一种亮菌菌丝体多糖及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种亮菌菌丝体多糖及其用途，其中亮菌菌丝体多糖的单糖组成及摩尔比构成为甘露糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:阿拉伯糖＝9.83:14.52:17.45:8.63；所述亮菌菌丝体多糖的分子量为2.95

【技术实现步骤摘要】
一种亮菌菌丝体多糖及其用途


[0001]本专利技术属于生物医药制备
，具体涉及一种亮菌菌丝体多糖及其用途。

技术介绍

[0002]口腔溃疡在口腔黏膜疾病中发病率最高且存在很多诱因，例如，精神压力大、免疫失调、内分泌紊乱、营养素缺乏、创伤、口腔菌群失调等多种诱因。其虽具有一定自愈性，但是一旦发病，患处灼痛难忍，严重者可影响进食、言语，此病难以根治具有反复性，给人们工作和生活带来极大不便。而对口腔溃疡的治疗主要是对症治疗，通过抑制免疫功能，减轻局部的炎性反应，调节机体免疫力、使用抗生素及抗菌药物等，但抗菌药和抗生素的反复使用易造成机体产生耐药性及其他副反应。或是应用局部药物，比如含片、药膜、软膏等达到减轻疼痛目的，但其活性成分物质基础和功效关系亟待明确；且药膜、软膏等具有刺激性气味的药物成分入口后进入机体会产生作呕、反酸等一定副作用。近年来高效且无副反应的天然生物活性物质引起人们关注。研究证明，白芨和芦荟多糖等天然活性多糖具有治疗口腔溃疡的作用。
[0003]亮菌Armillariellatabescens(Scop.EX.Fr)Sing，作为我国特有的一种珍贵药用真菌，其含有亮菌甲素和乙素等天然的活性成分，已被广泛用于治疗急慢性肝炎、阑尾炎、中耳炎和胆囊炎。多糖作为亮菌生长过程中产生的重要天然活性物质，具有免疫调节、抗菌、降糖降脂和改善肠道微生态失调等药理作用，而其治疗口腔溃疡的作用鲜有文献报道。申请人通过评估口腔黏膜组织炎症因子水平、表皮生长因子释放量及口腔菌群多态性调节等指标证明亮菌多糖PAT
>‑
W具有显著治疗口腔溃疡的作用。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在提供一种亮菌菌丝体多糖及其用途。本专利技术利用聚酰胺法脱去水提物中蛋白质和色素等杂质、超滤膜分离方法和AKTADEAE
‑
FF离子色谱技术制备得到具有特定化学组成的亮菌活性多糖PAT
‑
W，其对口腔溃疡疗效显著。本专利技术亮菌菌丝体多糖，可广泛应用在医药和日化行业，例如口腔溃疡喷雾剂和含有亮菌多糖的护理牙膏的研发，具有重要的开发前景和市场应用价值。
[0005]本专利技术亮菌菌丝体多糖，其单糖组成及摩尔比为甘露糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:阿拉伯糖＝9.83:14.52:17.45:8.63，分子量为2.95
×
104Da。
[0006]本专利技术亮菌菌丝体多糖的制备方法，包括如下步骤：
[0007]步骤1：将4
‑
6g亮菌Armillariellatabescens(Scop.EX.Fr)Sing菌种(合肥诚志生物制药有限公司提供)接种于1000mL葡萄糖
‑
土豆
‑
MgSO4培养基中，28℃静置培养15天，制得人工液体静置发酵亮菌菌丝体；
[0008]步骤2：将步骤1获得的亮菌菌丝体(2000g)粉碎，按照液料比1g:10mL的比例加入蒸馏水，然后90℃浸提3h，重复浸提3次，合并提取液；
[0009]步骤3：将步骤2所得提取液浓缩至原体积的1/250，加入4倍体积的95％乙醇，4℃
静置12h，4500rpm离心10
‑
15min，收集沉淀物；
[0010]步骤4：将步骤3得到的沉淀物加蒸馏水溶解，采用聚酰胺法脱色脱蛋白获得亮菌菌丝体粗多糖；
[0011]步骤5：将步骤4得到粗多糖配制成100mg/mL溶液，过超滤膜截留分子量为1
×
104Da和1
×
105Da进行分级，将在此之间分子量组分的截留液浓缩、冻干；取超滤冻干后的多糖配制成100mg/mL5mL的多糖溶液过DEAE
‑
FF阴离子交换色谱柱，用双蒸水洗脱和0.5moL/mL的氯化钠等度洗脱，流速为1mL/min，分管收集后，透析除去氯化钠，然后冻干。采用双蒸水为流动相，安捷伦HPLC
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ELSD液相色谱检测洗脱液组分为均一组分(PAT
‑
W)。
[0012]步骤1中，所述葡萄糖
‑
土豆
‑
MgSO4培养基是通过如下方法获得：300g土豆去皮切碎，煮沸15min后过滤，然后与20g葡萄糖和5gMgSO4混合，加水至1000mL，121℃灭菌20min，制得葡萄糖
‑
土豆
‑
MgSO4培养基；
[0013]步骤4中，聚酰胺法脱色脱蛋白的条件为：80g的100
‑
120目聚酰胺和300mL的沉淀物溶液在500mL摇瓶中混匀，室温条件下，摇床200rpm振摇30min，使其充分吸附蛋白质和色素，然后过滤液体，收集滤液、浓缩，冻干为粗多糖。
[0014]本专利技术亮菌菌丝体多糖能够显著降低炎症因子水平、提高表皮生长因子含量、降低炎性细胞浸润和调节口腔菌群的丰富度和均匀度，因此能够用于治疗口腔溃疡。
[0015]本专利技术亮菌菌丝体多糖无味，白色粉末状，水溶液为无色透明。多糖溶液弥补了其他药膜、软膏等具有刺激性气味的药物入口后进入机体产生作呕、反酸等不足。
[0016]本专利技术亮菌菌丝体多糖的用途，是用于制备具有治疗口腔溃疡作用的药物制剂。本专利技术亮菌菌丝体多糖具有显著缓解口腔黏膜溃疡面炎症损伤、提高表皮生长因子释放以促进口腔黏膜溃疡面愈合、调节口腔菌群失调等功效。
[0017]本专利技术以机械创伤和金黄色葡萄球菌联合诱导的口腔溃疡大鼠为研究对象，通过动物实验证明亮菌菌丝体多糖治疗口腔溃疡的作用。
[0018]本专利技术亮菌菌丝体多糖对口腔溃疡大鼠的口腔菌群失调具有显著的改善作用。
附图说明
[0019]图1是标准单糖组成液相色谱图(*
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溶剂峰，Man
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甘露糖，Rha
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鼠李糖，GlcA
‑
葡萄糖醛酸，GalA
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半乳糖醛酸，Glc
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葡萄糖，Gal
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半乳糖，Ara
‑
阿拉伯糖，Fuc
‑
半乳糖)。
[0020]图2是亮菌菌丝体多糖单糖组成液相色谱图(Man
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甘露糖，GalA
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半乳糖醛酸，Glc
‑
葡萄糖，Ara
‑
阿拉伯糖)。
[0021]图3是亮菌菌丝体多糖PAT
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W相对分子质量检测色谱图。
[0022]图4是亮菌菌丝体多糖对口腔溃疡大鼠黏膜组织病理的影响
[0023]图5是亮菌菌丝体多糖对口腔溃疡大鼠口腔菌群α多样性的影响
[0024]图6是亮菌菌丝体多糖对口腔溃疡大鼠口腔菌群β多样性的影响。
具体实施方式
[0025]以下通过具体的实施例描述本专利技术的制备，降低溃疡组织炎症因子，促进表皮生长因子的释放和伤口的愈合，调节口腔菌群的多态性，所举实施例只用于解释本专利技术，并非用于限定本发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种亮菌菌丝体多糖，其特征在于：所述亮菌菌丝体多糖的单糖组成及摩尔比构成为甘露糖:半乳糖醛酸:葡萄糖:阿拉伯糖＝9.83:14.52:17.45:8.63；所述亮菌菌丝体多糖的分子量为2.95
×
104Da。2.一种权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈彦，张坤峰，王长丹，李琳莉，卜伟，
申请(专利权)人：合肥诚志生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：