一株贝莱斯芽孢杆菌及其在椰子病害防治中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一株贝莱斯芽孢杆菌X1及其在椰子病害防治中的应用，属于植物病害生物防治技术领域、微生物资源利用与开发领域。所述贝莱斯芽孢杆菌X1菌体发酵液及其发酵液中的活性代谢产物对椰子冠腐病菌(Ceratocystis paradoxa)和叶斑病菌(Curvularia oryzae)均具有显著的抑菌作用；该菌株已于2021年6月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，分类命名为贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis，保藏编号为：CGMCC NO.22539；该菌株具有安全高效、环境友好、不易产生抗药性、防病持效期长等优点，在椰子病害的生物防治方面具有巨大的潜力。具有巨大的潜力。具有巨大的潜力。

【技术实现步骤摘要】
一株贝莱斯芽孢杆菌及其在椰子病害防治中的应用


[0001]本专利技术属于植物病害生物防治
、微生物资源利用与开发领域，特别是涉及一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治椰子病害中的应用。

技术介绍

[0002]椰子(学名：Cocos nuciferaL.)属棕榈科常绿乔木，在我国种植已有2000多年的历史，椰汁及椰肉含大量蛋白质、果糖、维生素、钾、钙、镁等，具有补虚强壮，益气祛风的功效，椰壳可制成各种工艺品、高级活性炭等。椰子是我国热带和亚热带地区重要的园林绿化树种和经济作物，主要分布在海南、广东、广西、云南、福建等地。截止目前，我国椰子种植面积超过60万亩，年产椰果达2.3亿个，年产值超过200亿元，椰子产业成为我国热区极具特色的优势资源和支柱产业之一，有近 80万农民赖以为生，是贫困地区农民脱贫致富的重要经济来源。
[0003]近年来，随着国家对环境保护和绿色农业发展的不断重视，化学农药的施用量和使用范围越发严格，椰子种植管理过程中农药使用种类和范围受到极大限制，同时长期大量使用化学农药使得环境污染和抗药性问题日益突出。椰子冠腐病和叶斑病是椰子生产上的主要病害，受害叶片干枯、凋萎、提早脱落，苗期或幼树期染病植株长势衰弱，严重时导致整株死亡，重病园病株率高达66.8％～80.5％。成龄树受害影响开花、结果，导致减产。
[0004]目前，生产上椰子病害的防治仍然是主要依赖化学农药及配合水肥管理、增强树势和提高树体抗病能力进行预防，防治效果有限，而化学药剂的大量施用则带来了环境污染和抗药性等问题。近年来，生物防治技术在植物病害防治中越来越受到重视，其利用活体及其活性物质研制成生物菌剂防治植物病害，具有选择性强、不易产生抗药性、安全高效、环境友好等突出优势，在植物病害防治中应用前景广阔。
[0005]贝莱斯芽孢杆菌是2005年Ruiz
‑
Garc
í
a等新命名的芽孢杆菌属新种，具有生长快速和稳定的良好特征，在植物病害防控、促进植物生长等方面备受关注，如中国专利CN201811068345.5 公开了一株生防贝莱斯芽孢杆菌及其在防治黄瓜白粉病菌中的应用，中国专利CN201910453041.9公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治根结线虫中的应用，中国专利CN201910891472.3公开了一株贝莱斯芽孢杆菌CY30及在茶轮斑病防治中的应用，中国专利CN201910297167.1公开了一株抑制病毒、促进植物生长的贝莱斯芽孢杆菌及其应用，中国专利CN202011532714.9公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及其在香梨病害防治中的应用，中国专利CN202110159247.8公开了一株贝莱斯芽孢杆菌及其在防治黄瓜细菌性角斑病中的应用。目前，国内外尚无贝莱斯芽孢杆菌用于椰子病害防治的报道。如何解决上述技术问题，是目前微生物
需要解决的技术问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是针对椰子病害防治中存在的技术问题，提供从椰子园土壤中筛选获得的一株对椰子冠腐病菌 (Ceratocystis paradoxa)和叶斑病菌(Curvularia oryzae)
均具有显著抑菌作用的贝莱斯芽孢杆菌，及利用该菌株的发酵液或发酵滤液在椰子病害防治中的应用。
[0007]本专利技术提供一株贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)X1菌株。该菌株已保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2021年6月7日，保藏编号为CGMCC NO.22539。
[0008]本专利技术所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)X1的发酵培养液或发酵培养液的过滤液。
[0009]本专利技术所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)X1为活性成分的微生物菌剂，且在该菌剂中活菌和/或活芽孢的数量≥ 1.5～1.8
×
108个/mL。
[0010]本专利技术所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)X1的发酵培养液或发酵培养液的过滤液在防治椰子病害中的应用，其中，所述的病原菌包括椰子冠腐病菌(Ceratocystis paradoxa) 和叶斑病菌(Curvularia oryzae)。
[0011]本专利技术所述的应用，优选将所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusvelezensis)X1菌株进行培养，得到菌株发酵培养液或发酵培养液的过滤液；用所得到的菌株发酵培养液或发酵培养液的过滤液应用于所述的椰子病害的生物防治。
[0012]本专利技术所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)X1菌株对奇异长喙壳(Ceratocystis paradoxa)引起的椰子冠腐病和水稻弯孢(Curvularia oryzae)引起的叶斑病均显示出良好的生防效果。在幼苗试验中，贝莱斯芽孢杆菌X1发酵液对椰子冠腐病和叶斑病均具有较好防治效果，防效与咪鲜胺相当。
[0013]为农业上防治梨树病害提供了一种微生物菌株，对椰子冠腐病菌和叶斑病菌具有广谱抗性，与化学农药防效相当，同时可以有效避免化学农药带来的一系列问题，具有选择性强、不易产生抗药性，安全高效、环境友好等突出优势，在椰子病害的生物防治方面具有巨大的潜力，可作为生物农药进行开发利用。
附图说明
[0014]图1所示为贝莱斯芽孢杆菌X1对椰子冠腐病菌和叶斑病菌的抑制效果图，其中A为椰子冠腐病菌，B为椰子叶斑病菌。
[0015]图2所示为贝莱斯芽孢杆菌X1在LB培养基上的菌落形态。
[0016]图3所示为基于16S rRNA基因构建的贝莱斯芽孢杆菌X1 的系统发育树。
[0017]图4所示为盆栽椰子苗期防治试验中贝莱斯芽孢杆菌X1对椰子冠腐病防治效果图，A为CK发病情况，B为贝莱斯芽孢杆菌X1发酵液抑制椰子冠腐病发病情况，C为贝莱斯芽孢杆菌X1 发酵滤液抑制椰子冠腐病发病情况。
[0018]图5所示为盆栽椰子苗期防治试验中贝莱斯芽孢杆菌X1对椰子叶斑病防治效果图，A为CK发病情况，B为贝莱斯芽孢杆菌X1发酵液抑制椰子叶斑病发病情况，C为贝莱斯芽孢杆菌X1 发酵滤液抑制椰子叶斑病发病情况。
具体实施方式
[0019]下面结合具体实施例进一步阐明本专利技术。
[0020]本专利技术中选用的所有试剂和仪器都为本领域熟知选用的，但不限制本专利技术的实施，其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本专利技术以下实施方式的实施。
[0021]以下实施例所采用的培养基具体如下所述：
[0022]LB培养基：胰蛋白陈10g、酵母粉5g、NaCl 10g、琼脂17
‑
20 g、蒸馏水1000mL，用1mol/L NaOH调pH至7.5，121℃高压蒸汽灭菌20min；
[0023]LB培养液：胰蛋白胨10g、酵母粉5g、NaCl 10g、蒸馏水 1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株贝莱斯芽孢杆菌及其在椰子病害防治中的应用，其特征在于所述菌株保藏名称为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，该菌株X1于2021年6月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏登记号为CGMCC NO.22539。2.如权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株X1制备的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂含有菌株X1和/或菌株X1的代谢产物。3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂的活性成分为菌株X1的发酵液或...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱辉，牛晓庆，刘小玉，黄丽云，刘立云，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院椰子研究所，
类型：发明
国别省市：