基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法技术

本发明专利技术公开了一种基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法，包含以下步骤：将待测的角类样品制备成用于气相色谱检测的样品溶液；将样品溶液注入气相色谱仪中进行检测，得到待测样品气相色谱图；将待测样品气相色谱图与羚羊角标准指纹图谱进行对比，当相似度≥0.90，则判定待测样品为羚羊角。本发明专利技术首先确立了羚羊角脂肪酸成分指纹图谱，且给出了样品获得气相色谱图的方法，根据所得的气相色谱图与所确立的羚羊角脂肪酸成分指纹对照图谱中特征峰的有无及大小，通过采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算其相似度，能有效地鉴别羚羊角的真伪，完善了羚羊角的质量评价体系，为羚羊角质量的全面、有效控制提供了理论和实践基础。践基础。践基础。

【技术实现步骤摘要】
基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法


[0001]本专利技术涉及中药材的指纹图谱
，尤其涉及一种基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法。

技术介绍

[0002]羚羊角为牛科动物赛加玲羊Saiga tatarica Linnaeus的角。羚羊角是我国传统的名贵中药，具有平肝息风、清肝明目、散血解毒的功效，临床主要用于高热惊厥，对小儿发热有很好的疗效。近年来，由于赛加羚羊种群数量稀少，已成为濒危动物，被列入国家一级保护动物目录，严禁捕杀，这导致羚羊角药材库存资源进一步紧张和短缺，商品价格高昂，市场上存在不法商家在利益驱动下在失去外观特征的羚羊角类饮片(如羚羊角粉末、磅片等)用价格便宜的其它动物角(如山羊角、黄羊角、水牛角、牦牛角等)充伪的情况。
[0003]目前国内外关于羚羊角真伪鉴定的主要方法是性状观察、显微鉴定及生物鉴别，性状观察、显微鉴定法虽然简单快捷，但对于失去外观特征的角类药材缺乏专属性，鉴定难度较高；生物鉴别(如特异性PCR鉴别)虽然专属性强，但是对实验条件及人员操作技术要求高，全面推广尚存难度。
[0004]中药指纹图谱是近年来迅速发展的一种中药质量控制方法，在中药整体评价方面已得到广泛应用，该技术能够根据多批次样本整体综合信息，建立共有模式，并根据不同算法建立模板，测定相似度，从总体上描述样本特性。相对于用单个或少数成分为指标来控制中药质量的方法，中药指纹图谱通过对所得到的能够体现中药整体特性的图谱识别，提供一种能够比较全面的控制中药质量的方法，较为全面的反映中药的内在质量，保证中药及其制剂的稳定和可靠。
[0005]目前，现有技术中还没有报道羚羊角基于脂肪酸成分分析的指纹图谱及其建立方法，因此，开发出一种能够利用脂肪酸成分对羚羊角真伪进行评价的指纹图谱具有实际应用的意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是提供一种基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种基于脂肪酸(脂肪酸类)成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法，包含以下步骤：
[0008](1)待测品(供试品)的制备：
[0009]将待测的角类样品粉碎后，以氯仿甲醇混合溶液作为提取溶剂进行提取，所得的提取液先蒸发回收溶剂，而后烘干，得到提取的脂肪；
[0010]将提取的脂肪进行甲酯化处理，得到用于气相色谱检测的样品溶液；
[0011](2)气相色谱检测：
[0012]将步骤(1)所得的样品溶液注入气相色谱仪中进行检测，得到待测样品气相色谱
图；
[0013](3)、将待测样品气相色谱图与羚羊角标准指纹图谱(羚羊角的脂肪酸成分指纹图谱，包含19个指纹峰)进行对比，当相似度≥0.90，则判定待测样品为羚羊角。
[0014]作为本专利技术的基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法的改进：羚羊角标准指纹图谱(羚羊角的脂肪酸成分指纹图谱)，包含19个指纹峰，相对保留时间和相对峰面积如下：
[0015]1号峰：相对保留时间范围：0.63，相对峰面积：0.0356；
[0016]2号峰：相对保留时间范围：0.80，相对峰面积：0.0258；
[0017]3号峰：相对保留时间范围：0.96，相对峰面积：0.1160；
[0018]4号峰：相对保留时间范围：0.97，相对峰面积：0.0741；
[0019]5号峰：相对保留时间范围：1.00，相对峰面积：1.0000；
[0020]6号峰：相对保留时间范围：1.33，相对峰面积：0.9139；
[0021]7号峰：相对保留时间范围：1.38，相对峰面积：0.4039；
[0022]8号峰：相对保留时间范围：1.66，相对峰面积：0.0734；
[0023]9号峰：相对保留时间范围：1.70，相对峰面积：0.0423；
[0024]10号峰：相对保留时间范围：1.71，相对峰面积：0.0945；
[0025]11号峰：相对保留时间范围：1.74，相对峰面积：0.0279；
[0026]12号峰：相对保留时间范围：2.06，相对峰面积：0.0575；
[0027]13号峰：相对保留时间范围：2.07，相对峰面积：0.0381；
[0028]14号峰：相对保留时间范围：2.10，相对峰面积：0.0342；
[0029]15号峰：相对保留时间范围：2.38，相对峰面积：0.0437；
[0030]16号峰：相对保留时间范围：2.39，相对峰面积：0.0399；
[0031]17号峰：相对保留时间范围：2.43，相对峰面积：0.0448；
[0032]18号峰：相对保留时间范围：2.67，相对峰面积：0.0469；
[0033]19号峰：相对保留时间范围：2.72，相对峰面积：0.1510。
[0034]作为本专利技术的基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法的进一步改进：步骤(2)的色谱检测条件为：
[0035]色谱柱为HP
‑
5毛细管柱(柱长30m
×
内径320μm
×
膜厚0.25μm，安捷伦科技)；载气：高纯氮(99.999％)；流速：1.0mL/min，恒流模式；进样口：温度250℃，分流比10:1，自动进样器进样，进样量1μL；柱温：程序升温，初始160℃，保持3min，再以10℃/min升温至250℃，保持8min；氢火焰检测器：温度280℃，氢气40mL/min，空气400mL/min，尾吹10mL/min。
[0036]作为本专利技术的基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法的进一步改进：步骤(3)为：
[0037]将待测样品气相色谱图与羚羊角标准指纹图谱(羚羊角的脂肪酸成分指纹图谱，包含19个指纹峰)进行对比，采用相似度软件进行处理，采用多点校正以及Mark峰匹配法，从而确定待测样品图谱与所述的指纹图谱的相似度，当相似度≥0.90，则判定待测样品为羚羊角。
[0038]作为本专利技术的基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法的进一步改进：步骤(1)为：
[0039]将待测的角类样品粉碎(过24目筛)，在容器中，加入样品粉末2g以及60mL氯仿甲醇混合溶液，回流提取1
±
0.1h，过滤，得滤液；
[0040]用氯仿甲醇混合溶液对容器、过滤所用的滤器以及过滤所得的残渣进行洗涤，所得洗涤液与滤液进行合并；蒸发回收溶剂后，于105
±
10℃烘至恒重，得到提取的脂肪；
[0041]将提取的脂肪用10ml氯仿甲醇混合溶液溶解，而后吸取5
‑
10ml先蒸干(80
±
10℃)，而后加入5％(体积％)硫酸甲醇溶液2mL，振荡(使分散均匀)，于60
±
5℃水浴甲酯化60
±
10min，冷却，加入2mL正己烷，振荡后静本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法，其特征在于包含以下步骤：(1)待测品的制备：将待测的角类样品粉碎后，以氯仿甲醇混合溶液作为提取溶剂进行提取，所得的提取液蒸发回收溶剂后烘干，得到提取的脂肪；将提取的脂肪进行甲酯化处理，得到用于气相色谱检测的样品溶液；(2)气相色谱检测：将步骤(1)所得的样品溶液注入气相色谱仪中进行检测，得到待测样品气相色谱图；(3)、将待测样品气相色谱图与羚羊角标准指纹图谱进行对比，当相似度≥0.90，则判定待测样品为羚羊角。2.根据权利要求1所述的基于脂肪酸成分指纹图谱的羚羊角真伪鉴别方法，其特征在于：羚羊角标准指纹图谱，包含19个指纹峰，相对保留时间和相对峰面积如下：1号峰：相对保留时间范围：0.63，相对峰面积：0.0356；2号峰：相对保留时间范围：0.80，相对峰面积：0.0258；3号峰：相对保留时间范围：0.96，相对峰面积：0.1160；4号峰：相对保留时间范围：0.97，相对峰面积：0.0741；5号峰：相对保留时间范围：1.00，相对峰面积：1.0000；6号峰：相对保留时间范围：1.33，相对峰面积：0.9139；7号峰：相对保留时间范围：1.38，相对峰面积：0.4039；8号峰：相对保留时间范围：1.66，相对峰面积：0.0734；9号峰：相对保留时间范围：1.70，相对峰面积：0.0423；10号峰：相对保留时间范围：1.71，相对峰面积：0.0945；11号峰：相对保留时间范围：1.74，相对峰面积：0.0279；12号峰：相对保留时间范围：2.06，相对峰面积：0.0575；13号峰：相对保留时间范围：2.07，相对峰面积：0.0381；14号峰：相对保留时间范围：2.10，相对峰面积：0.0342；15号峰：相对保留时间范围：2.38，相对峰面积：0.0437；16号峰：相对保留时间范围：2.39，相对峰面积：0.0399；17号峰：相对保留时间范围：2.43，相对峰面积：0.0448；18号峰：相对保留时间范围：2...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡晓炜，沈国芳，刘宇文，
申请(专利权)人：杭州市食品药品检验研究院杭州市食品药品审核查验服务中心，杭州市药品与医疗器械不良反应监测中心，
类型：发明
国别省市：