一种保阴煎提取物多成分质量检测方法技术

本发明专利技术公开了一种保阴煎提取物多成分质量检测方法，属于中成药生产技术领域，通过对照品溶液制备、供试品溶液制备的研究，以及高效液相色谱测定、相对校正因子值确定，对照品溶液的绿原酸峰面积得出其成分含量与峰面积关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的绿原酸峰面积代入线性回归方程即得样品中绿原酸成分的含量，再以绿原酸的峰面积为对照，分别乘以校正因子，计算马钱苷酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量，达到检测保阴煎提取物多成分质量检测的目的，检测便捷、可靠，成本较低。低。低。

【技术实现步骤摘要】
一种保阴煎提取物多成分质量检测方法


[0001]本专利技术涉及中成药生产
，具体涉及一种保阴煎提取物多成分质量检测方法。

技术介绍

[0002]保阴煎是由明代著名医家张景岳所拟的治疗月经病的名方，其功能清滋阴凉血、固冲止血、安胎，《景岳全书》中对保阴煎的描述为“保阴煎治男妇带、浊、遗、淋，色赤带血，脉多滑热，便血不止，及血崩、血淋，或经期太早，凡一切阴虚内热动血等。”该方由生地黄、熟地黄、白芍、山药、川续断、黄芩、黄柏、生甘草8味药组成，方中以熟地黄大滋肾阴，取“壮水之主以制阳光”之意；生地黄滋阴清热，益阴养血；白芍养血敛阴，合以甘草，酸甘化阴，助二地滋阴养血；黄柏清热燥湿，退热除蒸，黄芩凉血止血，除热安胎，与滋阴药配伍，善于降泻无妄之虚火；续断补肝肾、固冲任、止血；山药补脾固肾，滋后天以养先天，与甘草配伍，益气安中、固护中土，免苦寒伤中之虞，且调和诸药。此方既可清热凉血，泻有余之火，又可养阴血，补肾阴，固冲任，补不足之阴，以达到祛邪不伤正，扶正不恋邪的中正平和之态。
[0003]按照《古代经典名方中药复方制剂物质基准的申报资料要求》(征求意见稿)、《古代经典名方关键信息表(7首方剂)》(征求意见稿)的考证，可知保阴煎现代的煎法为：“取生地、熟地、芍药各二钱，山药、川续断、黄芩、黄柏各一钱半，生甘草一钱。水二盅，煎七分，食远温服”。
[0004]经典名方是由多味中药组成的复方，由于中药多成分的复杂性，单一成分或指标评价难以表征中药的质量，而多成分质量控制的方法需要较多的对照品。而中药化学成分对照品分离难度大或单体不稳定、难以供应、成本高等因素，在实际应用中有诸多限制，使得多成份质量控制的实施存在诸多困难，难以推广。目前，国内对于保阴煎的研究多集中在中医辨证论治和临床应用方面，对保阴煎中化学成分进行定量分析的报道较少，较为系统的质量控制方法还尚未建立。一测多评法通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系法，测定一个成分(对照品易得、廉价、有效者)实现多个成分(对照品难以得到或难供应者)同步测定。从而节约中药稀有资源，降低检验成本，不仅解决了中药多成分定量和多指标质量控制中存在的对照品缺乏问题，同时实现多指标同步质量控制反应中药质量。目前还没有文献公开将一测多评方法用于保阴煎的成分检测中。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种保阴煎提取物多成分质量检测方法，解决了现有技术中中药的复方方剂的多成分质量控制的方法需要较多的对照品，现有操作方法成本高，质量控制受限制较多，实际应用存在很多困难的问题，结合现有的一测多评方法，一测多评法通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系法，测定一个成分实现多个成分同步测定，同时利用本方法得到了一个校正因子，目前未有相关的文献报道，利用校正因子结果计算含量从而节约中药稀有资源，降低检验成本，不仅解决了中药多成分定量和多指标质
量控制中存在的对照品缺乏问题，同时实现多指标同步质量控制反应中药质量。
[0006]本专利技术通过下述技术方案实现：
[0007]一种保阴煎提取物多成分质量检测方法，包括以下步骤：
[0008]A、对照品溶液制备：取马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱对照品适量，加入溶剂甲醇，制得含马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱对照品的混合对照品溶液，得对照品溶液；
[0009]B、供试品溶液制备：取保阴煎对照提取物，加入溶剂甲醇，制得供试品溶液；
[0010]C、高效液相色谱测定：分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行数据测定；
[0011]D、相对校正因子值确定：根据对照品溶液测得的马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的峰面积，代入相对校正因子计算公式：相对校正因子(f)＝A
s
*C
r
/C
s
*A
r
，以绿原酸为内标，分别计算得到马钱苷酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱相对于绿原酸的相对校正因子；
[0012]E、根据对照品溶液的绿原酸峰面积得出其成分含量与峰面积关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的绿原酸峰面积代入线性回归方程即得样品中绿原酸成分的含量，再以绿原酸的峰面积为对照，分别乘以校正因子，计算马钱苷酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量。
[0013]进一步地，步骤A中，对照品溶液具体制备方法为：取马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱各40μg的混合溶液，作为混合对照品溶液，即得对照品溶液。
[0014]进一步地，步骤B中，供试品溶液具体制备方法为：取保阴煎提取物0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30分钟，再称定重量，用70％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
[0015]进一步地，所述步骤C中，高效液相色谱仪测定条件是：
[0016]色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒度为5μm；
[0017]柱温为30℃；
[0018]流速：1.0mL/min；
[0019]进样量：10μL；
[0020]检测波长：235nm；
[0021]流动相A为乙腈，流动相B为0.1％磷酸水溶液，梯度脱洗。
[0022]进一步地，所述梯度洗脱过程为：
[0023]0～19min，流动相A为10～20％，流动相B为90～80％；
[0024]19～23min，流动相A为20～30％，流动相B为80～70％；
[0025]23～32min，流动相A为30％，流动相B为70％；
[0026]32～35min，流动相A为30～70％，流动相B为70～30％；
[0027]35～40min，流动相A为70％，流动相B为30％。
[0028]进一步地，所述步骤B中，保阴煎对照提取物的制备方法为，包括以下步骤：
[0029]a1：按原料重量份数计，取饮片：取生地、熟地、芍药各7.46份，山药、川续断、黄芩、
黄柏各5.60份，生甘草3.73份；
[0030]b1：将a1步骤中的全部饮片，放在煎煮容器中，一煎加8倍量水，浸泡30min，煎煮30min；第二次加6倍量水，煎煮20min，共煎煮2次，过滤，合并滤液，冷冻干燥成冻干粉，得保阴煎对照提取物。
[0031]本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
[0032](1)、本专利技术中，结合现有技术中的一测多评法，通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系法，测定一个成分(对照品易得、廉价、有效者)实现多个成分(对照品难以得到或难供应者)同步测定，同时利用本方法得到了一个校正因子，目前未有相关的文献报道，利用校正因子结果计算含量从而节约中药稀有资源，降低检验成本，不仅解决了中本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种保阴煎提取物多成分质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A、对照品溶液制备：取马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱对照品适量，加入溶剂甲醇，制得含马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗对照品的混合对照品溶液，得对照品溶液；B、供试品溶液制备：取保阴煎对照提取物，加入溶剂甲醇，制得供试品溶液；C、高效液相色谱测定：分别吸取上述对照品溶液及供试品溶液，注入高效液相色谱仪，进行数据测定；D、相对校正因子值确定：根据对照品溶液测得的马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的峰面积，代入相对校正因子计算公式：相对校正因子（f）=A
s
*C
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/C
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*A
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，以绿原酸为内标，分别计算得到马钱苷酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱相对于绿原酸的相对校正因子；E、根据对照品溶液的绿原酸峰面积得出其成分含量与峰面积关系的线性回归方程，并将供试品溶液测得的绿原酸峰面积代入线性回归方程即得样品中绿原酸成分的含量，再以绿原酸的峰面积为对照，分别乘以校正因子，计算马钱苷酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱的含量。2.根据权利要求1所述的一种保阴煎提取物多成分质量检测方法，其特征在于，步骤A中，对照品溶液具体制备方法为：取马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含马钱苷酸、绿原酸、芍药苷、黄芩苷、盐酸小檗碱各40μg的混合溶液，作为混合对照品溶液，即得对照品溶液。3.根据权利要求1所述的一种保阴煎提取物多成分质量检测方法，其特征在于，步骤B中，供试品溶液具体制备方法为：取保阴煎提取物0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30分钟，...

【专利技术属性】
技术研发人员：周巧敏，胡昌江，付林，李莎，宋媛，吴琦，李湘菊，高锐，罗俊，周维，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：