【技术实现步骤摘要】
一种快速高效的DNA 5
’
侧翼序列克隆方法
[0001]本专利技术属于侧翼序列克隆
,具体涉及一种快速高效的DNA 5
’
侧 翼序列克隆方法。
技术介绍
[0002]染色体步移技术(Genome Walking)是一种重要的分子生物学研究技术, 使用这种技术可以有效获取与已知序列相邻的5
’
端未知序列。染色体步移技术 主要有以下几方面的应用:
[0003]1.根据已知的基因或分子标记连续步移,获取人、动物和植物的重要调控基 因,可以用于研究结构基因的表达调控。如分离克隆启动子并对其功能进行研 究;
[0004]2.获取新物种中基因的非保守区域,从而获得完整的基因序列;
[0005]3.鉴定T
‑
DNA或转座子的插入位点,鉴定基因枪转基因法等转基因技术所导 致的外源基因的插入位点等;
[0006]4.用于染色体测序工作中的空隙填补,获得完整的基因组序列;
[0007]5.用于人工染色体PAC、YAC和BAC的 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种快速高效的DNA 5
’
侧翼序列克隆方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以待测样本为模板,使用LAD引物组分别与SP1引物进行热不对称PCR扩增;所述LAD引物组至少需要4个LAD引物,且两两配对;(2)将(1)中扩增产物为模板,使用AC1依次与其余SP引物进行热不对称PCR扩增;所述SP引物组需要设计至少2个SP引物进行2组及以上扩增。2.如权利要求1所述的快速高效的DNA 5
’
侧翼序列克隆方法,其特征在于,还包括特异性扩增条带...
【专利技术属性】
技术研发人员:龚春梅,李佳阳,任洁洁,珠拉太,周文菲,唐磊,余有本,白娟,周杰,王文钊,
申请(专利权)人:西北农林科技大学,
类型:发明
国别省市:
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