一种可以分泌漆酶的工程菌株及其构建方法与应用技术

本发明专利技术涉及基因工程技术领域，具体提供了一种可以分泌漆酶的工程菌株，所述工程菌株为带有用于重组表达漆酶基因Tfu_1114的热纤梭菌工程菌株，将来源于褐色高温双岐菌Thermobifida fusca的漆酶基因Tfu_1114，通过将该漆酶基因导入热纤梭菌中，构建了重组表达该基因的热纤梭菌工程菌。所述热纤梭菌工程菌能高效表达漆酶。本发明专利技术还公开了该热纤梭菌工程菌株可以高效应用于木质纤维素的水解，具有良好的应用前景。良好的应用前景。良好的应用前景。

An engineering strain capable of secreting laccase and its construction method and Application

【技术实现步骤摘要】
一种可以分泌漆酶的工程菌株及其构建方法与应用


[0001]本专利技术属于基因工程
，具体涉及一种可以分泌漆酶的工程菌株及其构建方法 与应用。

技术介绍

[0002]木质纤维素是一类分布广泛、数量庞大、处理困难的可再生资源，将其转化成可再生 能源具有重要意义。木质纤维素主要由纤维素、半纤维素和木质素组成，纤维素是一种高 度有序、结合紧密的晶体结构，它与半纤维素紧密相连，外周由木质素包围。木质素通常 被认为是限制木质纤维素降解的最重要的因素，木质素通过与细胞壁其他成分的共价连接 进一步巩固了细胞壁结构，增加了空间阻力，从而对酶水解起到限制作用，且木质素对酶 具有吸附能力，可以通过对纤维素酶的非特异性或非生产性吸附来影响酶水解的效率，因 此要将纤维素直接水解成可利用的葡萄糖相当困难。
[0003]目前，木质纤维素的酶水解大多使用来源于丝状真菌的纤维素酶，比较典型的有木霉 属、曲霉属和青霉属等，但酶解过程中耗酶量高、活性极易受到产物的抑制，且这些酶蛋 白不耐高温，不耐酸碱，制约了其大规模应用。
[0004]嗜热纤维梭菌是目前自然界本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可以分泌漆酶的工程菌株，其特征在于：所述工程菌株为带有用于重组表达漆酶基因Tfu_1114的热纤梭菌工程菌株。2.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于：所述菌株为将热纤梭菌cel9K中SEQ ID No:1的核苷酸序列替换为漆酶基因Tfu_1114重组得到的工程菌。3.根据权利要求2所述的工程菌株，其特征在于：所述漆酶基因Tfu_1114的核苷酸序列如SEQ ID No:2所示。4.根据权利要求1所述的工程菌株，其特征在于：所述漆酶基因Tfu_1114来源于褐色高温双岐菌(Thermobifida fusca)YX的漆酶基因Tfu_1114。5.权利要求1所述的可以分泌漆酶的工程菌株的构建方法，其特征在于：将漆酶基因Tfu_1114导入热纤梭菌基因组上，构建重组表达该基因的热纤梭菌工程菌，得到可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株。6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：以热纤梭菌野生菌株为出发菌株，通过替换热纤梭菌基因组上cel9K基因的部分序列构建融合蛋白来表达漆酶基因Tfu_1114...

【专利技术属性】
技术研发人员：张天元，邵雄俊，薛怡芸，
申请(专利权)人：苏州聚维元创生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：