一种促进上皮细胞粘附的多肽、功能胶原材料及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种促进上皮细胞粘附的多肽、功能胶原材料及其制备方法和应用。所述促进上皮细胞粘附的多肽包括顺次连接的胶原材料结合单元、连接单元和上皮细胞结合单元。本发明专利技术还提供了一种功能胶原材料，即将所述促进上皮细胞粘附的多肽与胶原材料孵育，使功能肽序列与胶原材料特异性结合，形成所述多肽功能化胶原材料。由本发明专利技术含有促进上皮细胞粘附的多肽制备得到的功能胶原材料能在损伤位置快速募集内源上皮细胞，并提高其黏附数量；且所述功能胶原材料不仅能够补充损伤区的功能细胞，还能促进多种生长因子和信号分子等的分泌，提供有利于损伤修复的微环境，从而增强组织器官损伤修复的效果。伤修复的效果。伤修复的效果。

【技术实现步骤摘要】
一种促进上皮细胞粘附的多肽、功能胶原材料及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种促进上皮细胞粘附的多肽、功能胶原材料及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]人体组织器官中，上皮细胞行使着重要的功能，如肺的气体交换、肾脏的滤过作用、肝脏的解毒和结合作用、胰岛细胞分泌胰岛素作用以及皮肤抵抗有害环节的作用，因此组织器官损伤修复中上皮细胞的起着关键作用。然而，组织器官损伤发生后，损伤部位常形成不利的微环境，阻碍组织器官的快速上皮化。再加上，人体器官特异性分化的上皮细胞很难在体外进行培养，导致引入外源上皮细胞进行治疗受限。
[0003]CN110404110A公开了一种耐缝合的胶原基角膜再生修复材料及其制备方法。将胶原加入到盐酸中溶解，然后加入EDC/NHS交联剂进行交联反应，加热浓缩，得到交联胶原溶液，经脱泡后加入到培养皿中至一定厚度，然后将PCL圆环平铺到交联胶原溶液底部，风干，清洗，得到复合膜；将所得复合膜在模具中经100～120℃热压二次成型，得到耐缝合的胶原基角膜再生修复材料。该专利技术中角膜上皮细胞可以在本材料的表面上粘附和增殖，从而实现手术中角膜上皮细胞在植片上的快速上皮化，最终达到角膜缺损修复和角膜替代的目的。
[0004]CN113563452A公开了一种生物活性肽及其与脂肪干细胞外泌体在皮肤增殖修复中的应用，该生物活性肽可同时高亲和力结合VEGFR和bFGFR，促进上皮细胞增殖；该活性肽可与脂肪干细胞外泌体联用，治疗皮肤损伤，促进细胞因子分泌，还可以辅助脂肪细胞移植，抑制免疫排斥现象，降低炎症因子表达，提高透明质酸分泌水平，改善皮肤生理活性，维持皮肤组织正常生理状态，为皮肤的修复和养护提供了新思路。
[0005]CN108715600A公开了一种促进肠黏膜上皮细胞增殖和迁移的寡肽及其制备方法和应用，该专利技术制备的肽组分及寡肽对肠黏膜上皮细胞迁移具有显著促进作用；且对肠黏膜上皮细胞增殖具有选择性，对正常培养细胞促进作用不明显，但在细菌脂多糖存在的培养条件下，表现出明显的促进效果。
[0006]CN106880871A公开了一种用于促进子宫内膜修复的胶原蛋白真皮材料及其制备方法。本专利技术提供了一种用于促进子宫内膜修复的胶原蛋白真皮材料及其制备方法，包括如下步骤：将胶原蛋白浸泡在多肽溶液中，即得到胶原蛋白材料；所述多肽包括胶原蛋白结合域、促进MSCs聚集域和位于二者之间的连接肽，所引入的多肽改性能够增加MSCs的结合、聚集与分化，对宫腔粘连起到有效的屏障作用。
[0007]上述专利技术的多肽或修复材料仍然存在无法在损伤位置快速募集内源上皮细胞，且黏附数量有限的问题。因此，亟待提供一种具有胶原特异结合能力和结合上皮细胞的功能多肽，以及与胶原材料的功能化方法，以及募集多种上皮细胞的应用。

技术实现思路

[0008]针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种促进上皮细胞粘附的多肽、功能胶原材料及其制备方法和应用。所述多肽为一种同时具有胶原特异结合能力和结合上皮细胞的功能多肽，以及与胶原材料的功能化方法，以及募集多种上皮细胞的应用。
[0009]为达到此专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0010]第一方面，本专利技术提供一种促进上皮细胞粘附的多肽，所述促进上皮细胞粘附的多肽包括顺次连接的胶原材料结合单元、连接单元和上皮细胞结合单元。
[0011]本专利技术所述促进上皮细胞粘附的多肽能够在损伤位置快速募集内源上皮细胞并提高其黏附数量，不仅能够补充损伤区的功能细胞，还能增加分泌的多种生长因子和信号分子等，提供损伤修复有利的微环境，从而增强组织器官损伤修复的效果。
[0012]优选地，所述胶原材料结合单元的氨基酸序列选自TKKTLRT、WYRGRL、WREPSFCALS、KLWVLPK或LRELHLNNN中的任意一种，优选为TKKTLRT。
[0013]优选地，所述连接单元的氨基酸序列选自GSAGA、GSAGSAAGSGG或GGGGS中的任意一种，优选为GSAGA。
[0014]优选地，所述上皮细胞结合单元的氨基酸序列选自KHPAGGHPVIWS、SNFYMPL、STGLPAGGVITIGAGA或VAPGGHPVLL中的任意一种，优选为KHPAGGHPVIWS和/或SNFYMPL。
[0015]第二方面，本专利技术提供一种如第一方面所述的促进上皮细胞粘附的多肽的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0016]通过固相合成，在所述连接单元的两侧分别组装胶原材料结合单元和上皮细胞结合单元，得到所述促进上皮细胞粘附的多肽。
[0017]第三方面，本专利技术提供一种功能胶原材料，所述功能胶原材料包括胶原材料和所述促进上皮细胞粘附的多肽；其中，所述促进上皮细胞粘附的多肽中的胶原材料结合单元与所述胶原材料相识别连接。
[0018]本专利技术还提供了前述的多肽功能化胶原材料的制备方法，其包括：将前述的功能连接多肽与胶原材料孵育，使功能肽序列与胶原材料特异性结合，形成所述多肽功能化胶原材料。前述多肽功能化胶原材料，作为组织工程支架并能够募集上皮细胞(多种类型)的功能。
[0019]优选地，所述胶原材料为胶原膜。
[0020]在本专利技术中，所述胶原膜为任意市售可购得的胶原膜或现有方法制备得到的胶原膜，均可以通过与促进上皮细胞粘附的多肽中的胶原材料结合单元连接。
[0021]优选地，所述胶原膜的厚度为0.01
‑
3mm，例如可以是0.01mm、0.1mm、0.5mm、1mm、1.5mm、2mm、2.5mm、3mm等，标准胶原含量为20
‑
99.5％，例如可以是20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、99.5％等。
[0022]优选地，所述胶原膜的拉伸强度为0.001
‑
20MPa，例如可以是0.001MPa、1MPa、2MPa、3MPa、4MPa、5MPa、6MPa、7MPa、8MPa、9MPa、10MPa、12MPa、14MPa、16MPa、18MPa、20MPa等，缝合线撕裂力为0.5
‑
20N，例如可以是0.5N、2N、4N、6N、8N、10N、12N、14N、16N、18N、20N等。
[0023]第四方面，本专利技术提供一种如第三方面所述的功能胶原材料的制备方法，所述功能胶原材料的制备方法包括以下步骤：
[0024]将胶原材料浸润于含有所述促进上皮细胞粘附的多肽的溶液中，静置孵育，得到所述功能胶原材料。
[0025]优选地，所述胶原材料在浸润前需要采用PBS缓冲液清洗1
‑
10次，例如可以是1次、2次、3次、4次、5次、6次、7次、8次、9次、10次等。
[0026]优选地，所述浸润的温度为30
‑
40℃，例如可以是30℃、32℃、34℃、36℃、37℃、40℃等。
[0027]优选地，所述溶液中促进上皮细胞粘附的多肽与胶原材料的用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促进上皮细胞粘附的多肽，其特征在于，所述促进上皮细胞粘附的多肽包括顺次连接的胶原材料结合单元、连接单元和上皮细胞结合单元。2.根据权利要求1所述的促进上皮细胞粘附的多肽，其特征在于，所述胶原材料结合单元的氨基酸序列选自TKKTLRT、WYRGRL、WREPSFCALS、KLWVLPK或LRELHLNNN中的任意一种，优选为TKKTLRT。3.根据权利要求1或2所述的促进上皮细胞粘附的多肽，其特征在于，所述连接单元的氨基酸序列选自GSAGA、GSAGSAAGSGG或GGGGS中的任意一种，优选为GSAGA。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的促进上皮细胞粘附的多肽，其特征在于，所述上皮细胞结合单元的氨基酸序列选自KHPAGGHPVIWS、SNFYMPL、STGLPAGGVITIGAGA或VAPGGHPVLL中的任意一种，优选为KHPAGGHPVIWS和/或SNFYMPL。5.一种根据权利要求1
‑
4中任一项所述的促进上皮细胞粘附的多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：通过固相合成，在所述连接单元的两侧分别组装胶原材料结合单元和上皮细胞结合单元，得到所述促进上皮细胞粘附的多肽。6.一种功能胶原材料，其特征在于，所述功能胶原材料包括胶原材料和如权利要求1
‑
4中任一项所述促进上皮细胞粘附的多肽；其中，所述促进上皮细胞粘附的多肽中的胶原材料结合单元与所述胶原材料相识别连接。7.根据权利要求6所述的功能胶原材料，其特征在于，所述胶原材料为胶原膜；...

【专利技术属性】
技术研发人员：董群，戴斌，
申请(专利权)人：吾奇生物医疗科技江苏有限公司，
类型：发明
国别省市：