鱼变态反应的抗原制造技术

本发明专利技术提供鱼变态反应的新型抗原、鱼变态反应的诊断方法和诊断试剂盒、包含该抗原的药物组合物、去除了该抗原的鱼、鱼卵、该鱼或该鱼卵加工品、或者产生该鱼卵或由该鱼卵孵化的鱼、以及用于判定对象物中有无鱼抗原的检测仪。仪。

【技术实现步骤摘要】
鱼变态反应的抗原
[0001]本申请是申请日为2017年4月28日，申请号为201780037718.X、专利技术名称为“鱼变态反应的抗原”的申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及鱼变态反应的新型抗原。本专利技术还涉及鱼变态反应的诊断试剂盒、诊断用组合物以及诊断方法。本专利技术还涉及包含该抗原的药物组合物、以及去除或降低了该抗原的鱼、鱼卵、该鱼或该鱼卵加工品、或者产生该鱼卵或由该鱼卵孵化的鱼。本专利技术进而还涉及用于判断对象物中有无鱼抗原的检测仪。

技术介绍

[0003]变态反应患者的血液和组织中产生了特定抗原特异的IgE抗体。通过该IgE抗体与特定抗原的相互作用产生的生理学结果，引起了变态反应。
[0004]现有的变态反应检测试剂中，大多是简单地将变应原候补食品/食材等磨碎而制成抗原试剂(专利文献1)。因此，试剂中包含有无数蛋白质，各种蛋白质的含量非常少。因此，现有的抗原试剂中所包含的多数蛋白质中，对于与IgE抗体的结合，只有在超过可判定阳性反应阈值的含量的蛋白质为引起该变态反应的特定的抗原蛋白质(变应原成分)时，才能在变态反应检查中检测出阳性反应。相反地，对于食品/食材等变应原中含量少的变应原成分与IgE抗体结合的患者，即便使用现有的变态反应检测试剂也不能判定阳性反应，是诊断效率还不能说是充分高的状态。
[0005]另外，变态反应的症状、严重程度也不一定与变应原成分的含量有关。即便在变应原候补食品/食材中微量含有的变应原成分与患者的IgE抗体反应时，也有变态反应症状出现、与严重程度相关的情况。
[0006]也尝试了通过对构成食品/食材的一个一个蛋白质调查IgE抗体，由此在诊断中能够将直接的致敏与基于常见变应原等的交叉抗原性的致敏相区别来提高诊断效率。关于鱼变应原，现在已知有以下表中所示的物质(非专利文献1)。
[0007][表1][0008][0009]然而，为了提高变态反应检查的可靠度，在变应原候補食品/食材中，需要对变应原成分全面地进行鉴定，结果通过上述变应原成分测定的患者检测率还不充分。鉴定鱼的新型变应原不仅需要提高诊断试剂的精度，作为低变应原食品、低变应原食材、治疗药的靶标也是非常重要的。
[0010]另一方面，关于蛋白质的分离/纯化，以往对于从细胞提取物等中分离/纯化蛋白质、核酸的方法进行了各种研究。可以说利用盐浓度的透析、离心分离等是其中的一例。
[0011]另外，还研究了很多利用了蛋白质或核酸残基所具有的电荷、分子量的差异的纯化方法。作为利用了电荷的纯化方法，可例示出使用了离子交换树脂的柱色谱、等电点电
泳。作为利用分子量差异的纯化方法，可例示出利用离心分离、分子量筛选的柱色谱、SDS
‑
PAGE(十二烷基硫酸钠
‑
聚丙烯酰胺凝胶电泳)。
[0012]近年来、作为从少量样品中对多种蛋白质进行分离纯化的方法，使用了第一维进行等电点电泳、第二维进行SDS
‑
PAGE的二维电泳法。申请人等到目前为止，开发出了分离能力高的二维电泳法(专利文献2～5)。
[0013]现有技术文献
[0014]专利文献
[0015]专利文献1：日本特开2002
‑
286716
[0016]专利文献2：日本特开2011
‑
33544
[0017]专利文献3：日本特开2011
‑
33546
[0018]专利文献4：日本特开2011
‑
33547
[0019]专利文献5：日本特开2011
‑
33548
[0020]非专利文献
[0021]非专利文献1：Allergen Nomenclature,WHO/IUIS Allergen Nomenclature Sub
‑
Committee,[平成28年6月9日检索]，网址＜URL:http://www.allergen.org/search.php？allergenname＝&allergensource＝&TaxSource＝Animalia+Chordata&TaxOrder＝&foodallerg＝1&bioname＝＞

技术实现思路

[0022]专利技术要解决的问题
[0023]本专利技术提供鱼变态反应的新型抗原。本专利技术还提供鱼变态反应的诊断方法和诊断试剂盒。本专利技术还提供包含该抗原的药物组合物、以及去除或降低了该抗原的鱼、鱼卵、该鱼或该鱼卵加工品、或者产生该鱼卵或由该鱼卵孵化的鱼。本专利技术进一步提供用于判断对象物中有无鱼抗原的检测仪。
[0024]用于解决问题的方案
[0025]本专利技术人等为了解决上述问题，对于鱼变态反应的原因的抗原鉴定进行了深入研究。结果成功地鉴定出患有鱼变态反应的患者血清中IgE抗体所特异地结合的新型的抗原。基于该见解完成了本专利技术
[0026]即，一实施方式中，本专利技术如下。
[0027][1]一种鱼变态反应的诊断试剂盒，其包含以下(1)～(9)的蛋白质中的至少一种作为抗原：
[0028](1)(1A)α
‑
辅肌动蛋白
‑
3(Alpha
‑
actinin
‑
3)或其突变体，其是作为鱼变态反应的抗原的、以下(1A
‑
a)～(1A
‑
e)中的任一蛋白质：
[0029](1A
‑
a)含有在序列号2中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质；
[0030](1A
‑
b)含有与序列号2所示的氨基酸序列的同一性为70％以上的氨基酸序列的蛋白质；
[0031](1A
‑
c)含有由在序列号1中缺失、置换、插入或附加有1个或多个核苷酸的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质；
[0032](1A
‑
d)含有由与序列号1所示的碱基序列的同一性为70％以上的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质；或
[0033](1A
‑
e)含有由下述核酸编码的氨基酸序列的蛋白质，所述核酸和由与序列号1所示的碱基序列互补的碱基序列构成的核酸在严格的条件下杂交；或者
[0034](1B)含有序列号2或3的氨基酸序列的蛋白质；
[0035](2)(2A)EEF1A2结合蛋白样(EEF1A2 binding protein
‑
like)或其突变体，其是作为鱼变态反应的抗原的、以下(2A
‑
a)～(2A
‑
e)中的任一蛋白质：
[0036](2A
‑
a)含有在序列号5中缺失、置换、插入或附加有1个或多个氨基酸的氨基酸序列的蛋白质；
[0037](2A
‑
b)含本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗原在制造鱼变态反应的诊断试剂盒中的应用，所述试剂盒包含以下(2)、(7)、(10)和(12)的蛋白质中的至少一种作为抗原：(2)(2A)EEF1A2结合蛋白样(EEF1A2 binding protein
‑
like)或其突变体，其是作为鱼变态反应的抗原的、以下(2A
‑
a)～(2A
‑
b)中的任一蛋白质：(2A
‑
a)序列号5所示的氨基酸序列的蛋白质；(2A
‑
b)由序列号4所示的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质；或者(2B)选自由序列号5～8组成的组中的氨基酸序列的蛋白质；(7)(7A)肌球蛋白结合蛋白H
‑
样(Myosin binding protein H
‑
like)或其突变体，其是作为鱼变态反应的抗原的、以下(7A
‑
a)～(7A
‑
b)中的任一蛋白质：(7A
‑
a)序列号43所示的氨基酸序列的蛋白质；(7A
‑
b)由序列号42所示的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质；或者(7B)选自由序列号43～54组成的组中的氨基酸序列的蛋白质；(10)(10A)肌球蛋白重链快缩型骨骼肌样(myosin heavy chain,fast skeletal muscle
‑
like)或其突变体，其是作为鱼变态反应的抗原的、以下(10A
‑
a)～(10A
‑
b)中的任一蛋白质：(10A
‑
a)序列号70所示的的氨基酸序列的蛋白质；(10A
‑
b)由序列号69所示的碱基序列编码的氨基酸序列的蛋白质；或者(10B)选自由序列号70～108组成的组中的氨基酸序列的蛋白质；(12)(12A)肌球蛋白结合蛋白C快缩型样(myosin
‑
binding prote...

【专利技术属性】
技术研发人员：松永佳世子，矢上晶子，下條尚志，
申请(专利权)人：朋友股份有限公司，
类型：发明
国别省市：