核酸自组装介导的ADC药物的构建方法及应用技术

本发明专利技术涉及生物技术药物领域，具体地本发明专利技术提供了一种基于互配核酸骨架的ADC(antibody

【技术实现步骤摘要】
核酸自组装介导的ADC药物的构建方法及应用


[0001]本专利技术涉及生物技术药物领域，具体地涉及核酸多聚化介导的ADC(antibody
‑
drug conjugate)，即抗体
‑
药物偶联物的构建方法及应用。

技术介绍

[0002]ADC是一种为癌症治疗开发的靶向药物，可将对细胞杀伤性强的化疗药物特异性的递送到癌细胞里，减少对人体内细胞的非特异性杀伤。ADC的机制是通过抗体结合癌细胞表面的受体而被细胞内吞，然后在溶酶体(lysosome)里药物得到释放，逃离lysosome，进入细胞质，导致细胞死亡。ADC的概念很早之前就已被提出，但由于各方面知识和技术条件的限制，相关的药物研发一度缓慢且颇具周折。不过，随着技术的进步和临床研究经验的积累，ADC类的药物近年来逐渐走出低谷，成为生物医药开发领域的主流之一。
[0003]目前在领域里，ADC分子的制备，重点是化学连接子与小分子载荷构成的化合物(linker
‑
payload)与单克隆抗体分子之间的偶联。经典的方法是通过特定的化学反应将linker定点偶联到抗体分子表面的赖氨酸或半胱氨酸位点上。但由于抗体分子上通常有多个赖氨酸或半胱氨酸的位点，且每个氨基酸附近的空间位阻效应也不完全相同，这就导致实际偶联到抗体分子上的linker
‑
payload的数目即DAR(Drug
‑
Antibody Ratio)不均一，进而对ADC的药效、药代、生物分布、毒理等各方面的分析带来很大的不确定性，也导致ADC的生产成本居高不下。但由于DAR不均一的状况是源于传统的偶联方法的固有缺陷，因此即便是已经获得FDA批准的ADC分子，DAR也是高度不均一的。
[0004]因此本领域迫切需要开发一种简单、灵活、高效、模块化的制备ADC药物的方法，可让ADC具有完全均一的DAR。

技术实现思路

[0005]本专利技术的主要目的在于提供一种简单、灵活、高效、模块化的制备ADC药物的方法，可让ADC具有完全均一的DAR。
[0006]在本专利技术的第一方面，提供了一种基于互配核酸骨架的抗体偶联药物(antibody
‑
drug conjugate,ADC)，所述的抗体偶联药物是n个具有互配核酸骨架的单体复合形成的多聚体，其中，m个“靶向单体”为连接核酸单链的靶向细胞表面的抗体或蛋白，k个“药物单体”为连接核酸单链的药物(toxin payload)，而n为2
–
8的正整数，m(<n)为1
–
3的正整数，k为1
–
(n
‑
m)的正整数；在所述多聚体中，每个单体的核酸单链与另外1
–
3个单体的核酸单链通过碱基互补形成互配双链，从而形成互配核酸骨架结构。
[0007]在另一优选例中，n＝3
‑
8。
[0008]在另一优选例中，所述的靶向单体具有式I结构：
[0009]A
–
W
‑
D0
ꢀꢀꢀ
(I)
[0010]而所述的药物单体具有式II结构：
[0011]D1
–
W
–
D2
ꢀꢀꢀ
(II)
[0012]式中，
[0013]A为抗体或蛋白；
[0014]W为单链核酸序列；
[0015]D0为无或药物；
[0016]D1为无或药物
[0017]D2为无或药物
[0018]“–”
为接头或键，
[0019]D0、D1和D2中至少一个为药物。
[0020]在另一优选例中，
“–”
为共价键或连接物或两者组合。
[0021]在另一优选例中，A为特异性结合细胞表面受体而导致被内吞的抗体或蛋白。
[0022]在另一优选例中，D1/D2为用于杀伤细胞的小分子或多肽毒素。
[0023]在另一优选例中，所述核酸链是耐降解的，选自下组：左旋核酸、肽核酸、锁核酸、吗啉磷酸酯核酸、硫代修饰核酸、2'
‑
氟修饰核酸、5
‑
羟甲基胞嘧啶核酸、或其组合。
[0024]在另一优选例中，在所述多聚体中，每个靶向单体的部件A是相同或不同的。
[0025]在另一优选例中，在所述多聚体中，每个药物单体的部件D1是相同或不同的，每个药物单体的部件D2是相同或不同的。
[0026]在另一优选例中，在所述多聚体中，每个单体的W是不同的。
[0027]在另一优选例中，W的两端和/或中间的的nucleotide上可以通过化学修饰连接药物D1或D2。
[0028]在另一优选例中，所述靶向单体(式I)和药物单体(式II)中的核酸序列W具有式III所示的结构：
[0029]X1
–
R1
–
X2
–
R2
–
X3
ꢀꢀꢀ
(III)
[0030]其中，
[0031]R1为碱基互补配对区域1；
[0032]R2为碱基互补配对区域2；
[0033]X1、X2和X3各自独立地为无或冗余核酸；
[0034]“–”
为键。
[0035]在另一优选例中，R1和R2的长度各自独立地为10
‑
20碱基，较佳地14
‑
16碱基。
[0036]在另一优选例中，X1的长度为0
‑
5碱基。
[0037]在另一优选例中，X3的长度为0
‑
5碱基。
[0038]在另一优选例中，X2的长度为0
‑
3碱基。
[0039]在另一优选例中，X2的序列选自下组：A，AA，AGA或AAA。
[0040]的长度各自独立地为10
‑
20碱基，较佳地14
‑
16碱基。
[0041]在另一优选例中，每个单体的R1与左邻(或左侧)单体的R2形成碱基互补配对结构；而R2与右邻(或右侧)单体的R1形成碱基互补配对结构。
[0042]在本专利技术的第二方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括：
[0043](a)第一方面所述的基于互配核酸骨架的抗体偶联药物，
[0044]其中所述靶向单体选自靶向单体文库；所述药物单体选自药物单体文库；和
[0045](b)药学上可接受的载体。
gel
[0072]图9纳米抗体药物偶联物的体外细胞杀伤活性评价。
具体实施方式
[0073]本专利技术人经过广泛而深入的研究，首次意外地开发了一种基于核酸链互配自组装形成的ADC复合物，其制备方法和应用。基于所述的自组装的特征，本专利技术人首次开发了一种ADC药物组装单元文库，可用于即时制备ADC复合物。采用此本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于互配核酸骨架的抗体偶联药物(antibody
‑
drug conjugate,ADC)，其特征在于，所述的抗体偶联药物是n个具有互配核酸骨架的单体复合形成的多聚体，其中，m个“靶向单体”为连接核酸单链的靶向细胞表面的抗体或蛋白，k个“药物单体”为连接核酸单链的药物(toxin payload)，而n为2
–
8的正整数，m(<n)为1
–
3的正整数，k为1
–
(n
‑
m)的正整数；在所述多聚体中，每个单体的核酸单链与另外1
–
3个单体的核酸单链通过碱基互补形成互配双链，从而形成互配核酸骨架结构。2.如权利要求1所述的抗体偶联药物，其特征在于，所述的靶向单体具有式I结构：A
–
W
‑
D0
ꢀꢀꢀ
(I)而所述的药物单体具有式II结构：D1
–
W
–
D2
ꢀꢀꢀ
(II)式中，A为抗体或蛋白；W为单链核酸序列；D0为无或药物；D1为无或药物D2为无或药物
“–”
为接头或键，D0、D1和D2中至少一个为药物。3.如权利要求1
‑
2任一项所述的抗体偶联药物，其特征在于，所述靶向单体(式I)和药物单体(式II)中的核酸序列W具有式III所示的结构：X1
–
R1
–
X2
–
R2
–
X3<...

【专利技术属性】
技术研发人员：周柳娟，曹婵，王楠，潘利强，周界文，
申请(专利权)人：安升上海医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：