【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于检测，尤其涉及一种核桃仁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒hplc特征图谱的构建方法及其应用。
技术介绍
1、核桃仁为胡桃科植物胡桃juglans regial.的干燥成熟种子，具有补肾、温肺、润肠等功效，用于治疗或改善肾阳不足、腰膝酸软、阳痿遗精、虚寒喘嗽、肠燥便秘等病症。为了确保核桃仁药材、饮片标准汤剂及配方颗粒其质量的均一、稳定，建立一种新的特征图谱方法对其质量进行把控，是十分必要的。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种核桃仁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒hplc特征图谱的构建方法及其应用，本专利技术提供的构建方法可为核桃仁药材、饮片、标准汤剂及配方颗粒的鉴别提供更为科学的依据。
2、本专利技术提供了一种核桃仁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒hplc特征图谱的构建方法，包括以下步骤：
3、准备供试品，所述供试品为核桃仁药材、核桃仁饮片、核桃仁标准汤剂或核桃仁配方颗粒；
4、将所述供试品溶解，得到供试品溶液；
5、将所述供试品溶液采用高效液相色谱法测定，得到对应供试品的hplc特征图谱；
6、所述高效液相色谱法的色谱条件为：色谱柱为c18柱；流动相a为乙腈，流动相b为0.1wt％磷酸溶液，梯度洗脱。
7、在本专利技术提供的构建方法中，所述核桃仁饮片为核桃仁药材的炮制加工品；所述核桃仁标准汤剂是由核桃仁药材经炮制后制备而成的冻干粉；所述核桃仁配方颗粒是核桃仁药材经炮制并按标准汤剂
8、在本专利技术提供的构建方法中，所述溶解的溶剂优选为50vol％甲醇溶液，该溶剂条件下获得的色谱图峰形好，分离度适中。
9、在本专利技术提供的构建方法中，当所述供试品为核桃仁药材或核桃仁饮片时，溶解制备供试品溶液的具体过程优选包括：将供试品加水煎煮，放冷，滤过，滤液蒸干，蒸干残渣与溶剂混合溶解，滤过，得到的续滤液即为供试品溶液；其中，所述供试品与水的用量比优选为(0.8～1.2)g:30ml，更优选为1g:30ml；所述煎煮的时间优选为25～35min，更优选为28～32min，再优选为30min；所述溶剂与供试品的用量比优选为10ml:(0.8～1.2)g，更优选为10ml:1g。
10、在本专利技术提供的构建方法中，当所述供试品为核桃仁标准汤剂时，溶解制备供试品溶液的具体过程优选包括：将供试品与溶剂混合，超声辅助溶解，放冷，摇匀，滤过，得到的续滤液即为供试品溶液；其中，所述供试品与溶剂的用量比优选为(0.2～0.4)g:50ml，更优选0.3g:50ml；所述超声辅助的功率优选为580～620w，更优选为600w；所述超声辅助的频率优选为35～45khz，更优选为40khz；所述超声辅助的时间优选为25～35min，更优选为30min。
11、在本专利技术提供的构建方法中，当所述供试品为核桃仁配方颗粒时，溶解制备供试品溶液的具体过程优选包括：将供试品研细后与溶剂混合，超声辅助溶解，放冷，摇匀，滤过，得到的续滤液即为供试品溶液；其中，所述供试品与溶剂的用量比优选为(0.2～0.4)g:20ml，更优选0.3g:20ml；所述超声辅助的功率优选为580～620w，更优选为600w；所述超声辅助的频率优选为35～45khz，更优选为40khz；所述超声辅助的时间优选为25～35min，更优选为30min。
12、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，所述梯度洗脱具体过程优选为：
13、0～5min，a相：2vol％，b相：98vol％；
14、5～13min，a相：2～10vol％，b相：98～90vol％；
15、13～17min，a相：10～13.5vol％，b相：90～86.5vol％；
16、17～24min，a相：13.5～19.5vol％，b相：86.5～80.5vol％；
17、24～30min，a相：19.5～25vol％，b相：80.5～75vol％。
18、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，流动相的流速优选为0.3ml/min，在此流速条件下获得的色谱图峰形较好，分离度适中。
19、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，检测波长优选为254nm，在此检测波长条件下获得的色谱图的色谱峰信息量较大，基线更平稳。
20、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，进样量优选为1μl。
21、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，色谱柱中的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
22、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，所述色谱柱的柱温优选为25℃，在此柱温条件下获得的色谱图的峰形较为对称，分离度较好，出峰较完全。
23、在本专利技术提供的构建方法中，进行所述高效液相色谱法测定时，理论板数按鞣花酸峰计算应不低于5000。
24、在本专利技术提供的构建方法中，优选还包括以下步骤：
25、将核桃仁对照药材溶解，得到对照药材参照物溶液；将没食子酸溶解，得到没食子酸对照品参照物溶液；将鞣花酸溶解，得到鞣花酸对照品参照物溶液；
26、将所述对照药材参照物溶液和对照品参照物溶液采用高效液相色谱法测定，得到参照物的色谱图；并根据所述参照物的色谱图对供试品的hplc特征图谱的成分进行定性。
27、在本专利技术提供的构建方法中，溶解制备所述对照药材参照物溶液的具体过程优选包括：将核桃仁对照药材加水煎煮，放冷，滤过，滤液蒸干，蒸干残渣与溶剂混合溶解，滤过，得到的续滤液即为对照药材参照物溶液；其中，所述核桃仁对照药材与水的用量比优选为(0.8～1.2)g:30ml，更优选为1g:30ml；所述煎煮的时间优选为25～35min，更优选为28～32min，再优选为30min；所述溶剂优选为50vol％甲醇溶液；所述溶剂与核桃仁对照药材的用量比优选为10ml:(0.8～1.2)g，更优选为10ml:1g。
28、在本专利技术提供的构建方法中，溶解制备所述没食子酸对照品参照物溶液的具体过程优选包括：将没食子酸与溶剂混合，得到没食子酸对照品参照物溶液；其中，所述溶剂优选为甲醇；所述没食子酸与溶剂的用量比优选为(10～30)μg:1ml，更优选为20μg:1ml。
29、在本专利技术提供的构建方法中，溶解制备所述鞣花酸对照品参照物溶液的具体过程优选包括：将鞣花酸与溶剂混合，得到鞣花酸对照品参照物溶液；其中，所述溶剂优选为甲醇；所述鞣花酸与溶剂的用量比优选为(30～70)μg:1ml，更优选为50μg:1ml。
30、在本专利技术提供的构建方法中，优选还包括以下步骤：
31、采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对核桃仁药材的hplc特征图谱的相似度进行评价，得到由6个特征峰构成的核桃仁药材的hplc标本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种核桃仁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒HPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述溶解的溶剂为50vol％甲醇溶液。
4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件还包括：流动相的流速为0.3mL/min；检测波长为254nm；进样量为1μL；柱温25℃；理论板数按鞣花酸峰计算不低于5000。
5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：
7.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：
8.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：
9.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，还包括以下步骤：
10.一种核桃仁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的鉴别方法，其特征在于，采用权利要求1～9任一项所述的构建方
...【技术特征摘要】
1.一种核桃仁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒hplc特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述溶解的溶剂为50vol％甲醇溶液。
4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件还包括：流动相的流速为0.3ml/min；检测波长为254nm；进样量为1μl；柱温25℃；理论板数按鞣花酸峰计算不低于5000。
5.根据权利要求1所述的构建...
【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，周靖惟，彭文陈，张林，罗嫚娟，毛晴，林冰雪，黄宇，仰莲，费文波，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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