本发明专利技术公开了一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法，包括如下步骤：(1)从野外收集血叶兰野生种质的活体植株；(2)将上述活体植株用自来水冲洗和洗洁精浸泡后，清洗干净，水分吸干，获得清洁植株；(3)将清洁植株的果荚用无菌器械切下后，将该果荚完全经酒精和升汞处理后进行切段，至少保留一个芽点，然后置于诱导培养基中进行诱导培养，得瓶苗；(4)将步骤(1)所得的瓶苗进行炼苗后进行移栽至移栽基质中；(5)对移栽后的瓶苗用甲霜恶霉灵可湿性粉剂喷洒。本发明专利技术的采用血叶兰果荚作为外植体的来源，配合特定组分的诱导培养基能够实现血叶兰的一步成苗快速繁殖及无菌播种，实现了血叶兰的人工培植，解决了血叶兰的产业化问题。解决了血叶兰的产业化问题。
【技术实现步骤摘要】
一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法
[0001]本专利技术属于药用植物培养
，具体涉及一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法。
技术介绍
[0002]民间认为血叶兰(Ludisia discolor A.Rich.)是“公金线莲”，金线莲为“母金线莲”，二者主要却别在于叶形、叶面金线的稀疏、节间的长短、茎段的粗细等，其学名及分类学地位目前尚有争议，有研究表明其与金线莲为同一科属，即兰科开唇兰属(Anoectochilus B1.)植物，也有研究认为二者为同种植物，从外观形态上二者差异极为显著，洗净的漳州野生血叶兰单株重量可达30多克，是福建野生金线莲的4
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5倍，前者茎粗可达1.5厘米，是后者的3倍左右，二者的亲缘关系有待进一步研究。二者的营养价值目前市场上认为血叶兰较金线莲差，但有这样的观念可能是因为外观上血叶兰卖相较差(野外采摘、运输过程造成的断杆、掉叶等)、价格较低、加上企业的宣传，多重原因造成血叶兰往往只能以“假冒金线莲”的名义长期存在着，但据资料检索发现，尚未有血叶兰与金线莲营养成分对比、功效对比的相关报道。
[0003]在闽南及广东地区市场，销售商及消费者对血叶兰往往按绿杆和红杆两种进行区分，红杆价格较绿杆高，血叶兰长期以来在民间有很广的认识度，民间应用史长达百年，但由于野生资源也长期比较充足，因此没有受到很大的重视，但近年来因大量盗挖、盗采，其野生存量锐减、价格飙升，人工规模化繁育、开发应用、示范推广迫在眉睫。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于提供应一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法。
[0005]本专利技术的技术方案如下：
[0006]一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法，包括如下步骤：
[0007](1)从野外收集血叶兰野生种质的活体植株；
[0008](2)将上述活体植株用自来水冲洗和洗洁精浸泡后，将其茎段、叶片以及根部清洗干净，用吸水纸将表面的水分吸干，获得清洁植株；
[0009](3)将清洁植株的果荚用无菌器械切下后，将该果荚完全浸没于70％酒精中，20秒后夹出，无菌水过洗3遍，然后浸入0.1％升汞溶液，15min后取出进行切段，每段长度1
‑
1.5厘米，至少保留一个芽点，然后置于诱导培养基中进行诱导培养，得具有2
‑
3片叶、高度为6
‑
7cm的瓶苗；
[0010](4)将步骤(1)所得的瓶苗进行炼苗15
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20d后进行移栽至移栽基质中；
[0011](5)对移栽后的瓶苗用40
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50％的甲霜恶霉灵可湿性粉剂800
‑
1000倍液喷洒。
[0012]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述诱导培养基由如下比例的原料组分组成：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶25g∶6g∶20g∶2g∶100g∶1.0g，其中每升MS培养基中含有6
‑
BA 2mg、NAA 1.0mg和KT 0.2mg。
[0013]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述步骤(3)中的诱导培养的条件为：生长温度为5
‑
35℃，光照强度为15001x
‑
40001x，15
‑
30d消毒一次，其中光照具体为：夏季昼光照，冬季夜光照，时长均为10
‑
12h。
[0014]进一步优选的，所述步骤(3)中的诱导培养的光照强度为35001x。
[0015]进一步优选的，所述步骤(3)中的诱导培养的生长温度为15
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28℃。
[0016]进一步优选的，所述步骤(3)中的诱导培养的光照强度为35001x，生长温度为15
‑
28℃。
[0017]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述步骤(4)中的炼苗时不能有阳光直射，以漫射光为主，光照强度不高于200001x。
[0018]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述步骤(4)中的移栽的当日浇定根水，移栽的株行距为1.8
‑
2.2cm
×
4.5
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5.5cm，深度为0.8
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1.2cm。
[0019]在本专利技术的一个优选实施方案中，所述移栽基质包括重量比为5.5～6.5∶1.5～2.5∶1.5～2.5的泥炭土、腐熟木屑和细沙，且每公斤移栽基质中含有5～7.5kg熟石灰或适量多菌灵可湿性粉剂。
[0020]进一步优选的，所述移栽基质包括重量比为6∶2∶2的泥炭土、腐熟木屑和细沙，且每公斤移栽基质中含有6kg熟石灰或适量多菌灵可湿性粉剂。
[0021]本专利技术的有益效果是：本专利技术的采用血叶兰果荚作为外植体的来源，配合特定组分的诱导培养基能够实现血叶兰的一步成苗快速繁殖及无菌播种，实现了血叶兰的人工培植，解决了血叶兰的产业化问题。
具体实施方式
[0022]以下通过具体实施方式对本专利技术的技术方案进行进一步的说明和描述。
[0023]实施例1
[0024](1)从漳州地区野外(南靖、华安、平和等地)、民间收集不同表型的血叶兰野生种质，尽可能在采摘当天带回实验室进行外植体建立或移栽到资源圃保存备用，获得活体植株；
[0025](2)将上述活体植株用自来水冲洗和洗洁精浸泡后，将其茎段、叶片以及根部清洗干净，用吸水纸将表面的水分吸干，获得清洁植株；
[0026](3)将清洁植株的果荚用无菌器械切下后，将该果荚完全浸没于70％酒精中，20秒后夹出，无菌水过洗3遍，然后浸入0.1％升汞溶液，15min后取出进行切段，每段长度1
‑
1.5厘米，至少保留一个芽点，然后置于诱导培养基中进行诱导培养，得具有2
‑
3片叶、高度为6
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7cm的瓶苗；
[0027]诱导培养基由如下比例的原料组分组成：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶25g∶6g∶20g∶2g∶100g∶1.0g，其中每升MS培养基中含有6
‑
BA 2mg、NAA 1.0mg和KT 0.2mg；该诱导培养基的配制方法为：a、将蔗糖、卡拉胶、胡萝卜泥、蛋白胨、香蕉泥和活性炭加入到MS培养基中，加热同时搅匀；b、将步骤a所得的物料分装后进行高压蒸汽灭菌，再于室温冷却至凝固；c、将步骤b所得的物料于夏季时放置4d或于冬季时放置6d，排除污染的培养基后，即得.
[0028]所述步骤(3)中的诱导培养的条件为：生长温度为15
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28℃，光照强度为35001x，
15
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30d消毒一次，其中光照具体为：夏季昼光照，冬季夜光照，时长均为10
‑
12h；
[0029](4)将步骤(1)所得的瓶苗进行炼苗15
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20d后进行移栽至移栽基质中；炼苗时不能有阳光直射，以漫射光为主，光照强度本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)从野外收集血叶兰野生种质的活体植株；(2)将上述活体植株用自来水冲洗和洗洁精浸泡后，将其茎段、叶片以及根部清洗干净，用吸水纸将表面的水分吸干，获得清洁植株；(3)将清洁植株的果荚用无菌器械切下后，将该果荚完全浸没于70％酒精中，20秒后夹出，无菌水过洗3遍，然后浸入0.1％升汞溶液，15min后取出进行切段，每段长度1
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1.5厘米，至少保留一个芽点，然后置于诱导培养基中进行诱导培养，得具有2
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3片叶、高度为6
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7cm的瓶苗；(4)将步骤(1)所得的瓶苗进行炼苗15
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20d后进行移栽至移栽基质中；(5)对移栽后的瓶苗用40
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50％的甲霜恶霉灵可湿性粉剂800
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1000倍液喷洒。2.如权利要求1所述的一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法，其特征在于：所述诱导培养基由如下比例的原料组分组成：MS培养基∶蔗糖∶卡拉胶∶胡萝卜泥∶蛋白胨∶香蕉泥∶活性炭＝1L∶25g∶6g∶20g∶2g∶100g∶1.0g，其中每升MS培养基中含有6
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BA 2mg、NAA 1.0mg和KT 0.2mg。3.如权利要求1所述的一种血叶兰果荚消毒及无菌播种方法，其特征在于：所述步骤(3)中的诱导培养的条件为：生长温度为5
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35℃，光照强度为15001x
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40001x，15
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30d消毒一...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑涛，吴艺玲，蔡坤秀，杨俊杰，陈振东，
申请(专利权)人：福建省热带作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：
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