一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法及其培养基组合技术

本发明专利技术公开了一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法及其培养基组合，涉及细胞分化技术领域。该方法特点是利用酸碱度的调节改变细胞命运，包括采用酸性条件来诱导干细胞向心肌方向分化。本发明专利技术详细阐述了该方法的具体操作步骤，并对分化的心肌细胞进行了鉴定和功能分析。为人多能干细胞来源的心肌细胞的产生提供新思路。新思路。新思路。

【技术实现步骤摘要】
一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法及其培养基组合


[0001]本专利技术涉及细胞分化
，具体而言，涉及一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法及其培养基组合。

技术介绍

[0002]人类多能干细胞(hPSCs)可以分化为人体内的所有细胞类型，是研究人类胚胎发育的重要模型系统。通过hPSC分化产生的特定细胞类型在细胞治疗，药物筛选和疾病模型研究中有较广的应用前景。
[0003]心肌细胞具有不可再生性，因此，由hPSC分化产生的心肌细胞为心脏疾病的再生修复以及药物筛选提供了材料。目前常用的小分子抑制剂诱导心肌细胞的方法效率不稳定，并且费用较高，不利于大规模生产。
[0004]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法及其培养基组合。
[0006]本专利技术是这样实现的：
[0007]第一方面，本专利技术实施例提供了一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法，其包括以下步骤：采用第一分化培养基将干细胞诱导分化至中胚层；使用第二分化培养基对所述本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种诱导干细胞分化为心肌细胞的方法，其特征在于，其包括以下步骤：采用第一分化培养基将干细胞诱导分化至中胚层；使用第二分化培养基对所述中胚层进行诱导分化，所述第二分化培养基中添加有6～10mmol/L酸或在诱导分化的过程中添加酸使得酸在第二分化培养基中的终浓度为6～10mmol/L。2.根据权利要求1所述的诱导干细胞分化为心肌细胞的方法，其特征在于，所述酸包括：盐酸和乳酸中的至少一种；优选地，所述第二分化培养基的pH为6.2～6.9；优选地，所述第二分化培养基由在基础分化培养基中添加所述酸配制获得；优选地，所述第二分化培养基中还添加有WNT抑制剂，或在第二分化培养基诱导培养细胞的过程中添加WNT抑制剂；优选地，所述WNT抑制剂为IWP
‑
2、IWR
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1和XAV939中的任意一种；优选地，当WNT抑制剂为IWP
‑
2时，所述WNT抑制剂在第二分化培养基中的终浓度为3～5μmol/L。3.根据权利要求2所述的诱导干细胞分化为心肌细胞的方法，其特征在于，采用第二分化培养基对所述中胚层进行诱导分化的时长为5～7天；优选地，当所述方法为在诱导分化的过程中添加酸使得酸在第二分化培养基中的终浓度为6～10mmol/L时，酸的添加时间为采用第二分化培养基对所述中胚层进行诱导分化的第1～6天；当所述方法为在第二分化培养基诱导培养细胞的过程中添加WNT抑制剂时，WNT抑制剂的添加时间为采用第二分化培养基对所述中胚层进行诱导分化的第1～3天。4.根据权利要求2所述的诱导干细胞分化为心肌细胞的方法，其特征在于，所述基础分化培养基的成分包括：DMEM/F12、L
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抗坏血酸
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磷酸镁、钠硒、转铁蛋白、化学成分明确的脂质浓缩液以及青链霉素中的至少一种；优选地，所述基础分化培养基中，L
‑
抗坏血酸
‑2‑
磷酸镁的终浓度为50～80mg/L，钠硒的终浓度为10～20μg/L，转铁蛋白的终浓度为1～20mg/L，青链霉素的终浓度为1～20U/mL。5.根据权利要求1～4任一项所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国凯，刘蔚蔚，
申请(专利权)人：澳门大学，
类型：发明
国别省市：