【技术实现步骤摘要】
1500ng/mL。
[0011]优选的,所述样品处理过程如下:
[0012]S1.在1.1mL的小管中,加入20μL空白活性炭吸附人尿液作为空白样品。对于标准曲线、质控、检测样品、系统适用性样品和平衡样品(必要时),加相应的20μL的基质样品。
[0013]S2.空白、标准曲线、质控、检测样品、系统适用性样品及平衡样品(必要时),在丙酮和100μL的0.1M碳酸氢钠溶液中加入80μL活性炭吸附人尿液和50μL的2mg/mL丹磺酰氯溶液,混匀约2min。
[0014]S3. 60℃恒温水浴30min
±
2min。
[0015]S4.每管加入400μL乙酸乙酯。
[0016]S5.混合约10分钟。
[0017]S6. 4C,4700转/分离心15分钟。
[0018]S7.将320μL上清液转移到新的0.65mL管中,室温下用氮气干燥。
[0019]S8.每孔加入150μL溶液,涡流混匀5min左右,20μL进入高效液相
‑
质谱仪分析。
[0020]优选的,所述将样品3
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Methyl Histamine Stock sol.1通过以上过程进行序列稀释最终可获得标准曲线定量下限样品STD 01,具体流程如图1所示。
[0021]优选的,所述质控工作液配制方法如下:将样品3
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Methyl Histamine Stock sol.2由权利要求4所示的流程进行序列稀释可获得定量下限质控样品LLOQ,具体流程如 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种检测尿液中甲基组胺的新型分析方法,其特征在于:所述尿液中甲基组胺检测技术方法原理如下:以往的方法学中,用于定量的标准曲线使用人尿液进行配制,由于本专利所描述的待测物为人尿液内源性物质,使用人尿液配制标准曲线将受到内源物质的强烈干扰。因此,也曾使用纯水或PBS缓冲液来代替,但是这些替代溶液的成分和人尿液的差异较大,人尿液和这些替代成分的基质效应有显著差异,导致在质谱仪中的响应信号存在偏差,最终定量结果不能真实反映尿液样品的实际浓度。2.根据权利要求1所述的一种检测尿液中甲基组胺的新型分析方法,其特征在于:所述在本方法中,使用活性炭对人尿液中的内源性N
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甲基组胺进行吸附去除,具体操作为,将人尿液和活性炭以1∶0.1(mL∶g,体积/质量)的比例混合,涡旋混匀,4000g离心20min;再取离心后的上清基质和活性炭以1∶0.1(mL/g,体积/质量)的比例混合,涡旋混匀,4000g离心15min,再经0.22μm滤膜过滤。得到活性炭吸附后的人尿液,此时内源性N
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甲基组胺已经去除,而尿液中其它主要组分依然保留。3.根据权利要求1所述的一种检测尿液中甲基组胺的新型分析方法,其特征在于:所述人尿液中N
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甲基组胺检测的样品处理原理为:使用丹磺酰氯作为衍生试剂,与N
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甲基组胺中的伯氨基团进行反应,生成的丹磺酰氯衍生化产物经过液液萃取,纯化得到富集的N
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甲基组胺样品。4.根据权利要求1所述的一种检测尿液中甲基组胺的新型分析方法,其特征在于:所述标准曲线使用活性炭吸附过的人尿液配制,工作液浓度分别为5.00,10.0,50.0,100,500,...
【专利技术属性】
技术研发人员:马克,高丹娜,张怀敬,王琦,何江,董菁,
申请(专利权)人:军科正源北京药物研究有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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