干细胞来源的视网膜色素上皮的基于MACS的纯化制造技术

提供了富集源自干细胞的视网膜色素上皮(RPE)细胞群体的方法。这样的方法可以包括通过从RPE细胞的起始群体中耗竭CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞和/或CD90阳性的细胞来除去污染细胞。去污染细胞。

【技术实现步骤摘要】
干细胞来源的视网膜色素上皮的基于MACS的纯化
[0001]本申请是分案申请，其对应的母案申请的申请号为201680060869.2，申请日期为2019年9月7日，专利技术名称为“干细胞来源的视网膜色素上皮的基于MACS的纯化”。
[0002]本申请要求2015年9月8日提交的美国临时申请号62/215,272的优先权，其全部内容通过引用并入本文。


[0003]本专利技术一般而言涉及干细胞生物学领域。更具体地，涉及富集干细胞来源的视网膜色素上皮细胞群体的方法。

技术介绍

[0004]视网膜是组织的光敏层，其布置在眼睛的内表面。视网膜中的感光器细胞(杆或锥细胞)对光直接敏感，并将化学光信号转化为触发神经冲动的电活动。视网膜色素上皮细胞(RPE)是一层形成血
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视网膜屏障的色素细胞。RPE细胞在维持视觉功能以及从视网膜下腔至血液的离子、水和代谢终产物的转运中发挥重要作用(Strauss等人，2005)。此外，RPE细胞通过分泌免疫抑制因子来建立眼的免疫赦免(immune privilege)。RPE细胞的紊乱或损伤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.视网膜色素上皮(RPE)富集的细胞群体，其通过包括以下步骤的方法制备：a)获得包含RPE细胞的起始细胞群体，其中所述起始细胞群体由诱导性多能干细胞制备；和b)通过从所述起始细胞群体中耗竭以下细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞：(i)CD24阳性的细胞，或(ii)CD56阳性的细胞，或(iii)CD24阳性的细胞和CD56阳性的细胞，或(iv)CD24阳性的细胞和CD90阳性的细胞，或(v)CD56阳性的细胞和CD90阳性的细胞，或(vi)CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞和CD90阳性的细胞，由此提供与起始细胞群体相比富含具有Pax6的下调表达和RPE65的上调表达的RPE细胞的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体在使用TYRP1和/或PMEL17作为标记测定时是至少90％纯的RPE细胞。2.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体是至少95％的RPE细胞。3.根据权利要求2所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体是至少99％的RPE细胞。4.根据权利要求3所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体是基本上纯的RPE细胞。5.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE细胞是人RPE细胞。6.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中通过基于磁珠的分选或基于荧光的分选耗竭CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞或CD90阳性的细胞。7.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中通过分别使用识别CD24、CD56或CD90的抗体或适体耗竭CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞或CD90阳性的细胞。8.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体未经遗传修饰。9.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述方法的步骤b)在没有对所述起始细胞群体进行遗传改造的情况下进行。10.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD24阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。11.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD56阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。12.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体，其中所述R...

【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：富士胶片细胞动力公司，
类型：发明
国别省市：