灰隔孢伏革菌F08及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株灰隔孢伏革菌F08(Peniophora simulans F08)，其保藏编号为CGMCC No.3.20903，分类命名是：Peniophora simulans；保藏日期：2022年3月28日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。该菌株对金霉素和土霉素有较好的降解率，对人体无毒无害，具有较好的应用前景。具有较好的应用前景。具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
灰隔孢伏革菌F08及其应用


[0001]本专利技术涉及灰隔孢伏革菌F08(Peniophora simulans F08)及其应用，属于利用微生物对水治理的


技术介绍

[0002]近年来，抗生素(antibiotics)被列为环境中的新兴污染物。残留在环境中的四环类抗生素对影响微生物的群落结构，并促进了施肥土壤中蔬菜作物对抗生素的吸收。在畜牧业和水产养殖业中大量使用抗生素伴随着一系列的环境污染问题。
[0003]目前，去除抗生素的技术主要分为三类，即物理法(吸附法、高压膜过滤法等方法)、化学法(臭氧氧化、类芬顿氧化、高铁盐酸氧化、光催化、电氧化等方法)和生物法(微生物降解、氧化还原酶降解)。
[0004]物理和化学技术应用广泛，高压膜过滤对抗生素去除有良好的效率，但将抗生素去除到低于检测阈值需要大量活性炭，成本高，且易对环境造成二次污染。臭氧氧化、类芬顿氧化、高铁盐酸氧化可以有效去除抗生素，但容易产生一些潜在的有毒副产物，并且能量消耗大。
[0005]过去的几年中，生物处理已经广泛应用于降解抗生素。生物技术是目前公认的最佳降解抗生素物质技术，特别是微生物降解、氧化还原酶降解用于大多数水处理。微生物降解抗生素可分为三个阶段，第一阶段微生物吸附，抗生素到达细胞表面或进入细胞；第二个阶段微生物在抗生素的刺激下，开始分泌一些胞外或孢内氧化还原酶；第三个阶段抗生素在氧化还原酶的作用下降解为无毒性的或低毒性的化合物。筛选可高效降解抗生素的菌株将具有非常广阔的市场前景。
[0006]众所周知，微生物降解是一种成本低廉、安全高效且环境友好的方法，其在处理抗生素等有机污染物的过程中发挥着至关重要的作用。通过国内外研究发现，目前所筛选出的对金霉素、土霉素具有降解能力的菌种较少。研究者不断从环境中筛选分离出能够降解四环素类抗生素的菌种。酵母菌、发酵丝状菌酵母等均具有抗生素的降解功能。沈颖等分离得到有效降解四环素的放线菌、真菌及细菌。杨正礼筛选出降解金霉素真菌,桔青霉(Penicillium citrinum)LJ318,草酸青霉(Penicillium oxalicum)LJ302。张惠艳考察哈茨木霉(Trichoderma harzianum)LJ245和LJ302菌株对金霉素的降解能力,LJ245和LJ302两株真菌LJ245能够在300mg/L的金霉素中生长且降解效率最高。冯福鑫等分离得到一株酵母菌Trichosporon mycotoxinivorans XPY
‑
10可以盐酸四环素为唯一碳源进行生长对600mg/L盐酸四环素降解率为83.63％。

技术实现思路

[0007]本专利技术从中国玉龙雪山土壤样品中筛菌，获得一株灰隔孢伏革菌F08，其保藏编号为CGMCC No.3.20903，分类命名是：Peniophora simulans；保藏日期：2022年3月28日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微
生物中心。
[0008]菌株F08能够高效降解抗生素物质(降解率可达90％以上)，该菌可通过固定化方法应用于环境水资源的保护。
[0009]菌株灰隔孢伏革菌F08的形态特征：
[0010]菌落的组织性状呈绒毛状，菌落颜色为白色，菌落干燥。
[0011]灰隔孢伏革菌F08的降解培养基特征：
[0012]微好氧，生长温度范围10～30℃，最适生长温度范围为20～25℃。可以在pH 3.0～6.0的环境生长，其中最适pH为4.0～5.0。
[0013]本专利技术的有益效果：本专利技术的菌株可在常温条件有效降解抗生素物质，菌株耐受性较广，环境对其降解效率影响较小，环境低温、偏酸时能够高效降解抗生素物质，在环境水保护中具有重大意义，将灰隔孢伏革菌接种于环境水体中，相比化学和物理，安全性高，经济有效，不会造成二次污染；且菌株在高浓度时也不会对人体或环境产生危害作用。
附图说明
[0014]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。在附图中：
[0015]图1为菌种F08菌落、菌丝形态图；
[0016]图2为Peniophora simulans F08的系统发育树图；
[0017]图3为菌种F08在不同培养温度下对金霉素、土霉素降解效果图；
[0018]图4为菌种F08在不同pH环境中对金霉素、土霉素降解效果图；
[0019]图5为菌种F08对不同浓度金霉素、土霉素降解效果图；
[0020]图6为固定化P.simulans F08在固定床中降解效果图；
[0021]图7为固定化菌丝颗粒的重复使用性能
具体实施方式
[0022]以下结合附图对本专利技术的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0023]实施例
[0024]菌株F08的富集及筛选
[0025]在分离筛选中，所用的样品为玉龙雪山冻土，用灭菌后的去离子水搅拌样品，得到样品液。将样品液通过PDA培养基富集培养稀释涂平板至PDA培养基中，在20℃、培养5天后，挑取不同形态的菌落，分离纯化直至形成单菌落。
[0026]将分离出来的单菌落进行抗生素降解实验，筛选出降解能力最强的菌种。该灰隔孢伏革菌F08菌种进行鉴定和保藏。
[0027]该菌在含有200mg/L金霉素的无机盐培养基中20℃培养5天后，可降解90％以上的金霉素；该菌在含有250mg/L土霉素的无机盐培养基中20℃培养5天后，可降解95％以上的土霉素。
[0028]筛选出的菌种保存在砂土管、冷冻干燥管中，将处于休眠状态。使用时将菌种进行活化，获得一定数量的纯菌种。
[0029]灰隔孢伏革菌F08培养方法，包括如下步骤：
[0030]菌种活化：将处于休眠状态的菌种接入PDA培养基中，于25℃活化7天。
[0031]上述所用的培养基配置方法如下：
[0032]PDA培养基按1L蒸馏水、将200g去皮土豆切成小块，加1L蒸馏水，煮沸至土豆软，8层纱布过滤，加入葡萄糖20g，定容至1L，pH自然，121℃灭菌20min。
[0033]PDA平板按1L蒸馏水、将200g去皮土豆切成小块，加1L蒸馏水，煮沸至土豆软，8层纱布过滤，加入葡萄糖20g，定容至1L，琼脂20，pH自然，121℃灭菌20min。
[0034]无机盐培养基按1L蒸馏水、3g葡萄糖，0.1g NH4Cl，0.14g CuSO4·
5H2O，1g KH2PO4，0.01g FeSO4·
7H2O，0.095g MgSO4·
7H2O，0.1g CaCl2·
2H2O，并在121℃灭菌20min，pH控制在4.5左右。
[0035]灰隔孢伏革菌F08菌种鉴定
[0036]1、形态观察<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.灰隔孢伏革菌F08，其保藏编号为CGMCC No.3.20903，分类命名是：Peniophora simulans；保藏日期：2022年3月28日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。2.权利要求1所述的灰隔孢伏革菌F08在降解抗生素中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的抗生素为金...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘纪，王锋，黄达明，徐玲，邹彬，霍书豪，钱静亚，管国强，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：