包含新型环状二核苷酸衍生物的抗体药物偶联物制造技术

期望开发能够全身给药，且能将STING激动剂特异性地送达至目标细胞、脏器(例如，肿瘤部位)的抗体药物偶联物以及使用该抗体药物偶联物的STING激动剂活性相关的疾病、例如能基于免疫活化而治疗的疾病(例如，癌)的治疗剂和/或治疗方法。本发明专利技术提供一种能够全身给药、且在表达抗原的肿瘤中显示抗肿瘤效果的新型抗体CDN衍生物偶联物。体CDN衍生物偶联物。体CDN衍生物偶联物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含新型环状二核苷酸衍生物的抗体药物偶联物


[0001]本专利技术涉及使具有STING激动剂活性的具有新结构的环状二核苷酸衍生物与针对靶细胞的抗体经由连接子结合而成的抗体药物偶联物、含有该抗体药物偶联物的医药组合物等。

技术介绍

[0002]STING(Stimulator of Interferon Genes：干扰素基因刺激蛋白)是局部存在于内质网的跨膜型衔接蛋白(Adaptor Protein)(非专利文献1)。STING起到哺乳动物的自然免疫活化的中枢分子的功能，负责抵御如细菌、病毒之类的病原体进入的最前线。已知STING的活化是由多个细胞质DNA传感器感知到外因性以及内因性的DNA时的信号引起的。可认为在细胞质DNA传感器中，cGAS(Cyclic GMP－AMP Synthase：环状GMP－AMP合酶)为重要的DNA传感器。当cGAS感知到DNA时，产生环状二核苷酸(2
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，3
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－cGAMP)，该2
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，3
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－cGAMP与STING直接结合而使STING活化(非专利文献2)。活化后的STING向高尔基体移动，在那里促进TBK1(Tank－binding kinase 1：Tank结合激酶1)的自磷酸化。进行自磷酸化而活化的TBK1将IRF3(Interferon regulatory factor 3：干扰素调节因子3)转录途径(非专利文献3)以及NFκB转录途径(非专利文献4)两者活化，增加被称为干扰素或细胞因子(I型IFN(Interferon：干扰素)、IL－6(Interleukin－6：白细胞介素－6)、TNF－α(Tumor Necrosis Factor－α：肿瘤坏死因子－α))的炎性蛋白质的产生。这些蛋白质使包含通过复杂的级联(cascade)而破坏病原体或癌细胞的T细胞的获得性免疫系统启动。
[0003]根据最近的研究显示：STING不仅仅促进针对微生物的宿主防御，也促进抗肿瘤免疫。例如，在向STING缺损小鼠移植免疫原性肿瘤的情况下，比起野生型小鼠或TRIF(Toll/Interleukin－1(IL－1)receptor domain containing adaptor－inducing interferon－β：受体域含衔接子诱导干扰素－β)缺损小鼠，肿瘤急速增殖。此外，STING缺损小鼠与TLR(Toll－like receptor：Toll样受体)、MyD88(Myeloid differentiation primary response 88：髓样分化因子初次应答88)、MAVS(Mitochondrial antiviral－signaling protein：线粒体抗病毒信号蛋白)缺损小鼠不同，对肿瘤的自发性CD8
+
T细胞的致敏(priming)也消失了。这表明通过细胞质DNA感知而启动的STING途径参与肿瘤增殖的控制(非专利文献5)。在其他的研究中也显示：STING在放射线治疗(非专利文献6)或抗CD47抗体疗法(非专利文献7)的抗肿瘤效果上是必要的。用放射线或抗CD47抗体处置之后的、来自死亡的肿瘤细胞的DNA向树突状细胞的细胞质移动而活化了cGAS－STING途径之后，诱导IFN产生而作为先天性免疫和获得性免疫的中介。该研究表明：通过STING途径活化后的树突状细胞介入的交叉致敏(cross priming)在用于引起对肿瘤的获得性免疫是重要的。
[0004]作为血管破坏剂而公知的类黄酮系低分子化合物DMXAA由于诱导巨噬细胞的I型IFN，因此在小鼠肿瘤模型中显示具有强的抗肿瘤活性(非专利文献8)。DMXAA由于在临床前的优异的抗肿瘤效果，因此被期待作为非小细胞肺癌的免疫疗法药，但是在人的临床试验中失败了(非专利文献9)。根据最近的研究清楚表明，DMXAA为针对小鼠的STING的特异性激
动剂，对于人的STING因没有物种交叉性而不能结合(非专利文献10)。就结果而言，DMXAA对人是无效的，但是根据小鼠模型的研究表明，低分子药介入STING而有效地致敏CD8
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T细胞，能增强抗肿瘤免疫。
[0005]作为其他的低分子化合物，环状二核苷酸(Cyclic dinucleotide、CDN)显示：在向荷瘤小鼠给药时，由于STING介入而抗肿瘤免疫应答增强，肿瘤增殖被显著阻碍，可改善小鼠的生存率(非专利文献11)。CDN分为来自细菌的具有标准的两个3
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－5
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磷酸键的CDN(cyclic－di－GMP，cyclic－di－AMP，3
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，3
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－cGAMP)和哺乳动物的cGAS所产生的具有非标准的2
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－5
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磷酸键的混合结合型的CDN(2
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，3
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－cGAMP)。根据最近的研究显示，比起标准的CDN，混合结合型的CDN更能普遍地活化多样的STING(非专利文献12)。
[0006]天然型的CDN因为会像多数的核酸分子那样被血液中的核酸分解酶快速地分解，因此无法以原本的形态给药。因此，开发了在活体内具有STING激动剂活性的合成低分子化合物(例如专利文献1～26)。
[0007]当前，作为抗肿瘤剂推进临床试验的STING激动剂的MIW－815(有时也称为ADU－S100、ML RR－S2 CDA或ML－RR－CDA
·
2Na
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)被直接给药至肿瘤内。将STING激动剂直接给药至肿瘤内的方法只能对肿瘤内的限定范围给药药剂，此外，难以向多个远处转移性肿瘤全部直接给药，因此存在可治疗的肿瘤有限的问题。非专利文献13中记载了通过ML RR－S2 CDA给药显示出抗肿瘤效果，但是仅为肿瘤内给药，而没有显示通过全身给药(例如，静脉给药)产生的抗肿瘤效果。非专利文献14中记载了将STING激动剂的SB11285向小鼠肿瘤模型静脉给药时显示出抗肿瘤效果，但是SB11285具体是具有怎样的结构的化合物并不清楚。专利文献14中记载了含有免疫刺激化合物、抗体结构物以及连接子的偶联物，但是没有记载作为免疫刺激化合物使用STING激动剂的偶联物的具体例子。专利文献26中记载了经由连接子将具有特定的结构的CDN和抗体结合的偶联物，但是没有记载体内(in vivo)给药偶联物的实施例，没有确认偶联物的抗肿瘤效果。
[0008]现有技术文献
[0009]专利文献
[0010]专利文献1：国际公开第2014/099824号
[0011]专利文献2：国际公开第2014/179335号
[0012]专利文献3：国际公开第2014/189805号
[0013]专利文献4：国际公开第2014/189806号
[0014]专利文献5：国际公开第2015/074145号
[0015]专利文献6：国际公开第2015/185565号
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗体药物偶联物，其由下式(II)表示：式中，m1为1～10的范围，Ab表示抗体或该抗体的功能性片段，该抗体的糖链可任选地被重构，在此，抗体表示选自由抗CD70抗体、抗TROP2抗体以及抗EGFR抗体构成的组中的任意抗体，L表示连接Ab与D的连接子，Ab可任选地从其氨基酸残基直接与L结合，或从Ab的糖链或经重构的糖链与L结合，D表示下式(I)所示的化合物：在此，L与L1中所含的任意的－NH2或羟基结合，L1表示以下的三个结构式中的任一基团：以及在此，波浪线表示取代位置，Q以及Q
’
分别独立地表示羟基或硫醇基，R
21
以及R
22
分别独立地表示羟基或氟原子，W表示－NH－或硫原子。2.根据权利要求1所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的两个结构式中的任一结构式表示：在此，L1、Q、Q
’
以及W如前述定义。3.根据权利要求1或2所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的四个结构式中的任一结构式表示：
在此，星号表示与L结合，Q、Q
’
以及W如前述定义。4.根据权利要求1～3中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的三个结构式中的任一结构式表示：在此，星号表示与L结合，W如前述定义。5.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的三个结构式中的任一结构式表示：
在此，星号表示与L结合。6.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的四个结构式中的任一结构式表示：在此，星号表示与L结合。7.根据权利要求1～4或权利要求6中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，D由下式表示：
在此，星号表示与L结合。8.根据权利要求1～3中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的两个结构式中的任一结构式表示：在此，星号表示与L结合，W如前述定义。9.根据权利要求1～3或权利要求8中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，D由以下的四个结构式中的任一结构式表示：
在此，星号表示与L结合。10.根据权利要求1～9中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，连接子L由－Lb－La－Lp－Lc－*表示，式中，星号表示与药物D结合，Lp表示在靶细胞中能够切断的由氨基酸序列形成的连接子或者不存在，La表示选自以下的组中的任意一个：－C(＝O)－(CH2CH2)n2－C(＝O)－、－C(＝O)－(CH2CH2)n2－CH2－C(＝O)－、－C(＝O)－(CH2CH2)n2－C(＝O)－NH－(CH2CH2)n3－C(＝O)－、－C(＝O)－(CH2CH2)n2－C(＝O)－NH－(CH2CH2)n3－CH2－C(＝O)－、－C(＝O)－(CH2CH2)n2－C(＝O)－NH－(CH2CH2O)n3－CH2－C(＝O)－、－(CH2)n4－O－C(＝O)－、以及、－(CH2)n9－C(＝O)－，在此，n2表示整数1～3，n3表示整数1～5，n4表示整数0～2，n9表示整数2～7，Lb表示将La与Ab的糖链或经重构的糖链结合的间隔子或将La与Ab的半胱氨酸残基结合的间隔子，以及，Lc表示－NH－CH2－、―NH－苯基－CH2－O(C＝O)－或―NH－杂芳基－CH2－O(C＝O)－或不存在。11.根据权利要求10所述的抗体药物偶联物，其中，Lc为－NH－CH2－。12.根据权利要求10或11所述的抗体药物偶联物，其中，Lp为－GGFG－、－GGPI－、－GGVA－、－GGFM－、－GGVCit－、－GGFCit－、－GGICit－、－GGPL－、－GGAQ－或－GGPP－中的任意一个。13.根据权利要求12所述的抗体药物偶联物，其中，Lp为－GGFG－或－GGPI－。14.根据权利要求10～13中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，La表示选自由以下构成的组中的任意一个：－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－、－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2O)3－CH2－C(＝O)－、－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－NH－(CH2CH2O)4－CH2－C(＝O)－、以及、－(CH2)5－C(＝O)－。15.根据权利要求10～14中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，Lb由以下结构式中的任一结构式表示：或者或
或者在上述所示的Lb的结构式中，星号表示与La结合，波浪线表示与Ab的糖链或经重构的糖链结合。16.根据权利要求10～14中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，Lb为－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－，在此，－(琥珀酰亚胺－3－基－N)－表示以下的结构式：在此，星号表示与La结合，波浪线表示与抗体的半胱氨酸残基的侧链形成硫醚而结合。17.根据权利要求10～15中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，连接子L由－Lb－La－Lp－Lc－*表示，式中，星号表示与药物D结合，Lp为－GGFG－、或－GGPI－，La表示－C(＝O)－CH2CH2－C(＝O)－，Lb表示下式：或者在上述所示的Lb的结构式中，星号表示与La结合，波浪线表示与Ab的糖链或经重构的糖链结合，Lc表示－NH－CH2－。18.根据权利要求1～17中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，抗体药物偶联物中的每一分子抗体的平均药物结合数在1～10个的范围。19.根据权利要求18所述的抗体药物偶联物，其中，抗体药物偶联物中的每一分子抗体的平均药物结合数在1～5个的范围。20.根据权利要求19所述的抗体药物偶联物，其中，抗体药物偶联物中的每一分子抗体的平均药物结合数在3～5个的范围。21.根据权利要求1～20中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，抗体从与抗体的Asn297结合的糖链与L结合，所述糖链为N297糖链。
22.根据权利要求21所述的抗体药物偶联物，其中，N297糖链为经重构的糖链。23.根据权利要求21或22所述的抗体药物偶联物，其中，N297糖链为具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1或N297－(Fuc)SG：式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5为整数2～5；式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧以及1－6链侧两者的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5为整数2～5。24.根据权利要求21～23中任一项所述的抗体药物偶联物，其由下式表示：式中，m2表示整数1或2，L为连接Ab的N297糖链和D的连接子，如前述定义，Ab表示抗CD70抗体、抗TROP2抗体、或者抗EGFR抗体或这些抗体的功能性片段，Ab的N297糖链表示为具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1或N297－(Fuc)SG，式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5表示整数2～5；
式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧以及1－6链侧两者的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5表示整数2～5，D由以下的四个结构式中的任一结构式表示，在此，式中，星号表示与L结合。25.根据权利要求24所述的抗体药物偶联物，其选自下式：
在上述所示的各结构式中，m2表示为整数1或2，Ab表示抗CD70抗体、抗TROP2抗体、或者抗EGFR抗体或这些抗体的功能性片段，Ab的N297糖链表示为具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1或N297－(Fuc)SG中的任意一个，式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5表示整数2～5；
式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧以及1－6链侧两者的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5表示整数2～5。26.根据权利要求25所述的抗体药物偶联物，其选自下式：在上述所示的各结构式中，m2表示为整数1或2，Ab表示抗CD70抗体、抗TROP2抗体、或者抗EGFR抗体或这些抗体的功能性片段，Ab的N297糖链表示为具有下式所示的结构的N297－(Fuc)MSG1或N297－(Fuc)SG中的任意一个，
式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5表示整数2～5；式中，波浪线表示与抗体的Asn297结合，L(PEG)表示－(CH2－CH2－O)n5－CH2－CH2－NH－，表示该L(PEG)的右端的氨基与N297糖链的β－Man的支链的1－3链侧以及1－6链侧两者的非还原末端的唾液酸的2位羧基进行酰胺键合，星号表示与所述连接子L的Lb的1，2，3－三唑环上的1位或3位氮原子结合，以及，n5表示整数2～5。27.根据权利要求1～26中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为抗CD70抗体。28.根据权利要求1～26中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为抗TROP2抗体。29.根据权利要求1～26中任一项所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为抗EGFR抗体。30.根据权利要求27所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含由序列号1所述的氨基酸序列形成的轻链以及由序列号2所述的氨基酸序列形成的重链的抗体、或包含由序列号3所述的氨基酸序列形成的轻链以及由序列号4所述的氨基酸序列形成的重链的抗体。31.根据权利要求28所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含由序列号5所述的氨基酸序列形成的轻链以及由序列号6所述的氨基酸序列形成的重链的抗体、或包含由序列号7所述的氨基酸序列形成的轻链以及由序列号8所述的氨基酸序列形成的重链的抗体。32.根据权利要求29所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含由序列号9所述的氨基酸序列形成的轻链以及由序列号10所述的氨基酸序列形成的重链的抗体、或包含由序列号11所述的氨基酸序列形成的轻链以及由序列号12所述的氨基酸序列形成的重链的抗体。33.根据权利要求27所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号1的氨基酸编号1～112所
述的氨基酸序列形成的轻链可变区，所述重链包含由序列号2的氨基酸编号1～118所述的氨基酸序列形成的重链可变区，或者，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号3的氨基酸编号1～108所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，所述重链包含由序列号4的氨基酸编号1～118所述的氨基酸序列形成的重链可变区。34.根据权利要求28所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号5的氨基酸编号1～108所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，所述重链包含由序列号6的氨基酸编号1～121所述的氨基酸序列形成的重链可变区，或者，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号7的氨基酸编号1～108所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，所述重链包含由序列号8的氨基酸编号1～121所述的氨基酸序列形成的重链可变区。35.根据权利要求29所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号9的氨基酸编号1～108所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，所述重链包含由序列号10的氨基酸编号1～119所述的氨基酸序列形成的重链可变区，或者，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号11的氨基酸编号1～108所述的氨基酸序列形成的轻链可变区，所述重链包含由序列号12的氨基酸编号1～116所述的氨基酸序列形成的重链可变区。36.根据权利要求27所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号35所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号36所述的氨基酸序列形成的CDRL2、以及由序列号37所述的氨基酸序列形成的CDRL3，所述重链包含由序列号38所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号39所述的氨基酸序列形成的CDRH2、以及由序列号40所述的氨基酸序列形成的CDRH3，或者，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号41所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号42所述的氨基酸序列形成的CDRL2、以及由序列号43所述的氨基酸序列形成的CDRL3，所述重链包含由序列号44所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号45所述的氨基酸序列形成的CDRH2、以及由序列号46所述的氨基酸序列形成的CDRH3。37.根据权利要求28所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号47所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号48所述的氨基酸序列形成的CDRL2、以及由序列号49所述的氨基酸序列形成的CDRL3，所述重链包含由序列号50所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号51所述的氨基酸序列形成的CDRH2、以及由序列号52所述的氨基酸序列形成的CDRH3，或者，抗体为包含如下轻链和重链的抗体，所述轻链包含由序列号53所述的氨基酸序列形成的CDRL1、由序列号54所述的氨基酸序列形成的CDRL2、以及由序列号55所述的氨基酸序列形成的CDRL3，所述重链包含由序列号56所述的氨基酸序列形成的CDRH1、由序列号57所述的氨基酸序列形成的CDRH2、以及由序列号58所述的氨基酸序列形成的CDRH3。38.根据权利要求29所述的抗体药物偶联物，其中，抗体为包含如下轻链和重链的抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：石崎雅之，铃木督，久德真梨子，雪浦弘志，原香生子，千原正尚，大冢贵文，和田悌司，
申请(专利权)人：第一三共株式会社，
类型：发明
国别省市：