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法及其用途技术

本发明专利技术属于生物饲料领域，具体涉及一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法及其用途；步骤为：活化菌株、培养得到芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌发酵种子液；将研磨成粉的复方中药材与豆粕、次粉混合后，添加复合酶得到发酵培养基，接种芽孢杆菌发酵种子液、酵母菌发酵种子液以及乳酸菌发酵种子液，在密闭条件下进行厌氧发酵后得到成品；本发明专利技术采用复方中药材进行菌酶协同发酵，发酵彻底，富含益生菌、有机酸等益生物质，可有效提养殖动物的肠道消化水平和免疫力等方面；针对对肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、福氏志贺菌造成的细菌感染有显著的防治效果，且使用方便，利于工业生产、经济效益高。经济效益高。经济效益高。

【技术实现步骤摘要】
一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法及其用途


[0001]本专利技术属于生物饲料领域，具体涉及一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法及其用途。

技术介绍

[0002]肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、福氏志贺菌(Shigella flexneri)是三种较为常见的肠道条件致病菌。如肠炎沙门氏菌是人畜共患病，具有极其广泛的动物宿主如哺乳类、鱼类、两栖类、鸟类、爬行类等等，感染动物后常导致严重疾病，它还是第二大食源致病菌人食用带菌的食物，会引起食物中毒，引发肠胃炎症、败血症等疾病。大肠杆菌，在自然界中广泛存在。大肠杆菌O157：H7是其的一个分型，其会导致动物源性传染病，会感染鸡、鸭、猪、牛、鱼类等养殖动物，且还会感染人类，引发出血性肠炎和溶血性尿毒症，危害人的生命。福氏志贺氏菌是一种革兰氏阴性致病菌，可引起细菌性痢疾，导致肠道的炎症反应。除感染人之外，还有研究表明鸡、鸭、兔、牛、鼠、犬、猕猴等动物幼崽也易感染此菌，对幼龄动物危害较为严重，导致动物腹泻、肠出血等情况。研究证实，这三种肠道致病菌虽然是条件致病菌，若其菌量爆发会在养殖业中会造成巨大的影响，为防治疾病养殖户往往盲目添加抗生素产品，随着抗生素的禁用，亟需寻找新的抗生素替代品。
[0003]目前已经有部分研究将发酵中药用于动物养殖和疾病的防治，但其均未针对特定的病原菌进行发酵中药饲料添加剂的配方中药进行筛选设计，如专利CN113648393A和CN113521212A，其用于禽类养殖，以抵御养殖过程中的肠道疾病及其他器官炎症的产生，但其选择的中药未经过筛选，只是根据中药自身的特性进行简单叠加，针对病原菌不具有特异性。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种防治常见的肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法及在养殖业中应用；本专利技术针对三种主要的肠道条件致病菌(肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、福氏志贺菌)的抑菌中药进行了筛选，得到了一组对常见肠道致病菌具有较强抑制能力的复方中药材并将其进行发酵；通过改变不同中药与辅料的添加比例，来探究该复方中药材与发酵菌种之间的关系，以得到最适的中药添加比例。得到的饲料添加剂中富含益生菌，可有效提升养殖动物的免疫力，具还有酸香味和一定抑菌作用，便于贮藏。
[0005]最后将制备的复方中药饲料添加剂用于动物养殖(中华鳖)；实验结果表明其在长期饲喂是能有效提升中华鳖的免疫功能，肠道消化水平等，在短期致病菌攻毒实验中，可有效提升中华鳖稚鳖的存活率。本专利技术所述的发酵中药可作为一个优质的饲料添加剂用于养殖业，且其针对常见的肠道致病菌如肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、福氏志贺菌均有意想不到的
防治效果。
[0006]为实现上述专利技术目的，本专利技术采取的技术方案具体如下：
[0007](1)配制中药发酵培养基：将复方中药材研磨成细粉，和豆粕、次粉、复合酶充分混合，得到固态发酵培养基；
[0008]发酵培养基的各组分重量百分含量分别为：复方中药材30～70％；豆粕18～46％；次粉12～24％；复合酶添加量0.1～10％；
[0009]所述复方中药材由黄连、五味子、知母、五倍子、大黄、黄芩、甘草、诃子、儿茶按照等质量比例混合而成；
[0010]所述复合酶由纤维素酶、半纤维素酶和单宁酶组成；
[0011](2)将芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌分别接种到相应的液体培养基进行活化培养，分别得到芽孢杆菌发酵种子液、酵母菌发酵种子液和乳酸菌发酵种子液；
[0012](3)接种步骤(2)得到的芽孢杆菌种子液、酵母菌种子液、乳酸菌种子液于步骤(1)得到的发酵培养基中，调整发酵温度以及培养基的含水量，混合均匀，得到发酵混合物，在密闭条件下进行厌氧发酵后得到防治肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂。
[0013]优选的，步骤(1)中所述豆粕在使用时需要烘干、研磨成粉末状使用；所述粉末是过50目筛得到；所述复方中药材研磨成粉末状使用，所述粉末是过50目筛得到。
[0014]所述纤维素酶、半纤维素酶、单宁酶的质量比为2:2:3；所述，复合酶中，半纤维素酶酶活力为5万u/g，纤维素酶和单宁酶的酶活均为1万u/g。
[0015]优选的，所述发酵培养基的各组分重量百分含量分别为：复方中药材50％；豆粕30％；次粉20％；复合酶添加量1％。
[0016]优选的，步骤(2)中所述的芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌；所述酵母菌为热带假丝酵母；所述乳酸菌为植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌。
[0017]优选的，步骤(3)中所述芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液的接种量均为发酵培养基重量的0.1％～9％(V/W，mL/g；即种子液与培养基的用量关系为0.1～9mL：100g)；所述芽孢杆菌和酵母菌的活菌总数均为1.0
×
107～2.8
×
109cfu/mL；
[0018]所述乳酸菌发酵种子液为植物乳杆菌发酵种子液、干酪乳杆菌发酵种子液和鼠李糖乳杆菌发酵种子液，活菌总数为1.5
×
108～3.5
×
109cfu/mL，接种量为发酵培养基重量的0.8％～5.7％(V/W，mL/g；即种子液与培养基的用量关系为0.8～5.7mL：100g)；
[0019]所述乳酸菌发酵种子液、芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液接种时的体积比为2：2：3。
[0020]优选的，所述芽孢杆菌发酵种子液和酵母菌发酵种子液的接种量均为发酵培养基重量的2％(V/W，mL/g)。
[0021]优选的，步骤(3)中所述发酵混合物的含水量为40％～60％；所述发酵时间为5～20天，发酵温度为24～38℃。
[0022]本专利技术所制备的添加剂用于添加到水产养殖饲料中抑制肠道致病菌的用途；所述肠道致病菌具体为肠炎沙门氏菌、大肠杆菌或福氏志贺菌；具体操作是：将发酵饲料添加剂添加到水产饲料中得到混合饲料进行喂养；所述复方发酵中药饲料添加剂的添加量占混合饲料的重量为5％～25％。
[0023]技术方案的具体筛选过程如下：
[0024](1)中药原料的筛选：
[0025]从45种抑菌中药(乌梅、天冬、山茱萸、大蒜、五味子、黄连、鱼腥草、连翘、虎杖、马齿苋、青皮、知母、秦皮、夏枯草、苏木、地锦草、白头翁、诃子、艾叶、黄芩、黄芪、黄柏、五倍子、野菊花、女贞子、白术、板蓝根、银杏叶、蒲公英、荆芥、当归、杜仲、大黄、赤芍、杜仲叶、山楂、儿茶、地黄、甘草、川穹、金银花、大青叶、苍耳子、石榴皮、穿心莲)中，通过抑菌实验筛选得到发酵前后对肠炎沙门氏菌、大肠杆菌、福氏志贺菌具有较强抑菌效果的中药。抑菌实验采用琼脂扩散法，抑菌圈大小见表1、表2、表3。
[0026]表1发酵前后中药原料对肠炎沙门氏菌抑菌圈的大小
[0027][0028][0029]注：发酵前与发酵后抑菌圈直径每列中，标注相同大写字本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：(1)配制中药发酵培养基：将复方中药材研磨成细粉，和豆粕、次粉、复合酶充分混合，得到固态发酵培养基；发酵培养基的各组分重量百分含量分别为：复方中药材30～70％；豆粕18～46％；次粉12～24％；复合酶添加量0.1～10％；所述复方中药材由黄连、五味子、知母、五倍子、大黄、黄芩、甘草、诃子、儿茶按照等质量比例混合而成；所述复合酶由纤维素酶、半纤维素酶和单宁酶组成；(2)将芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌分别接种到相应的液体培养基进行活化培养，分别得到芽孢杆菌发酵种子液、酵母菌发酵种子液和乳酸菌发酵种子液；(3)接种步骤(2)得到的芽孢杆菌种子液、酵母菌种子液、乳酸菌种子液于步骤(1)得到的发酵培养基中，调整发酵温度以及培养基的含水量，混合均匀，得到发酵混合物，在密闭条件下进行厌氧发酵后得到防治肠道致病菌的发酵中药饲料添加剂。2.根据权利要求1所述的一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法，步骤(1)中所述豆粕在使用时需要烘干、研磨成粉末状使用；所述粉末是过50
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80目筛得到；所述复方中药材研磨成粉末状使用，所述粉末是过50目筛得到。所述纤维素酶、半纤维素酶、单宁酶的质量比为2:2:3；所述复合酶中，半纤维素酶酶活力为5万u/g，纤维素酶和单宁酶的酶活均为1万u/g。3.根据权利要求1所述的一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法，所述发酵培养基的各组分重量百分含量分别为：复方中药材50％；豆粕30％；次粉20％；复合酶添加量1％。4.根据权利要求1所述的一种防治常见肠道致病菌的复方发酵中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的芽孢杆菌为解淀粉芽孢杆菌；所述酵母菌为热带假丝酵母；所述乳...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈华友，卢晨曦，陈曦华，蔡康涛，姚丹，陈华撑，
申请(专利权)人：陈华友，
类型：发明
国别省市：