一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法技术

技术编号:33664430 阅读:63 留言:0更新日期:2022-06-02 20:46
本发明专利技术公开了一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法,纯化方法采用离子交换工艺,包括以下步骤:步骤一:在制备间配制1M NaOH溶液、2M NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液;步骤二:将步骤一中制备的溶液存储至三种缓冲液配制罐中并转移至纯化柱层析间;步骤三:NaOH溶液、NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液分别通入除泡器,经除泡器进入纯化仪接口,预先通入NaOH溶液作为缓冲液对纯化柱进行冲洗平衡,NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液作为洗脱液;步骤四:将反应产物泵入纯化仪,通过缓冲液和洗脱液将反应产物进行离子交换,杂质分离,得到预成品产物并分装至收集袋;步骤五:将预成品产物通过超滤膜进行脱盐处理,即可,使整体纯化效果好。使整体纯化效果好。

【技术实现步骤摘要】
一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法


[0001]本专利技术涉及核酸提取纯化
,具体涉及一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法。

技术介绍

[0002]药用核酸广泛应用于小核酸药物开发和新型疫苗佐剂的开发。药物发展大致可分为三个阶段,分别为:小分子药物、蛋白抗体药物、核酸药物。近些年,以核酸治疗为技术基础的第三代药物发展迅猛,核酸药物的特点在于它们可以直接与致病基因结合并阻止其翻译,从而防止致病蛋白质生产,较小分子药物和蛋白抗体药物,核酸药物能够精准制导,直达靶点,且易于工业化放大生产。
[0003]小核酸药物逐渐成为生物制药领域必争之地,采用化学合成技术生产药用核酸。基本原理为:核酸分子的基本骨架是相邻核苷酸间的3
’→5’
磷酸二酯键,一个矛盾便是核苷酸为一个多官能基团的分子,且人工化学合成核酸分子必定是一个多步连续的反应,因此要求副反应尽可能的少,否则目的产物的产率以及纯化的难度会使合成失败。所以化学合成的基本过程便是在合成过程中尽可能的将不需要的基团暂时保护起来,在一轮偶联反应之后,再将上一轮基团上的保护基选择性的脱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法,其特征在于,纯化方法采用离子交换工艺,包括以下步骤:步骤一:在制备间配制1M NaOH溶液、2M NaCl溶液和1M磷酸氢二钠溶液;步骤二:将步骤一中制备的溶液存储至三种缓冲液配制罐中并转移至纯化柱层析间;步骤三:NaOH溶液、NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液分别通入除泡器,并经除泡器进入纯化仪接口,预先通入NaOH溶液作为缓冲液对纯化柱进行冲洗平衡,NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液作为洗脱液;步骤四:将反应产物泵入纯化仪,通过缓冲液和洗脱液将反应产物进行离子交换,实现杂质分离,得到预成品产物并分装至收集袋;步骤五:将预成品产物通过改性超滤膜进行脱盐处理。2.根据权利要求1所述的一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法,其特征在于,在步骤五中改性超滤膜的制备包括以下步骤:步骤一:将无机纳米TiO2粒子加入N、N

二甲基乙酰胺溶液中,对混合液超声分散15

25分钟,形成稳定的TiO2‑
DMAc溶液体系;步骤二:向TiO2‑
DMAc溶液体系中加入聚偏氟乙烯、聚丙烯酸和无水氯化锂粉末,并使搅拌机构以60r/min搅拌22

24小时,充分溶解,得到铸模液;步骤三:将铸模液导入脱泡罐中,在70℃条件下真空

90kPa静置8

10小时脱泡,备用;步骤四:将步骤三中制得的铸膜液均匀涂覆于玻璃板表面上,快速将涂有铸膜液的玻璃板浸入到40℃恒温水浴中使其分相形成薄膜,分相完毕后将薄膜取出置于去离子水中浸泡,陈化24h待用;步...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘宗文钱鑫余意占应强任俊招胡志鹏
申请(专利权)人:通用生物滁州有限公司
类型:发明
国别省市:

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