【技术实现步骤摘要】
HPPD蛋白、基因、载体、细胞、组合物及其应用、提高作物除草剂抗性的方法
[0001]本专利技术涉及基因工程领域,具体涉及一种HPPD蛋白、基因、载体、细胞、组合物及其应用、提高作物除草剂抗性的方法。
技术介绍
[0002]HPPD是非血红素铁、α
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酮酸依赖型加氧酶家族的一个成员,是酪氨酸代谢路径中的关键酶,能够将酪氨酸氨基转移酶的催化产物对羟苯基丙酮酸进一步催化生成尿黑酸。
[0003]在植物体内,尿黑酸是生物合成质体醌和生育酚的前体物质。质体醌不仅是八氢番茄红素去饱和酶的关键辅助因子,还是电子传递的载体,直接参与到光合作用中。而生育酚是细胞膜的结构组分之一,是细胞膜的抗氧化剂。一旦HPPD的活性被抑制,就会导致质体醌的合成减少,进而导致八氢番茄红素去饱和酶的催化过程受阻,从而影响类胡萝卜素的生物合成,最终使植物出现白化症状而死亡。所以,HPPD是一个重要的除草剂作用靶标。
[0004]目前,商品化的HPPD抑制剂除草剂已经有16余种。由于HPPD除草剂具有广谱、高效、使用安全、抗性增长缓慢等特点,已经受到越来越多农药化学研究者的关注,并且其年销售额在逐年增长。
[0005]抗除草剂作物在过去20年里,给农民和环境带来了巨大的利益,例如,抗草甘膦玉米和大豆作物等。因此,开发新的抗除草剂作物,如抗HPPD抑制剂类除草剂的作物,显得非常必要。
[0006]本领域已有一些对HPPD除草剂抗性基因的研究,这些研究大多是以来自各种菌的HPPD为研究对象,寻找其对除草剂具有抗 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种对羟苯基丙酮酸双加氧酶蛋白,其特征在于,具有选自以下至少一种的氨基酸序列:(1)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中选自418位点、423位点和432位点中的至少一个位点发生突变后衍生的第一氨基酸序列;(2)所述第一氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活力不变的由第一氨基酸序列衍生的蛋白质,或者,在第一氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质;(3)如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中422位点发生突变后衍生的第二氨基酸序列;(4)所述第二氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活力不变的由第二氨基酸序列衍生的蛋白质,或者,在第二氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质;(5)如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中426位点发生突变后衍生的第三氨基酸序列;(6)所述第三氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活力不变的由第三氨基酸序列衍生的蛋白质,或者,在第三氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质;(7)如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列中418位点发生突变后衍生的第四氨基酸序列;(8)所述第四氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活力不变的由第四氨基酸序列衍生的蛋白质,或者,在第四氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质;(9)如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列中426位点发生突变后衍生的第五氨基酸序列;(10)所述第五氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且酶活力不变的由第五氨基酸序列衍生的蛋白质,或者,在第五氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列所示的蛋白质。2.根据权利要求1所述的对羟苯基丙酮酸双加氧酶蛋白,其中,所述第一氨基酸序列为选自以下至少一种的氨基酸序列:(1a)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中418位点的赖氨酸突变为天冬氨酸后衍生的氨基酸序列;(1b)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中423位点的谷氨酸突变为甲硫氨酸后衍生的氨基酸序列;(1c)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中423位点的谷氨酸突变为谷氨酰胺后衍生的氨基酸序列;(1d)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中432位点的谷氨酸突变为甲硫氨酸后衍生的氨基酸序列;(1e)如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中432位点的谷氨酸突变为异亮氨酸后衍生的氨基酸序列;优选地,所述第一氨基酸序列为K418D、E423M、E423Q、E432M、E432I所示的氨基酸序列中的至少一种;优选地,所述第二氨基酸序列为以下的氨基酸序列:(2a)如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列中422位点的谷氨酸突变为甲硫氨酸后衍生的
氨基酸序列;优选地,所述第二氨基酸序列为E422M所示的氨基酸序列;优选地,所述第三氨基酸序列为以下的氨基酸序列:(3a)如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中426位点的谷氨酸突变为甲硫氨酸后衍生的氨基酸序列;优选地,所述第三氨基酸序列为E426M所示的氨基酸序列;优选地,所述第四氨基酸序列为以下的氨基酸序列:(4a)如SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列中418位点的谷氨酸突变为甲硫氨酸后衍生的氨基酸序列;优选地,所述第四氨基酸序列为Q418M所示的氨基酸序列;优选地,所述第五氨基酸序列为以下的氨基酸序列:(5a)如SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列中426位点的谷氨酸突变为谷氨酰...
【专利技术属性】
技术研发人员:杨光富,林红艳,杨文超,魏雪芳,肖寒,董进,霍慧玲,
申请(专利权)人:华中师范大学,
类型:发明
国别省市:
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