一种灭活干酪乳杆菌IOB-P9后生元粉在降糖方面的应用制造技术

本申请提供一种灭活干酪乳杆菌IOB

【技术实现步骤摘要】
一种灭活干酪乳杆菌IOB
‑
P9后生元粉在降糖方面的应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其是一种灭活的干酪乳杆菌IOB
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P9及其后生元粉在降糖方面的应用。

技术介绍

[0002]糖尿病是当前威胁全球人类健康的最重要的非常染性疾病（NCD） 之一，根据国际糖尿病联盟（IDF）统计，2011 年全球糖尿病患者人数已达 3.7 亿，其中 80%在发展中国家，估计到 2030 年全球将有近 5.5 亿糖尿病患者。2011 年全球共有 460 万人死于糖尿病，当年糖尿病的全球医疗花费达 4650 亿美元。
[0003]糖尿病是一个终身疾病，目前医学水平无法根除治愈，需要患者终身用药和治疗。早期糖尿病往往症状不明显，不易被患者察觉，因此早期糖尿病以干预生活方式为主。带病生存是所有糖尿病人群的现状，因此寻找到一种能够缓解糖尿病、延缓并发症的发生进程的产品迫在眉睫，研究替代传统药物治疗糖尿病的方法尤为重要。
[0004]目前一些关于干酪乳杆菌的功能研究主要涉及以下几个方面：CN201910259094.7干酪乳杆菌菌株及其应用，主要应用于抗菌和消炎；CN201610809341.2 一种新型干酪乳杆菌及其应用，主要具备抗菌、抗氧化、改善胃肠道健康、提高机体免疫力的功效；CN202010135872.4公开了包含干酪乳杆菌在内的一种用于改善糖尿病的复合益生菌；CN202010424363.3公开了一种用于预防辅助治疗Ⅱ型糖尿病的干酪乳杆菌。未见有灭活型的干酪乳杆菌发酵后生元粉在降糖方面应用报道。本专利技术提供了一种灭活的干酪乳杆菌 IOB
‑
P9及其后生元粉在降糖方面的应用，并对糖尿病的作用效果，具有重要的研究意义，有利于开发一款能够缓解糖尿病病症且不损害健康的产品，并为之提供思路。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了一种灭活的干酪乳杆菌IOB
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P9及其后生元粉的制作工艺及其在降糖、和改善糖尿病人血脂代谢紊乱方面的应用效果。
[0006]本专利技术使用的干酪乳杆菌IOB
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P9是自主筛选获得，此菌株已经进行了菌株保藏和理化指标的检测，一种干酪乳杆菌IOB
‑
P9，该菌株已于2021年12月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24195，分类命名为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）。
[0007]为了解决以上问题，本专利技术的技术方案如下：本专利技术使用的菌种为干酪乳杆菌IOB
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P9；该菌株进行了细菌鉴定检测，菌落为白色、圆形、表面湿润、不透明、边缘整齐的菌落。
[0008]本专利技术使用的活化培养基为1~3%的大豆粉。
[0009]本专利技术使用的固态发酵培养基为大豆粉，料水比为1：1~2。
[0010]将干酪乳杆菌IOB
‑
P9从菌种冻存管中取出，接种至活化培养基中，接种比例为106~107CFU/mL，菌种活化的条件为：培养温度为37
±
2℃，培养时间为20
±
2h，密闭培养，活化
好的菌种即为种子液。
[0011]将活化好的种子液，接种到固态发酵培养中，接种量为固态培养基干重的1~5%，37
±
2℃培养24~48
±
2h后，将培养后的发酵物进行高温烘干，烘干温度为55
±
2℃，烘干水分含量控制在≤10%，即可获得灭活型的IOB
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P9的发酵后生元粉。
[0012]有益效果本专利技术获得的干酪乳杆菌IOB
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P9的后生元粉，能够有效延缓、控制Ⅱ型糖尿病，并可作为糖尿病人的日用性产品。
附图说明
[0013]图1 种子生长曲线；图2 不同组别血糖值变化；图3 不同组别糖耐量的变化；图4 不同组别小鼠肝糖原含量；图5 不同组别小鼠TC、HDL
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c、LDL
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c、TG的变化。
[0014]所述干酪乳杆菌IOB
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P9，该菌株已于2021年12月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.24195，分类命名为干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）。
具体实施方式
[0015]实施例1 灭活干酪乳杆菌IOB
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P9后生元粉的制备1 种龄的确定将冻存管中的菌种接种至斜面培养基中，并放置到37
±
2℃培养，观察不同培养时间的菌落形态，菌体特征。
[0016]斜面培养基使用的是MRS培养基，其配方为蛋白胨10.0g，牛肉膏5.0g，酵母粉4.0g，葡萄糖20.0g，吐温80 1.0mL，磷酸氢二钾（7H2O）2.0，乙酸钠（3H2O）5.0g，柠檬酸三铵2.0g，硫酸镁（7H2O）0.2，硫酸锰（4H2O）0.05，琼脂15.0g，pH=6.2
±
0.2，加水量为1L。
[0017]培养要求斜面种子个体均匀，形态一致，粗壮，培养时间为24h的斜面种子较符合条件，所以确定斜面种子的最佳培养时间为24h。
[0018]2 活化培养基种龄的确定取一环新鲜的斜面菌种接种于装有25mL 2%大豆粉的瓶子中，37
±
2℃，密闭静置培养，于不同培养时间取样镜检，测定活菌浓度，结果如图1所示.由图1和表2所知，培养时间16
‑
20h，菌体处于对数生长期的后期，此时菌体活力旺盛，浓度较高，故选择活化种子的最佳种龄为16
‑
20h。
[0019]3 发酵培养基的确定分别采用干酪乳杆菌IOB
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P9在固体培养基上能获得的最高活菌数作为菌种生长活力的判断指标。
[0020]最佳料水比为1：1.75，菌种活性最高为9.7
×
109CFU/g。
[0021]在以上实验的基础上，进行接种量的实验。
[0022]最佳的接种量为5
×
107CFU/mL，最高活性为8.9
×
109CFU/g。
[0023]在以上实验的基础上，进行固态发酵培养时间的实验。
[0024]最佳培养时间为36h，最高的活菌数为9.7
×
109CFU/g。
[0025]综上所述，斜面种子的最佳培养时间为24h，活化种子的最佳种龄为16
‑
20h，最佳料水比为1：1.75，最佳的接种量为5
×
107CFU/mL，最佳固态发酵培养时间为36h。
[0026](1)按照最佳的发酵条件进行实验，最终获得发酵样品，将培养后的发酵物进行高温烘干，烘干温度为55本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种灭活型的IOB
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P9的发酵后生元粉用于制备缓解糖尿病制品的应用，其特征在于干酪乳杆菌IOB
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P9保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24195。2.如权利要求1所述灭活型的IOB
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P9的发酵后生元粉的制备方法，其特征在于将活化好的干酪乳杆菌IOB
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P9种子液，接种到固态发酵培养中，然后将培养后的发酵物进行高温烘干，烘干水分含量控制在≤10%，即可获得灭活型的IOB
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P9的发酵后生元粉。3.如权利要求2所述干酪乳杆菌IOB
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P9的发酵后生元粉的制备方法，其特征在于，其中接种量为固态培养基干重的1~5%，培养温度：37
±
2℃，培养时间：24~48
±
2h。4....

【专利技术属性】
技术研发人员：韩雪梅，梁武，王海宽，
申请(专利权)人：天津创源生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：