【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】间皮素CAR及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求于2019年5月16日提交的美国临时申请号：62/848,983和2020年2月13日提交的美国临时申请号：62/975,966的优先权，其各自的内容通过引用以其整体并入，并且要求每个所要求的优先权。
[0003]序列表
[0004]本申请包含序列表，该序列表是通过EFS
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Web以ASCII格式提交的，在此通过引用整体并入。ASCII副本创建于2020年5月13日，命名为0727341041SL_ST25.TXT，大小为144,318字节。
[0005]本公开主题提供用于增强对癌症和病原体的免疫应答的方法和组合物。它涉及特异性靶向人间皮素的嵌合抗原受体(CAR)，以及包含这类CAR的免疫应答细胞。本公开的靶向间皮素的CAR具有增强的免疫激活特性，包括抗肿瘤活性，同时具有最小化CAR诱导的毒性和免疫原性的特征。
技术介绍
[0006]基于细胞的免疫治疗是一种具有治愈癌症潜力的疗法。可以通过引入编码对选择的抗原特异性的人工或合成抗原受体(称为嵌合抗原受体(CAR))的遗传物质对T细胞和其他免疫细胞进行修饰以靶向肿瘤抗原。使用CAR的靶向T细胞疗法最近在治疗一些血液系统恶性肿瘤方面取得临床成功。然而，将表达CAR的T细胞疗法用于实体瘤存在一些障碍，必须克服这些障碍才能实现临床益处。恶性细胞适应产生免疫抑制微环境以保护自己免受免疫识别和清除。这种肿瘤微环境对涉及刺激免疫反应的治疗方法提出挑战，例如靶...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种多肽组合物，其包括：i)嵌合抗原受体(CAR)，其包括：(a)胞外抗原结合结构域，其包括：重链可变区，其包含由SEQ ID NO:76所示氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:77所示氨基酸序列组成的CDR2、和由SEQ ID NO:78所示氨基酸序列组成的CDR3；以及轻链可变区，其包含由SEQ ID NO:79所示氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:80所示氨基酸序列组成的CDR2、和由SEQ ID NO:81所示氨基酸序列组成的CDR3，(b)胞内信号传导结构域，其包含修饰的CD3ζ多肽，所述修饰的CD3ζ多肽包含ITAM2变体和ITAM3变体，其中所述ITAM2变体和ITAM3变体中的每一个均包含两个功能丧失突变；和ii)程序性死亡1的显性负形式(PD
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1DN)，其包括：(a)程序性死亡1(PD
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1)的胞外结构域的至少一部分，其包含配体结合区，和(b)第一跨膜结构域。2.根据权利要求1所述的多肽组合物，其中所述CAR的胞外抗原结合结构域以约1nM至约25nM的EC50值特异性结合人间皮素。3.根据权利要求1或2所述的多肽组合物，其中所述CAR的胞外抗原结合结构域包含单链可变片段(scFv)、任选交联的Fab、或F(ab)2。4.根据权利要求3所述的多肽组合物，其中所述CAR的胞外抗原结合结构域包含人scFv。5.根据权利要求1
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4中任一项所述的多肽组合物，其中所述CAR的胞外抗原结合结构域识别间皮素表达水平为约1000或更多间皮素结合位点/细胞的人间皮素。6.根据权利要求1
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5中任一项所述的多肽组合物，其中所述重链可变区包含与SEQ ID NO:82所示氨基酸序列具有至少约80％同源性或同一性的氨基酸序列。7.根据权利要求1
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6中任一项所述的多肽组合物，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO:82所示氨基酸序列。8.根据权利要求1
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7中任一项所述的多肽组合物，其中所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:83所示氨基酸序列具有至少约80％同源性或同一性的氨基酸序列。9.根据权利要求1
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8中任一项所述的多肽组合物，其中所述轻链可变区包含SEQ ID NO:83所示氨基酸序列。10.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的多肽组合物，其中所述重链可变区包含与SEQ ID NO:82所示氨基酸序列具有至少约80％同源性或同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:83所示氨基酸序列具有至少约80％同源性或同一性的氨基酸序列。11.根据权利要求1
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10中任一项所述的多肽组合物，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO:82所示氨基酸序列，且所述轻链可变区包含SEQ ID NO:83所示氨基酸序列。12.根据权利要求1
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11中任一项所述的多肽组合物，其中所述CAR的胞外抗原结合结构域包含重链可变区和轻链可变区之间的接头。13.根据权利要求1
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12中任一项所述的多肽组合物，其中在所述胞外抗原结合结构域的N端共价连接一前导物。14.根据权利要求13所述的多肽组合物，其中所述前导物包含CD8多肽。15.根据权利要求14所述的多肽组合物，其中所述CD8多肽由SEQ ID NO:71所示氨基酸
序列组成。16.根据权利要求1
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15中任一项所述的多肽组合物，其中PD
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1的胞外结构域的所述至少一部分包含SEQ ID NO:48的氨基酸21至165。17.根据权利要求1
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16中任一项所述的多肽组合物，其中PD
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1DN的第一跨膜结构域包含CD8多肽、CD28多肽、CD3ζ多肽、CD4多肽、4
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1BB多肽、OX40多肽、CD166多肽、CD166多肽、CD8a多肽、CD8b多肽、ICOS多肽、ICAM
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1多肽、CTLA
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4多肽、CD27多肽、CD40/My88肽、NKGD2肽、或其组合。18.根据权利要求17所述的多肽组合物，其中所述PD
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1DN的第一跨膜结构域包含CD8多肽。19.根据权利要求18所述的多肽组合物，其中包含于所述PD
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1DN的第一跨膜结构域中的CD8多肽包含SEQ ID NO:86的氨基酸137至207。20.根据权利要求1
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28中任一项所述的多肽组合物，其中所述PD
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1DN包含SEQ ID NO:48的氨基酸21至165和SEQ ID NO:86的氨基酸137至207。21.根据权利要求1
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20中任一项所述的多肽组合物，其中所述两个功能丧失突变中的每一个都位于酪氨酸氨基酸残基处。22.根据权利要求1
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21中任一项所述的多肽组合物，其中所述ITAM2变体包含SEQ ID NO:29所示氨基酸序列或由其组成。23.根据权利要求1
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22中任一项所述的多肽组合物，其中所述ITAM3变体包含SEQ ID NO:33所示氨基酸序列或由其组成。24.根据权利要求1
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23中任一项所述的多肽组合物，其中所述修饰的CD3ζ多肽包含天然ITAM1。25.根据权利要求24所述的多肽组合物，其中所述天然ITAM1包含SEQ ID NO:23所示氨基酸序列或由其组成。26.根据权利要求1
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25中任一项所述的多肽组合物，其中所述修饰的CD3ζ多肽包含SEQ ID NO:35所示氨基酸序列或由其组成。27.根据权利要求1
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26中任一项所述的多肽组合物，其中所述PD
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1DN缺少胞内结构域。28.根据权利要求1
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27中任一项所述的多肽组合物，其中所述CAR还包含第二跨膜结构域。29.权利要求28所述的多肽组合物，其中所述CAR的第二跨膜结构域包含CD8多肽、CD28多肽、CD3ζ多肽、CD4多肽、4
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1BB多肽、OX40多肽、CD166多肽、CD166多肽、CD8a多肽、CD8b多肽、ICOS多肽、ICAM
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1多肽、CTLA
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4多肽、CD27多肽、CD40/My88肽、NKGD2肽、或其组合。30.根据权利要求28或29所述的多肽组合物，其中所述CAR的第二跨膜结构域包含CD28多肽。31.根据权利要求1
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30中任一项所述的多肽组合物，其中所述CAR的胞内信号传导结构域还包含共刺激信号传导区。32.根据权利要求31所述的多肽组合物，其中所述共刺激信号传导区包含CD28多肽、4
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1BB多肽、OX40多肽、ICOS多肽、DAP
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10多肽、CD27多肽、CD40/My88多肽、NKGD2多肽、或其组合。33.根据权利要求31或32所述的多肽组合物，其中所述共刺激信号传导区包含CD28多
肽。34.根据权利要求1
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33中任一项所述的多肽组合物，其中所述CAR包含SEQ ID NO:56所示氨基酸序列。35.一种免疫应答细胞，其包含权利要求1
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34中任一项所述的多肽组合物。36.根据权利要求35所述的免疫应答细胞，其中所述PD
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1DN和/或所述CAR为重组表达。37.根据权利要求35或36所述的免疫应答细胞，其中所述PD
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1DN和/或所述CAR由载体表达。38.根据权利要求35
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37中任一项所述的免疫应答细胞，其中所述免疫应答细胞选自T细胞、自然杀伤(NK)细胞和从中可分化淋巴细胞的多能干细胞。39.根据权利要求38所述的免疫应答细胞，其中所述免疫应答细胞为T细胞。40.根据权利要求39所述的免疫应答细胞，其中所述T细胞选自细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞和自然杀伤T(NKT)细胞。41.根据权利要求38所述的免疫应答细胞，其中所述多能干细胞为胚胎干细胞或诱导多能干细胞。42.根据权利要求35
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41中任一项所述的免疫应答细胞，其中所述免疫应答细胞是自体的。43.根据权利要求35
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41中任一项所述的免疫应答细胞，其中所述免疫应答细胞是同种异体的。44.一种药物组合物，其包含有效量的权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：纪念斯隆凯特琳癌症中心，
类型：发明
国别省市：
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