辣椒籽分离的寡肽MSL及其在预防或治疗癌症中的应用制造技术

本发明专利技术提出了辣椒籽分离的寡肽MSL及其在预防或治疗癌症中的应用，该寡肽由辣椒籽中分离获取，具有抗肿瘤作用，尤其是可以有效地抑制HepG2细胞生长代谢，应用前景好。应用前景好。

【技术实现步骤摘要】
辣椒籽分离的寡肽MSL及其在预防或治疗癌症中的应用


[0001]本专利技术涉及生物领域。具体地，本专利技术涉及辣椒籽分离的寡肽MSL及其在预防或治疗癌症中的应用。

技术介绍

[0002]辣椒，茄科辣椒属草本植物，原产于墨西哥，后传入中国，现主要分布于四川、云南、贵州、湖南、河南等地种植。辣椒主要由辣椒果肉和辣椒籽组成，辣椒籽占辣椒干重的30%
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60%，是辣椒加工过程中的主要副产物。辣椒籽含有丰富的膳食纤维、脂肪、蛋白质、矿物质和维生素E等，具有极佳的营养经济价值。
[0003]随着我国辣椒加工业的快速发展，辣椒在食品、医药、化工等领域均有应用，食品领域中干辣椒、辣椒酱、辣椒粉、火锅底料等辣椒产品越来越多，辣椒碱在医药中的应用也很广泛，辣椒加工过程中会产生大量的废弃辣椒籽。目前我国的辣椒籽少部分作为动物饲料，但大部分都未经有效利用被当作废弃物处理，造成环境污染和资源浪费。辣椒籽产量较多，价格低廉、容易获取，并且饼粕蛋白中氨基酸齐全，必需氨基酸含量适中，是一种优质的蛋白资源。因此从辣椒籽中提取生物活性肽既可“变废为宝”，提高资源利用率，又可减少污染，符合环境友好型社会的发展目标。
[0004]目前，抗肿瘤药物如氟尿嘧啶、顺铂、柔红霉素等在肿瘤治疗中发挥着重要作用，但是这些药物的安全性、有效性、及价格昂贵等使其临床应用性受到限制。越来越多的研究表明来自天然食物或动植物的生物活性肽对人体健康有着积极的作用。生物活性肽的生理活性功能主要体现在抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血压、降胆固醇、免疫调节等方面，动物源活性肽存在着成本高、安全性等问题，而植物源活性肽因其纯天然、营养价值高得到广泛应用，如大豆活性肽、花生活性肽、菜籽活性肽等，但是辣椒籽中活性肽研究尚少。

技术实现思路

[0005]本专利技术旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。
[0006]在本专利技术的一个方面，本专利技术提出了一种分离的多肽。根据本专利技术的实施例，所述分离的寡肽具有如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列或其功能类似物，具体地，所述分离的寡肽的氨基酸序列为MSL（Met
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Ser
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Leu，SEQ ID NO：1）。专利技术人从辣椒籽中分离获得了上述寡肽，并对其功能进行研究，发现其具有抗肿瘤作用，尤其是可以有效地抑制HepG2细胞生长代谢，应用前景好。
[0007]根据本专利技术的实施例，所述分离的寡肽来源于辣椒籽。专利技术人提取辣椒籽中的蛋白，意外发现了上述具有抗肿瘤作用的寡肽。
[0008]在本专利技术的另一方面，本专利技术提出了一种核酸分子。根据本专利技术的实施例，所述核酸分子编码前面所述分离的寡肽。根据本专利技术实施例的核酸分子在导入受体细胞后，在适于蛋白表达的环境下，表达前面所述的分离的寡肽，该寡肽具有抗肿瘤作用。
[0009]需要说明的是，本专利技术对于核酸分子的序列不作严格限定，只要是能够编码前面所述分离的寡肽即可。
[0010]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种构建体。根据本专利技术的实施例，所述构建体含有前面所述核酸分子。根据本专利技术实施例的构建体导入细胞后，在适于蛋白表达的环境下，表达前面所述的分离的寡肽，有助于发挥该寡肽的抗肿瘤作用。
[0011]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种重组细胞。根据本专利技术的实施例，所述重组细胞含有前面所述的核酸分子或前面所述的构建体。由此，在适于蛋白表达的环境下，表达前面所述的寡肽，有助于发挥该寡肽的抗肿瘤作用。本专利技术的重组细胞不包含生殖细胞、受精卵细胞或者胚胎细胞。
[0012]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种药物或食品。根据本专利技术的实施例，所述药物或食品包括：前面所述的分离的寡肽、核酸分子或重组细胞。由此，根据本专利技术实施例的药物或食品具有预防或治疗癌症作用。
[0013]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了前面所述寡肽、核酸分子或重组细胞在制备药物或食品中的用途。根据本专利技术的实施例，所述药物或食品用于预防或治疗癌症。
[0014]根据本专利技术的实施例，所述癌症为乳腺癌、肺癌、鼻咽癌、肝癌、胃癌、食道癌、结直肠癌、胰腺癌、黑色素瘤、皮肤癌、前列腺癌、宫颈癌、白血病、甲状腺癌、淋巴瘤、膀胱癌、肾癌、子宫体癌、卵巢癌、胆囊癌、口腔癌、喉癌、骨癌、睾丸癌或脑癌。
[0015]在本专利技术的又一方面，本专利技术提出了一种获得前面所述分离的寡肽的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：对辣椒籽进行处理，得到所述分离的寡肽。
[0016]根据本专利技术的实施例，所述方法包括：（1）将辣椒籽进行粉碎，得到辣椒籽粕；（2）对所述辣椒籽粕进行脱脂处理，得到脱脂后的辣椒籽粕；（3）提取所述脱脂后的辣椒籽粕中的蛋白，得到粗蛋白提取物；（4）将所述粗蛋白提取物进行酶解处理，然后灭酶，得到酶解蛋白溶液；（5）对所述酶解蛋白溶液进行分离纯化，得到所述分离的寡肽。
[0017]步骤（1）中，通过将辣椒籽粉碎，以便更好地发生后续反应，反应更加充分，从而提高寡肽的得率和纯度。步骤（2）中，脱脂处理可以除去辣椒籽粕中的油脂，从而提高蛋白的提取率和纯度。步骤（4）中，通过酶解处理，可以有效地使蛋白酶解为小分子肽，有助于得到具有抗癌功能的寡肽。
[0018]根据本专利技术的实施例，步骤（1）中，将所述粉碎所得粉碎物通过60~100目筛，得到截留物和透过物，收集透过物，得到辣椒籽粕。由此，可以使得辣椒籽粉透过，截留杂质，提高蛋白提取率，避免杂质影响。
[0019]根据本专利技术的实施例，所述脱脂处理采用的脱脂溶剂为正己烷。由此，可以有效地除去脂肪，且使用安全。
[0020]根据本专利技术的实施例，步骤（3）包括：将所述脱脂后的辣椒籽粕与水混合，所得混合液用碱液调节pH值至9~10，反应3~5小时，再调节反应液的pH值至4~5，反应1~3小时，将反应液离心，收集沉淀，得到粗蛋白提取物。pH值先高是因为在碱性环境下可以使辣椒籽粕中的蛋白溶解出来，后降低pH是在蛋白的等电点下蛋白可以沉降下来，离心后即可得到分离蛋白。
[0021]根据本专利技术的实施例，步骤（4）中进行所述酶解处理之前，预先将所述粗蛋白提取物进行超高压处理。超高压处理可以改善蛋白理化性质，经超高压和酶解的产物活性比仅
进行酶解的产物活性高。
[0022]根据本专利技术的实施例，所述超高压处理的压力为100~400MPa，时间为20~40分钟。由此，有助于改善蛋白理化性质，提高酶解所得产物的活性。
[0023]根据本专利技术的实施例，所述酶解处理的温度为30~50℃，时间为1~5小时，pH值为7~10，所述酶解处理采用的酶选自碱性蛋白酶，优选地衣芽孢杆菌，所述酶与所述粗蛋白提取物的质量比为1:20~1:50。由此，以便将蛋白酶解为小分子肽，从而可以获得抗癌寡肽。
[0024]根据本专利技术的实施例，所述灭酶是在90℃~100℃进行1~10min。由此，以便使酶失活，防止反应过度或防止酶干扰后续实验。
[0025]根据本专利技术的实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的寡肽，其特征在于，所述分离的寡肽的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。2.根据权利要求1所述的分离的寡肽，其特征在于，所述分离的寡肽来源于辣椒籽。3.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1或2所述分离的寡肽。4.一种构建体，其特征在于，含有权利要求3所述核酸分子。5.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求3所述核酸分子或权利要求4所述构建体。6.一种药物或食品，其特征在于，包括：权利要求1或2所述分离的寡肽、权利要求3所述核酸分子或权利要求5所述重组细胞。7.权利要求1或2所述分离的寡肽、权利要求3所述核酸分子或权利要求5所述重组细胞在制备药物或食品中的用途，其特征在于，所述药物或食品用于预防或治疗癌症。8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述癌症为乳腺癌、肺癌、鼻咽癌、肝癌、胃癌、食道癌、结直肠癌、胰腺癌、黑色素瘤、皮肤癌、前列腺癌、宫颈癌、白血病、甲状腺癌、淋巴瘤、膀胱癌、肾癌、子宫体癌、卵巢癌、胆囊癌、口腔癌、喉癌、骨癌、睾丸癌或脑癌。9.一种获得权利要求1或2所述分离的寡肽的方法，其特征在于，包括：对辣椒籽进行处理，得到所述分离的寡肽。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，包括：（1）将辣椒籽进行粉碎，得到辣椒籽粉；（2）对所述辣椒籽粉进行脱脂处理，得到脱脂后的辣椒籽粕；（3）提取所述脱脂后的辣椒籽粕中的蛋白，得到粗蛋白提取物；（4）将所述粗蛋白提取物进行酶解处理，然后灭酶，得到酶解蛋白溶液；（5）对所述酶解蛋白溶液进行分离纯化，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵靓，廖小军，王凤章，王永涛，饶雷，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：