一种促进RISI愈合的miR181A@EM-Hb-IFI6材料及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种促进RISI愈合的miR181A@EM

【技术实现步骤摘要】
一种促进RISI愈合的miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及创面修复材料
，具体涉及一种促进RISI愈合的 miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]放射治疗已成为恶性肿瘤的三大治疗手段之一，很多地区的恶性肿瘤患者接受放射治疗，显示了放射肿瘤学在肿瘤治疗中的重要作用和地位。放射性皮肤损伤(RISI)是放射治疗的主要不良反应和剂量限制因素，目前尚无有效的治疗方法。然而，皮肤辐射反应是常见的不良反应，限制了放疗剂量和治疗效果。在接受放射治疗的癌症患者中，高达95％的患者出现皮肤反应，近10％的患者出现严重皮损，放射性皮肤损伤(RISI)的确切机制尚不清楚，缺乏规范和统一的RISI防治。
[0003]α
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干扰素诱导蛋白6(IFI6)是一类Ⅰ型干扰素刺激基因，调节细胞凋亡和免疫应答。 CTD
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3252C9。可通过结合IRF1和抑制IFI6的转录，促进细胞凋亡和抑制细胞生长，成为胰腺癌潜在的治疗靶点。IFI6诱导登革热和乙型肝炎病毒感染，减少血管内皮细胞和乙型肝炎病毒特异性CD8+T细胞凋亡，发挥抗病毒功能。激活转录因子3(ATF3)下调其新靶点IFI6和IFI27，抑制舌鳞癌细胞的生长和迁移。IFI6在角质形成细胞中的过度表达减少了其自发凋亡，解释了皮肤银屑病的发生和发展。这些研究证实了IFI6在不同条件下的诱导表达及其抗凋亡功能。然而，正如其他报道的那样，IFI6也可以被激活并导致凋亡。最新的发现表明，Affymetrix人HTA2.0微阵列可以确定miRNA表达谱。miRNA表达谱显示13个基因下调，50个基因上调，IFI6上调。IFI6的过度表达促进细胞增殖，减少细胞凋亡和活性氧(ROS)的产生；相反，这种过度表达增加了HaCaT和人皮肤成纤维细胞 (WS1)的放射敏感性。
[0004]近年来的研究表明，非编码RNA在调节肿瘤的发生和发展中起着重要的作用。 miR181A
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5p通过与CCAT结合，在体内抑制结肠癌肿瘤生长，促进细胞凋亡。因此， miR181A是一种肿瘤抑制因子。ANRIL表达miR181A并促进喉癌增殖和上皮间质转化。研究表明缺氧可延缓RISI的愈合。大量的研究致力于创造半合成或全合成的人工氧(O2) 载体。仿生纳米药物缓释系统是药物缓释系统的研究热点之一。该体系以其良好的生物相容性和低免疫原性，解决了传统纳米药物代谢快、半衰期短的问题。常用的细胞膜仿生纳米载体包括EM、干细胞膜和肿瘤细胞膜。血红蛋白纳米颗粒含有疏水结构域和许多药物结合位点。该材料具有生物相容性好、免疫原性低、易代谢等优点，易于制备，具有良好的载药能力。它已广泛应用于各种药物的递送。红细胞的胞内区域具有能与血红蛋白结合的位点，为EM实现血红蛋白纳米颗粒的定向包裹提供了思路。Hb是特异性靶向TAMs 的合适载体。作为红细胞的携氧成分，Hb通过原位释放O2来缓解肿瘤组织中的缺氧。因此针对放射性皮肤损伤的愈合，需要一种含有红细胞膜的创面修复材料，对HaCaT细胞无毒性，能促进其迁移、血管化、抑制凋亡使其具有体内外协同抗辐射能力；促进创面愈合，减少活性氧的表达，通过启动SSBP1/HSF1信号通路促进RISI愈合，还可改善免疫微环境。

技术实现思路

[0005]针对上述现有技术，本专利技术的目的是提供一种促进RISI愈合的 miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料及其制备方法和应用。本专利技术首次将miR
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181a用于创面愈合材料，制备得到的miR181A@EM
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Hb
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IFI6可促进创面愈合，减少活性氧的表达，通过启动SSBP1/HSF1信号通路促进RISI愈合，还可改善免疫微环境。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0007]本专利技术的第一方面，提供miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料的制备方法，包括以下步骤：
[0008](1)将DSPE
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PEG
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NHS溶于PBS溶液中，加入miR 181a
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NH2，室温培养过夜；然后进行透析得到DSPE
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PEG
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miR
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181a；
[0009](2)将含有血红蛋白(Hb)的红细胞膜(EM)、IF16与步骤(1)得到的 DSPE
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PEG
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miR
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181a混合，超声处理后过滤，再经过透析得到miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料。
[0010]优选的，步骤(1)，所述PBS溶液为pH＝8的无菌PBS溶液，所述PBS溶液的浓度为0.01M；DSPE
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PEG
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NHS溶于PBS溶液后，浓度为0.2M。
[0011]优选的，步骤(1)，所述DSPE
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PEG
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NHS与miR 181a
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NH2的质量比为1：1。
[0012]优选的，步骤(1)，透析所用膜为孔径50nm的聚碳酸酯膜，透析时间为6小时/次，透析2次。
[0013]优选的，步骤(2)，所述含有血红蛋白的红细胞膜、IF16与DSPE
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PEG
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miR
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181a 的质量比为1：1：1。
[0014]优选的，步骤(2)，所述超声的功率为200W、频率为28KHz，超声的温度为25℃，超声的时间为1h。
[0015]优选的，步骤(2)，所述过滤为过滤膜为200nm的脂质体挤出机。
[0016]优选的，步骤(2)，所述透析为使用孔径50nm的聚碳酸酯膜进行透析。
[0017]本专利技术的第二方面，提供上述制备方法制备得到的miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料。
[0018]本专利技术的第三方面，提供miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料在促进RISI愈合中的应用。
[0019]本专利技术的有益效果：
[0020](1)本专利技术通过设计将红细胞膜(EM)和血红蛋白(HB)修饰IFI6和miR181a结合在一起得到一种促进RISI愈合的材料，以血红蛋白/IFI6蛋白包被红细胞膜和miR181a外膜的纳米仿生给药系统，增强局部循环和生物相容性，发挥长期稳定的作用。
[0021](2)本专利技术在通过细胞学研究表明，miR181a@em
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hb
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ifi6对HaCaT细胞无毒性，能促进其迁移、血管本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将DSPE
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PEG
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NHS溶于PBS溶液中，加入miR 181a
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NH2，室温培养过夜；然后进行透析得到DSPE
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PEG
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miR
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181a；(2)将含有血红蛋白的红细胞膜、IF16与步骤(1)得到的DSPE
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PEG
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miR
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181a混合，超声处理后过滤，再经过透析得到miR181A@EM
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Hb
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IFI6材料。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)，所述PBS溶液为pH＝8的无菌PBS溶液，所述PBS溶液的浓度为0.01M；；DSPE
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PEG
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NHS溶于PBS溶液后，浓度为0.2M。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)，所述DSPE
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PEG

【专利技术属性】
技术研发人员：周代君，曾珺，段丽萍，杨波，曾晓玲，
申请(专利权)人：中国人民解放军西部战区总医院，
类型：发明
国别省市：