一株高产胞外多糖的鼠李糖乳杆菌及其在缓解皮肤损伤中的应用制造技术

一株高产胞外多糖的鼠李糖乳杆菌及其在缓解皮肤损伤中的应用。本发明专利技术提供了一株新型鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）及其应用。所述的鼠李糖乳杆菌能高产胞外多糖，具有良好的抗氧化活性，并且能有效抑制皮肤分泌促炎症反应细胞因子，缓解紫外线UVB对皮肤的损伤，其保藏号为CCTCC NO：M2021589。所述鼠李糖乳杆菌对机体无毒害作用，有望用于制备防晒化妆品，应用前景广阔。应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
一株高产胞外多糖的鼠李糖乳杆菌及其在缓解皮肤损伤中的应用


[0001]本专利技术属于益生菌筛选与应用
，具体涉及一株高产胞外多糖的鼠李糖乳杆菌及其在缓解皮肤损伤中的应用。

技术介绍

[0002]人体皮肤主要包含表皮层和真皮层2层组织。辐照到人体皮肤的太阳紫外线含有90
‑
99％UVA和1
‑
10％的UVB。在相同剂量下，UVB对皮肤的损伤程度比UVA高1000倍。并且UVB主要作用于表皮层的角质细胞(HaCaT)，引发细胞内蛋白、DNA和膜脂的损伤，造成代谢紊乱引起皮肤的光损伤，严重者造成皮肤癌。使用传统的防晒霜抗紫外可能会引起皮肤炎症和过敏等副作用。因此利用植物、动物和微生物产生的天然产物进行抗紫外作用受到了关注。目前已有研究发现天然类黄酮水飞蓟素通过上调ER alpha和ER beta蛋白途径，保护细胞免受UVB损伤；海藻糖通过抑制MMP的表达来抵抗UVB诱导的皮肤老化；来自成团泛菌的胞外多糖能够保护HaCaT细胞免受UVB的损伤。
[0003]乳酸菌是普遍存在的益生菌，被认为是“一般安全菌”，其已广泛用于食品、药品和化妆品等领域。乳酸菌能够产生有机酸、抗菌肽、胞外多糖等天然代谢产物。乳酸菌胞外多糖(Exopolysaccharide，EPS)指的是乳酸菌在其生长以及代谢的过程中产生并且分泌到细胞壁外部的大分子，主要是依附细胞壁的荚膜多糖和进入发酵液中的黏液多糖。近些年的研究发现，乳酸菌及其胞外多糖在抗肿瘤，抗炎，调节免疫和抗菌等方面具有很好的应用效果。乳酸菌及其胞外多糖在抗紫外损伤方面的功能研究也是本领域的一个热点。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一株新型鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)及其应用。所述的鼠李糖乳杆菌高产胞外多糖，具有良好的抗氧化活性，并且能够有效抑制皮肤分泌促炎症反应细胞因子，缓解紫外线UVB对皮肤的损伤，效果显著。
[0005]本专利技术一方面提供了一种鼠李糖乳杆菌，命名为鼠李糖乳杆菌VHProbi O17(Lactobacillus rhamnosus VHProbi O17)，已于2021年5月24日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：M2021589。
[0006]本专利技术一方面提供了鼠李糖乳杆菌VHProbi O17在在制备用于预防和缓解皮肤损伤的制品中的应用。
[0007]所述的制品为化妆品。
[0008]本专利技术一方面提供了鼠李糖乳杆菌VHProbi O17在生产胞外多糖中的应用。
[0009]本专利技术还提供了一种胞外多糖，是以鼠李糖乳杆菌VHProbi O17为发酵菌株生产获得的。
[0010]所述的胞外多糖由D
‑
氨基半乳糖盐酸盐、阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖6种单糖组成，其摩尔比为0.05：0.03：0.09：0.05：0.19：1.98。
[0011]所述的胞外多糖含有β
‑
吡喃甘露糖。
[0012]所述的胞外多糖的分子量为82.4kDa。
[0013]本专利技术还提供了所述胞外多糖在制备用于预防和缓解皮肤损伤的制品中的应用。
[0014]本专利技术还提供了一种化妆品，包含有鼠李糖乳杆菌VHProbi O17和/或鼠李糖乳杆菌VHProbi O17发酵生产的胞外多糖。
[0015]本专利技术提供的鼠李糖乳杆菌VHProbi O17具有很强的抗氧化活性，对DPPH和羟自由基的清除率分别达到51.73％和26.04％。
[0016]鼠李糖乳杆菌VHProbi O17对皮肤细胞无毒性影响，还具有一定的促生长作用，能有效缓解UVB辐照对于细胞的损伤。经灭活的鼠李糖乳杆菌VHProbi O17预处理后的HaCaT细胞，再被UVB辐照后，其活力下降幅度明显减小。其中，当菌量为8
×
108CFU/mL时，HaCaT细胞被UVB辐照后的活性比不加菌预处理时提高了76.6％。该菌株还能显著抑制UVB诱导细胞分泌产生促炎症反应细胞因子IL
‑
6和IL
‑
8，IL
‑
6和IL
‑
8的分泌量分别降低了34.4％和54.2％，取得了意料不到的技术效果。
[0017]鼠李糖乳杆菌VHProbi O17能产生一种新的胞外多糖OP
‑
2，由D
‑
氨基半乳糖盐酸盐、阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖6种单糖组成，可以有效缓解UVB对皮肤的损伤。当辐照剂量为15mJ/cm2时，不加胞外多糖预处理的HaCaT细胞经UVB辐照后的活性仅为27.2％，而当胞外多糖OP
‑
2的添加量达16mg/mL时，预处理后的HaCaT细胞经UVB辐照后的活性高达65.7％，效果非常显著。胞外多糖OP
‑
2还能有效抑制UVB诱导皮肤细胞分泌IL
‑
1α、IL
‑
6和IL
‑
8 3种细胞因子。胞外多糖OP
‑
2预处理后的HaCat细胞，再经UVB诱导，其上清液中IL
‑
1α含量降低了20％
‑
91％，最低降至6.73pg/mL，IL
‑
6和IL
‑
8含量也分别降低了67％和23％，取得了意料不到的技术效果。
[0018]本专利技术提供的鼠李糖乳杆菌VHProbi O17及其所产的胞外多糖可广泛应用于化妆品中，前景广阔。
附图说明
[0019]图1为菌株O17的菌落图及革兰氏染色图；其中A为菌落图，B为革兰氏染色图；
[0020]图2为菌株O17的蛋白指纹图；
[0021]图3为菌株O17的Riboprinter指纹图谱；
[0022]图4为菌株O17的RAPD指纹图；
[0023]图5为菌株O17的rep
‑
PCR指纹图；
[0024]图6为鼠李糖乳杆菌VHProbi O17缓解UVB对皮肤细胞损伤效果的对比图；
[0025]图7为鼠李糖乳杆菌VHProbi O17的生长曲线和胞外多糖的产生曲线；
[0026]图8为鼠李糖乳杆菌VHProbi O17产胞外多糖的DEAE
‑
μSphere洗脱色谱图；
[0027]图9为胞外多糖OP
‑
2的离子色谱分析图；
[0028]图10为胞外多糖OP
‑
2的红外光谱分析图；
[0029]图11为胞外多糖OP
‑
2的凝胶柱分析图和标准曲线图；其中A为凝胶柱分析图，B为标准曲线图；
[0030]图12为胞外多糖OP
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2缓解UVB对皮肤细胞损伤效果的对比图；
[0031]图13为胞外多糖OP
‑
2抑制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鼠李糖乳杆菌，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌的保藏号为CCTCC NO：M2021589。2.权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌在制备用于预防或缓解皮肤损伤的制品中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的制品为化妆品。4.一种胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖是以权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌为发酵菌株生产获得的。5.如权利要求4所述的胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖由D
‑
氨基半乳糖盐酸盐、阿拉伯糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖6种单糖组成。6.如权利要求5所述的胞外多糖，其特征在于，所述胞外多糖中D
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氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭书东，段治，吴松洁，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：