金钗石斛生物碱的用途制造技术

一种金钗石斛生物碱的用途，所述用途为用于制备治疗周围神经损伤药物的应用；本发明专利技术明确了石斛碱具有加快周围神经损伤后的神经再生及功能恢复，该效应的有效剂量为40 mg/kg的石斛碱；本发明专利技术扩大了金钗石斛的用药范围，为石斛碱应用于临床治疗周围神经损伤提供了理论依据。论依据。论依据。

Use of Dendrobium nobile alkaloids

【技术实现步骤摘要】
金钗石斛生物碱的用途


[0001]本专利技术涉及中药产品的新用途，特别涉及金钗石斛生物碱的用途。

技术介绍

[0002]周围神经损伤（Peripheralnerveinjury,PNI）是临床常见的创伤之一，伤后由于神经再生速度缓慢，导致神经靶器官感觉和功能恢复不全，降低了患者的生活质量，增加了家庭的负担。因此，寻找能够加快神经再生的策略或手段对临床治疗周围神经损伤具有重要意义。
[0003]金钗石斛（Dendrobiumnobile）是兰科多年生草本，为我国传统名贵中药，主要生长在云贵川等海拔较高的地区，其主要的化学成分有生物碱类、多糖类、黄酮类、酚类、倍半萜类、香豆素类及甾体糖苷类化合物，其药理作用主要表现在抗肿瘤、降血糖以及对神经系统保护等方面。
[0004]金钗石斛生物碱（AlkaloidsenrichedextractfromDendrobiumnobileLindl，DNLA）是金钗石斛的主要活性成分之一，具有多种药理作用：可以降低血糖、抗肿瘤、抗白内障等作用。有研究表明，DNLA可明显减轻APP/PSI转基因小鼠和Aβ
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诱导的AD小鼠神经元和突触的丢失，促进BDNF、CNTF等多种神经营养因子分泌。对脂多糖诱导的大鼠记忆障碍有明显的改善作用,减轻神经元的凋亡。抑制凋亡相关蛋白Caspase
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1，对OGD/R诱导的HT22细胞具有神经保护作用。石斛碱（Dendrobine）作为DNLA中主要的代表成分，在《中国药典》2015年版中将石斛碱含量作为金钗石斛质量检测指标，规定其含量不得低于0.4%，推测其可能为DNLA发挥神经保护作用的有效成分之一，目前，石斛碱对中枢神经系统的保护作用有待进一步的阐明，也尚未发现其应用于周围神经损伤的报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的是石斛碱对周围神经损伤后再生修复的技术问题。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：一种金钗石斛生物碱的用途，所述用途为用于制备治疗周围神经损伤药物的应用。
[0007]所述金钗石斛生物碱有效剂量为40mg/kg。
[0008]采用上述技术方案的有益效果是：1.本专利技术明确了石斛碱具有加快周围神经损伤后的神经再生及功能恢复，该效应的有效剂量为40mg/kg的石斛碱。
[0009]2.本专利技术扩大了金钗石斛的用药范围，为石斛碱应用于临床治疗周围神经损伤提供了理论依据。
附图说明
[0010]图1为实施例1中石斛碱对大鼠坐骨神经离断吻合后功能恢复的影响示意图。（A）
各组大鼠灌胃两个月后的坐骨神经功能指数结果图；（B）各组大鼠的腓肠肌湿重比率结果图；（C）HE染色观察坐骨神经离断吻合后腓肠肌的病理改变形态图。
[0011]图2为实施例2中（A）HE染色和（B）Nissl染色观察脊髓前角运动神经元的损伤形态图。
[0012]图3为实施例2中石斛碱对坐骨神经离断吻合后的神经再生的作用示意图。（A）Masson染色观察损伤后坐骨神经远端的病理变化形态图；（B）通过Masson染色对损伤后坐骨神经远端有髓神经纤维进行计数的结果图。
具体实施方式
[0013]为使本专利技术要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施例进行详细描述。
[0014]实施例1：观察石斛碱对坐骨神经离断吻合模型大鼠坐骨神经功能的影响。
[0015]1.1.建立大鼠坐骨神经离断吻合模型将大鼠随机分为5组（每组8只）：空白组、模型组、石斛碱低剂量组、石斛碱高剂量组和甲钴胺组。200
±
20g的雄性SD大鼠，腹腔注射3%戊巴比妥钠麻醉，取仰卧位固定，碘伏消毒大鼠左后肢内侧皮肤，作约3cm的皮肤切口，钝性分离股内侧肌间隙，暴露坐骨神经，剪断神经后应用9
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0显微带线缝合针对坐骨神经进行无张力的神经外膜端端吻合，建立坐骨神经离断吻合模型，该模型适用于研究失神经损伤后肌萎缩和功能恢复。
[0016]1.2.灌胃观察本专利技术所述的石斛碱是购自贵州省赤水市信天中药产业开发有限公司（GS20111213GP
‑
1），金钗石斛干燥茎，采用醇提法提取金钗石斛干燥茎中的DNLA，其中石斛碱（C
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NO2）的含量为99.7%。术后第一天开始灌胃给药，空白组和模型组（蒸馏水）、石斛碱高剂量组（40mg/kg）、石斛碱低剂量组（20mg/kg）、阳性组（甲钴胺0.3mg/kg），每天一次，持续8周。观察大鼠的生理状态并记录，每周对大鼠展爪反射进行拍照。
[0017]1.3.坐骨神经功能指数的计算灌胃8周后，进行足迹分析，即使大鼠双后足蘸满墨水，使其自由的通过长约60cm、宽约10cm和高约10cm的长方体硬纸箱，该纸箱底部垫有等宽、等长的纸条，大鼠行走后，留下4
‑
5个足印，选择清晰且完整的正常侧和损伤侧足印测量足趾宽度（normaltoespread,NTS；experimentaltoespread,ETS）；足印长度(normalprintlength,NPL；experimentalprintlength,NPL)；中间足趾宽度(normalintermediarytoespread,NIT；experimentalintermediarytoespread,EIT)。利用Bain公式计算坐骨神经功能指数（SFI）：SFI＝
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38.3[(EPL
‑
NPL)/NPL]+109.5
×
[(ETS
‑
NTS)/NTS]+13.3
×
[(EIT
‑
NIT)/NIT]‑
8.8。SFI=0表示坐骨神经功能正常，SFI=
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100时表明坐骨神经功能完全，该法具有准确、可靠和无创伤的优点，是实验中评估坐骨神经功能常用的行为学方法。
[0018]1.4.腓肠肌湿重比率及HE染色大鼠用3%戊巴比妥钠麻醉处死后，取两侧腓肠肌进行称重，计算湿重比率：比率=损伤侧腓肠肌湿重/正常侧腓肠肌湿重。每组取3只大鼠，将称重后的腓肠肌用4%多甲固定，石蜡包埋后进行HE染色，具体步骤如下：（1）二甲苯Ⅰ（5～10min）
→
二甲苯Ⅱ（5～10min)。（2）无水乙醇（5min）
→
95％乙醇（3～5min）
→
80％乙醇（3min）。（3）蒸馏水（1
min）
→
苏木精染液(5～10 min)
ꢀ→
流水稍洗去苏木精（2～3 s）
→
1 ％盐酸乙醇（3～4 s）。(4)0.5 ％曙红染液（2～3 min）
→
蒸馏水稍洗（1～2 s）。(5)80 ％乙醇（2 s）
→
95％乙醇（1～2 s）
→
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种金钗石斛生物碱的用途，其特征在于：所述用途为用于制备治疗周围神经损伤药物的应用。2.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：聂晶，孙广峰，涂星星，
申请(专利权)人：遵义医科大学，
类型：发明
国别省市：