【技术实现步骤摘要】
一种大叶金腰SSR分子标记引物组合及应用
[0001]本专利技术属于植物生物
,具体涉及大叶金腰叶绿体基因组SSR分子标记开发及应用。
技术介绍
[0002]金腰属Chrysosplenium L.是虎耳草科多年生小草本,全属约70种,该属植物药效显著,长期以来被用于治疗各类疾病。其中大叶金腰(Chrysosplenium macrophyllun Oliv.)(虎皮草;马耳朵草;龙香草)为中国特有种,分布于湖北、湖南、江西、贵州、安徽、浙江、四川、云南、广东、广西、陕西、福建省,重庆市等。它是民间常用的中草药,具有清热解毒,生肌收敛作用,全株入药,味苦、涩、性寒,可用于治疗小儿惊风、肺和耳部疾病等。
[0003]SSR(simple sequence repeat,简单重复序列)由1~6个核苷酸组成的串联重复单元组成,广泛存在于真核生物的核基因组、叶绿体和线粒体基因组。因其具有数量丰富、多态性高、共显性、重复性好、操作简单等特点,已被广泛应用于种质资源与品种鉴定和遗传多样性分析。叶绿体基因组为单性遗传、几乎不 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种大叶金腰SSR分子标记引物组合,其特征在于:所述SSR分子标记包括cpSSR2、cpSSR5、cpSSR11、cpSSR12、cpSSR23五组,其核苷酸序列如SEQ ID NO.11~15所示;所述引物组合包括:扩增分子标记cpSSR2的引物,正向及反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示;扩增分子标记cpSSR5的引物,正向及反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3~4所示;扩增分子标记cpSSR11的引物,正向及反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5~6所示;扩增分子标记cpSSR12的引物,正向及反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7~8所示;扩增分子标记cpSSR23的引物,正向及反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.9~10所示。2.权利要求1中所述大叶金腰SSR分子标记引物组合在大叶金腰种群遗传多样性分析中的应用。3.根据权利要求2所述的大叶金腰SSR分子标记引物组合在大叶金腰种群遗传多样性分析中的应用,其特征在于:具体步骤如下:(1)基因组DNA提取:采用改良CTAB法提取大叶金腰高质量总基因组DNA,DNA质量和浓度采用紫外分光光度核酸测定仪测定,并用1%的琼脂糖凝胶电泳检测确认;(2)PCR反应体系:对应配制五组,每一组反应体系总体积为10μL,包含2
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T5 Super PCR Mix(PAGE)5μL、10μmol
·
L
‑1正反向引物各0.4μL,总基因组DNA 1μL,ddH2O 3.2μL;PCR反应程序为:98℃预变性2min;98℃变性10s,58℃退火10s,72℃延伸10s,共35个循环;72℃总延伸2min后4℃保存;(3)电泳检测:采用4%聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增产物进行分离,电泳缓冲液为1
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【专利技术属性】
技术研发人员:刘娇,刘虹,覃瑞,向妮艳,赛米热,
申请(专利权)人:中南民族大学,
类型:发明
国别省市:
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