一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法技术

本发明专利技术涉及一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，包括：按6

【技术实现步骤摘要】
一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法


[0001]本专利技术涉及阿维菌素的发酵
，具体涉及一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法。

技术介绍

[0002]阿维菌素是阿维链霉菌在含有碳源、氮源、无机盐和微量元素的培养基中通气搅拌、深层发酵产生的一组十六元大环内酯结构的多组分生物杀虫杀螨剂。在其发酵液含有的8种组分中，B1a组分杀虫效果最佳，是商品化阿维菌素的主要组分。业内将B1a的含量作为衡量发酵效价高低的指标。
[0003]通过对阿维链霉菌发酵动力学的研究表明：阿维链霉菌的发酵过程需要经历生长繁殖期、稳定期、产素期和衰老期，属于非生长偶联型。而阿维菌素是阿维链霉菌生长繁殖到一定阶段才会开始合成，这在发酵效价上，则表现为前期发酵效价增长较慢，中后期增长相对较快；具体来说，就是：在阿维菌素发酵效价增长的过程中，发酵培养100h～放罐的这段时间段里，发酵效价增长迅速，增长率达20～25μ
ɡ
/(mL
·
h)，且成线性增长；而在发酵培养100h之前的这段时间段里，发酵效价增长则相对较慢。这就限制了发酵的最终效价，以及发酵时间；因此，研发一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，缩短阿维链霉菌的稳定期，延长了产素期，对于提高阿维菌素的发酵效价显得至关重要。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其能够缩短阿维链霉菌发酵的稳定期，延长其产素期，提高阿维菌素的发酵效价。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0006]一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，包括：
[0007]按6
‑
8％的接种量，向发酵罐A中的发酵培养基A中接种阿维链霉菌种子液A后，进行发酵培养；
[0008]当发酵罐A中，阿维链霉菌发酵培养30
‑
40h，按体积分数1.5
‑
5％，向其中补入发酵罐B中处于产素期的阿维菌素发酵液，然后发酵罐A继续培养至总时间为350
‑
360时，放罐，即可。
[0009]进一步的，优选为按体积分数1.5
‑
2.5％，向发酵罐A中补入处于产素期的阿维菌素发酵液的量。
[0010]进一步的，所述发酵罐A中，阿维链霉菌培养至30
‑
40h时，处于稳定期，菌丝成球良好。
[0011]进一步的，所述处于产素期的阿维菌素发酵液中，阿维菌素B1a的效价为1000～3000μ
ɡ
/mL，菌丝体体积分数40％～50％、糖质量浓度100～150
ɡ
/L、蛋白质15～18
ɡ
/L。
[0012]进一步的，所述处于产素期的阿维菌素发酵液的培养时间为100
‑
200h。
[0013]进一步的，在向发酵罐A中补入发酵罐B中处于产素期的阿维菌素发酵液前，还需：
按6
‑
8％的接种量，向发酵罐B的发酵培养基B中接种阿维链霉菌种子液B，并进行发酵培养；
[0014]更进一步的，在向发酵罐A和发酵罐B中接种阿维链霉菌种子液前，需要分别向2个种子罐的种子培养基中接种阿维链霉菌，然后分别发酵培养50
‑
60h，制备成阿维链霉菌种子液A和阿维链霉菌种子液B。
[0015]更进一步的，2个种子罐中的种子培养基相同，均包括如下浓度的各原料：玉米淀粉25
ɡ
/L、黄豆饼粉6
ɡ
/L、花生饼粉6
ɡ
/L、酵母粉3
ɡ
/L、酵母膏3
ɡ
/L、固体碱0.3
ɡ
/L、消泡剂3
ɡ
/L、氯化钴0.022
ɡ
/L、余量水；灭菌温度120～123℃、灭菌时间30min；
[0016]2个种子罐的发酵条件相同，均为：温度28～29℃、风量0.5～1m3/(m3·
min)。
[0017]更进一步的，发酵培养基A与发酵培养基B相同，均包括如下浓度的各原料：玉米淀粉174
ɡ
/L、黄豆饼粉21
ɡ
/L、酵母粉10
ɡ
/L、轻质碳酸钙1.6
ɡ
/L、玉米浆3
ɡ
/L、固体碱0.3
ɡ
/L、消泡剂4.3
ɡ
/L、淀粉酶：淀粉＝0.00025；灭菌温度121～123℃、灭菌时间30min.、90℃淀粉糖化45min；
[0018]发酵罐A和发酵罐B的发酵条件相同，均为：温度27～28℃、风量0.5～0.7m3/(m3·
min)。
[0019]进一步的，在向发酵罐A中补入发酵罐B中处于产素期的阿维链霉菌发酵液后，还需立即将发酵罐A中的阿维链霉菌发酵液回补于发酵罐B中，发酵罐A向发酵罐B的回补体积等于发酵罐B向发酵罐A的补液体积。
[0020]进一步的，当发酵罐A发酵培养至250h后，按体积分数1
‑
2％，向发酵罐A中补入补料培养基，所述补料培养基为糖液。
[0021]与现有技术相比，本专利技术所取得的有益效果如下：
[0022]1、本专利技术通过在发酵前期补入适量的产素期发酵液，利用产素期发酵液中含有的具有次级代谢能力的菌丝体诱导阿维链霉菌生物合成阿维菌素，使阿维菌素发酵过程中的起始效价增加了0.3～0.5倍，达到300～400μ
ɡ
/m，放罐效价提高了10％～13％，达到7055μ
ɡ
/mL；此外，产素期发酵液中还含有生物合成阿维菌素所需的各种酶和启动因子，有益于缩短稳定期，延长产素期。
[0023]2、本专利技术严格控制产素期发酵液的补入量为小于2.5％，避免因补入量过多导致前期效价增长过快，后期效价增长过慢，从而导致的最终发酵效价不理想的问题。此外，当产素期发酵液的补入量稍大时，本专利技术还通过补入糖液培养基，来解决发酵后期效价增长过慢的问题。
附图说明
[0024]图1为本专利技术实施例1中阿维菌素发酵效价随时间的线性回归图；
[0025]图2为本专利技术实施例2中阿维菌素发酵效价随时间的线性回归图；
[0026]图3为本专利技术实施例3中阿维菌素发酵效价随时间的线性回归图；
[0027]图4为本专利技术对比例1中阿维菌素发酵效价随时间的线性回归图；
[0028]图5为本专利技术对比例2中阿维菌素发酵效价随时间的线性回归图；
具体实施方式
[0029]以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细的叙述。
[0030]实施例1
[0031]一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，包括如下步骤：
[0032]步骤1：制备种子液
[0033]分别向种子罐A的种子培养基和种子罐B的种子培养基中接种阿维链霉菌，然后分别发酵培养50
‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，包括：向发酵罐A中的发酵培养基A中接种阿维链霉菌种子液A后，进行发酵培养；当发酵罐A中，阿维链霉菌发酵培养30
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40h，按体积分数1.5
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5％，向其中补入发酵罐B中处于产素期的阿维菌素发酵液，然后发酵罐A继续培养至总时间为350
‑
360时，放罐，即可。2.根据权利要求1所述的一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，所述发酵罐A中，阿维链霉菌培养至30
‑
40h时，处于稳定期。3.根据权利要求1所述的一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，所述处于产素期的阿维菌素发酵液中，阿维菌素B1a的效价为1000～3000μ
ɡ
/mL，菌丝体体积分数40％～50％、糖质量浓度100～150
ɡ
/L、蛋白质15～18
ɡ
/L。4.根据权利要求1所述的一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，所述处于产素期的阿维菌素发酵液的培养时间为100
‑
200h。5.根据权利要求1所述的一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，在向发酵罐A中补入发酵罐B中处于产素期的阿维菌素发酵液前，还需：向发酵罐B的发酵培养基B中接种阿维链霉菌种子液B，并进行发酵培养。6.根据权利要求5所述的一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，在向发酵罐A和发酵罐B中接种阿维链霉菌种子液前，需要分别向2个种子罐的种子培养基中接种阿维链霉菌，然后分别发酵培养50
‑
60h，制备成阿维链霉菌种子液A和阿维链霉菌种子液B。7.根据权利要求6所述的一种基于诱导效应的阿维菌素发酵方法，其特征在于，2个种子罐中的种子培养基相同，均包括如下浓度的各原料：玉米淀粉25
ɡ

【专利技术属性】
技术研发人员：程曦，刘丽虹，刘进峰，张力，胡志民，闫沛，李泼，
申请(专利权)人：河北兴柏农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：