DDUP作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术和医学领域，公开了DDUP作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用。该DDUP可以调控DNA损伤和/或DNA损伤修复，与肿瘤患者的铂类药物抵抗性、复发、总体生存时间、无病生存时间显著相关，可作为肿瘤耐药、肿瘤预后、肿瘤复发检测的标志物。药、肿瘤预后、肿瘤复发检测的标志物。

【技术实现步骤摘要】
DDUP作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用


[0001]本专利技术属于生物技术和医学领域，具体涉及DDUP作为肿瘤耐药检测、治疗及预后分子靶点的应用。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤严重威胁人类的生命健康，1943年，科学家首次将氮芥应用于淋巴瘤的治疗，揭开了现代肿瘤化疗的序幕。随后新的抗肿瘤药物不断出现，化疗成为肿瘤主要的治疗方法之一，但是如同细菌易对抗生素产生耐药性一样，肿瘤细胞也常对化疗药物产生耐药性，这是导致化学治疗失败的主要原因之一。因此肿瘤耐药是恶性肿瘤治疗急需解决的关键问题之一。以三大女性生殖系统恶性肿瘤之一的卵巢癌为例，因其恶性程度高、复发率高、治疗难度大，已严重威胁世界女性健康。由于早期缺乏特异性临床症状，且尚无有效的早期筛查、诊断方法，导致卵巢癌难以筛查，70％以上患者诊断时已处于卵巢癌晚期。目前，卵巢癌细胞减灭术后的标准治疗方案是以铂类药物为基础的化疗方案，卵巢癌在初始治疗后大部分患者都能够获得临床缓解，但70％患者在初始治疗后会出现复发，5年生存率仅39％。其中一个根本的原因是铂耐药，导致治疗过程中癌细胞对铂的反应性逐渐降低，最终导致治疗失败。因此，研究卵巢癌铂耐药的具体机制，寻找克服铂耐药的关键因素，对于提高卵巢癌治疗效果显得尤为重要。
[0003]肿瘤耐药的形成是多基因、多因素共同相互参与调节的生物学过程，其形成机制复杂，目前仍未研究透彻。铂类药物作用的主要靶点为DNA，通过与DNA形成单加合物或链内交联形成铂
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DNA加合物，从而抑制DNA复制及转录，导致DNA断裂和错误编码，引起的这种DNA损伤可以通过激活多种信号传导途径而激活细胞凋亡途径，最终导致细胞死亡。当信号传导途径被异常激活或抑制，铂的流出增加或吸收减少导致细胞内铂积累减少，DNA损伤修复通路异常激活等，导致细胞对铂类药物的抵抗、凋亡抑制，促使肿瘤铂化疗耐药的产生。
[0004]为了保护DNA免受内源性或外源性的有毒物质诱导的损伤，哺乳动物细胞进化出一个复杂的信号通路和修复网络以移除或耐受DNA损伤，包括DNA损伤反应(DNA damage response，简称DDR)通路和DNA修复蛋白。铂类化疗药物通过共价结合DNA的N7位点鸟嘌呤，与DNA形成加合物继发诱导DNA双链断裂。铂类药物治疗后，癌细胞进行DNA损伤修复或凋亡决定了其是存活还是死亡。DDR在维持基因组完整性方面以及耐药性的产生起着关键作用。研究发现基因组不稳定性是癌症的标志，并且DDR缺陷导致肿瘤的风险增加。DNA修复途径主要包括：核苷酸切除修复(NER)、错配修复(MMR)、碱基切除修复(BER)、非同源重组修复(NHEJ)、同源重组修复(HR)、复制后修复(PRR)等。不同的修复途径之间相互作用及协调导致DNA损伤修复和细胞存活，这些途径的改变(异常激活或沉默)有助于形成对铂类药物的敏感性或者抗性。由于不能正确地检测、修复、或对DNA损伤做出正确的反应，导致了化疗耐药表型的产生。因此，进一步深入探究肿瘤细胞化疗耐药机制，为肿瘤的治疗提供更有效的作用靶点成为亟待解决的问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术第一方面的目的，在于提供一种DDUP。
[0006]本专利技术第二方面的目的，在于提供与本专利技术第一方面的DDUP相关的生物材料。
[0007]本专利技术第三方面的目的，在于提供本专利技术第一方面的DDUP和/或第二方面的生物材料的应用。
[0008]本专利技术第四方面的目的，在于提供检测DDUP的物质在制备肿瘤耐药检测产品、肿瘤预后检测产品或预测肿瘤复发检测中的应用。
[0009]本专利技术第五方面的目的，在于提供ATR抑制剂在制备DDUP抑制剂中的应用。
[0010]本专利技术第六方面的目的，在于提供DDUP抑制剂在制备提高肿瘤对铂类药物敏感性的产品中的应用。
[0011]本专利技术第七方面的目的，在于提供一种药物。
[0012]本专利技术第八方面的目的，在于提供一种试剂盒。
[0013]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0014]本专利技术的第一个方面，提供一种DDUP，所述DDUP的氨基酸序列包含：
[0015]a)MWLVECTGRDLTGLSCLLSMDRQPRRRQHVAGCRDVPPPLPQGSWGQTSPRHSILCSKSGCDLLGGGEYNGETSGEEFLAPAWTCRAQQAATWLSVQQTSHKALGPAGGAAMSSKLSPEEQFLSRIHFLRTFMCSVAGAELPGIPQATENGEGCRPARDPASSPSSLSMASVYTQCSSAQLVSALS(SEQ ID NO.2)；或
[0016]b)与SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列具有95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的序列。
[0017]本专利技术的第二个方面，提供与本专利技术第一方面的DDUP相关的生物材料，所述生物材料包含a1)～a4)中的任一种：
[0018]a1)编码本专利技术第一方面的DDUP的核酸分子；
[0019]a2)含有a1)所述核酸分子的表达盒；
[0020]a3)含有a1)所述核酸分子的载体；
[0021]a4)含有a1)所述核酸分子的细胞系。
[0022]优选地，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0023]优选地，所述细胞系不包含繁殖材料。
[0024]本专利技术的第三个方面，提供第一方面的DDUP和/或第二方面的生物材料在调控DNA损伤和/或DNA损伤修复中的应用。
[0025]优选地，所述应用为体外非治疗目的。
[0026]本专利技术的第四个方面，提供检测DDUP的物质在制备肿瘤耐药检测产品、肿瘤预后检测产品或预测肿瘤复发检测中的应用。
[0027]优选地，所述检测DDUP的物质包含定量检测DDUP的物质。
[0028]优选地，所述检测DDUP的物质包含在基因水平和/或蛋白质水平上检测DDUP的物质。
[0029]优选地，所述物质包含用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质：免疫组织化学法(如免疫荧光分析、反向酶联免疫吸附、免疫胶体金法)、Western印迹法、Northern印迹法、PCR、生物芯片法。
[0030]优选地，所述免疫组织化学法选自：免疫荧光分析、反向酶联免疫吸附和免疫胶体
金法。
[0031]优选地，所述检测DDUP的物质选自：对DDUP具有特异性的物质，例如其抗体(优选单克隆抗体)；DDUP特异性的探针、基因芯片、PCR引物等。
[0032]优选地，所述检测DDUP的物质选自：DDUP抗体、DDUP特异性的探针、基因芯片、PCR引物。
[0033]优选地，所述DDUP的氨基酸序列包含：
[0034]a)MWLVECTGRDLTGLSCLLSMDRQPRRRQHVAGCRDVPPPLPQGSWGQTSPRHSILCSKSGCDLLGGGEYNGETSGEE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种DDUP，所述DDUP的氨基酸序列包含：a)MWLVECTGRDLTGLSCLLSMDRQPRRRQHVAGCRDVPPPLPQGSWGQTSPRHSILCSKSGCDLLGGGEYNGETSGEEFLAPAWTCRAQQAATWLSVQQTSHKALGPAGGAAMSSKLSPEEQFLSRIHFLRTFMCSVAGAELPGIPQATENGEGCRPARDPASSPSSLSMASVYTQCSSAQLVSALS(SEQ ID NO.2)；或b)与SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列具有95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的序列。2.与权利要求1所述的DDUP相关的生物材料，所述生物材料包含a1)～a4)中的任一种：a1)编码权利要求1所述的DDUP的核酸分子；a2)含有a1)所述核酸分子的表达盒；a3)含有a1)所述核酸分子的载体；a4)含有a1)所述核酸分子的细胞系。3.检测DDUP的物质在制备肿瘤耐药检测产品、肿瘤预后检测产品或预测肿瘤复发检测中的应用；所述DDUP的氨基酸序列包含：a)MWLVECTGRDLTGLSCLLSMDRQPRRRQHVAGCRDVPPPLPQGSWGQTSPRHSILCSKSGCDLLGGGEYNGETSGEEFLAPAWTCRAQQAATWLSVQQTSHKALGPAGGAAMSSKLSPEEQFLSRIHFLRTFMCSVAGAELPGIPQATENGEGCRPARDPASSPSSLSMASVYTQCSSAQLVSALS(SEQ ID NO.2)；或b)与SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列具有95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的序列。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述肿瘤耐药中的药包含铂类药物。5.DDUP抑制剂在制备提高肿瘤对铂类药物敏感性的产品中的应用；所述DDUP的氨基酸序列包含：a)MWLVECTGRDLTGLSCLLSMDRQPRRRQHVAGCRDVPPPLPQGSWGQTSPRHSILCSKSGCDLLGGGEYNGETSGEEFLAPAWTCRAQQAATWLSVQQTSHKALGPAGGAAMSSKLSPEEQFLSRIHFLRTFMCSVAGAELPGIPQATENGEGCRPARDPASSPSSLSMASVYTQCSSAQLVSALS(SEQ ID NO.2)；或b)与SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列具有95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的序列。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述DDUP抑制剂包含抑制DDUP活性的物质、降解DDUP的物质、降低DDUP表达水平的物质中的至少一种；优选地，所述抑制DDUP活性的物质包含抑制DDUP磷酸化的物质；进一步优选地，所述抑制DDUP活性的物质包含ATR抑制剂；优选地，所述降低DDUP表达水平的物质包含b1)～b3)中至少一种：b1)靶向DDUP的siRNA、dsRNA、miRNA、核酶、gRNA或shRNA；b2)编码b1)的核酸分子；b3)包含b2)的表达盒、载体或转基因细胞系；优选地，所述靶向DDUP的shRNA的序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示；优选地，所述靶向DDUP的gRNA的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李隽，宋立兵，余汝媛，李新城，张淑霞，胡雅梦，
申请(专利权)人：中山大学肿瘤防治中心中山大学附属肿瘤医院，中山大学肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：