一种促进骨再生或骨形成的多肽的制备及用途制造技术

本发明专利技术公开了一种促进骨再生或骨形成的多肽的制备及用途，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明专利技术从OMD核心蛋白11段LRRs基序中筛选出第10

【技术实现步骤摘要】
一种促进骨再生或骨形成的多肽的制备及用途


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种促进骨再生或骨形成的多肽的制备及用途。

技术介绍

[0002]先天疾病、癌症、创伤、感染等原因引起的口腔颌面部骨缺损严重影响患者的生活质量。组织工程即干细胞、支架和生长因子的结合，为功能性骨再生带来了新的希望。多种生长因子参与调控骨再生过程的不同阶段；其中一些生长因子已被广泛应用于临床前修复骨缺损模型。主要包括：骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Proteins，BMPs)，血管内皮生长因子
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A，血小板衍生生长因子
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BB，成纤维细胞生长因子
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2等。其中，骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein 2，BMP2)，是应用最广泛的骨移植辅助治疗的生长因子。
[0003]BMPs参与骨再生过程的所有阶段，包括软骨生成、血管生成和成骨。小鼠模型已经确定BMP2是启动骨修复反应所需的刺激，BMP2缺失会导致骨痂形成困难。美国食品和药物管理局批准本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽在制备促进骨再生或骨形成的药物中的用途，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。2.根据权利要求1所述的多肽在制备促进骨再生或骨形成的药物中的用途，其特征在于，所述多肽的制备方法包括以下步骤：A、构建过表达质粒：设计多肽的引物序列，进行PCR扩增获得目的基因，将含目的基因的PCR产物进行凝胶电泳，回收得到纯净的目的基因片段，将目的基因片段插入到酶切后的载体中得到重组质粒，再将重组质粒转化大肠杆菌，挑选单克隆细菌进行质粒抽提纯化，得过表达质粒；B、获得多肽：将过表达质粒转化感受态大肠杆菌，挑选单克隆细菌接种LB培养基进行摇床培养，所得培养液中加入蛋白诱导剂进行处理，处理后的菌液经第一次离心、裂解后，再第二次离心、过滤，然后提取得到多肽。3.根据权利要求2所述的多肽在制备促进骨再生或骨形成的药物中的用途，其特征在于，步骤A中，所述多肽的引物序列如SEQ ID NO：14和SEQ ID NO：15所示；所述载体为pGEX
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4T
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1，酶切的位点为BamH I和Not I；所述大肠杆菌为感受态大肠杆菌。4.根据权利要求2所述的多肽在制备促进骨再生或骨形成的药物中的用途，其特征在于，步骤B中，所述感受态大肠杆菌为感受态BL21；所述LB培养基中含有氨苄青霉素；所述摇床培养具体为：先37℃摇床培养6
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7h，所得菌液再以1:20
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200的体积比转接入新的LB培养基中，再37℃摇床培养至CD600值达到0.6以上。5.根据权利要求2所述的多肽在制备促进骨损伤再生药物中的用途，其特征在于，步骤B中，所述蛋白诱导剂为浓度100μM
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2mM的IpTG；所述处理的条件为：在20
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30℃下处理12
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14小时；所述第一次离心的条件为4...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄正蔚，朱晓晗，林文珍，陈燕，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属第九人民医院，
类型：发明
国别省市：