用DNA标签标记的基因过表达慢病毒质粒文库及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及质粒文库领域，具体涉及一种用DNA标签标记的慢病毒质粒文库及其制备方法和应用。本发明专利技术的慢病毒质粒文库包括多个慢病毒质粒，所述慢病毒质粒由5

【技术实现步骤摘要】
用DNA标签标记的基因过表达慢病毒质粒文库及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及质粒文库领域，具体涉及一种用DNA标签标记的基因过表达慢病毒质粒文库及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]生命科学领域中，基因敲除与过表达技术是研究基因功能的两种至关重要的手段。研究人员寻找与某个生物学过程或功能相关的未知基因靶点时，往往需要通过大规模地对多个候选基因进行敲除或过表达。而该方面传统的研究方式，通常需要依赖多孔板对每一个基因进行逐一敲除或过表达。
[0003]基于慢病毒质粒文库池(Pooled lenti
‑
viral plasmid library)的筛选技术，是利用慢病毒携带DNA序列整合到宿主细胞基因组的原理以及DNA测序追踪技术，可以在单孔/单管中实现对多个基因的敲除或过表达筛查。该技术通过控制慢病毒颗粒与被感染细胞数目之间的感染系数(MOI，一般MOI＝0.1
‑
0.5)，使同一管中的每个细胞在概率上尽可能只被一个慢病毒感染，从而实现每个细胞中尽可能的只敲除或过表达一个特定的基因。再通本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种慢病毒质粒文库，其特征在于，该慢病毒质粒文库包括多个慢病毒质粒，所述慢病毒质粒由5
’
端到3
’
端的顺序含有以下元件：筛选标记基因表达盒、一个基因ORF表达盒、通用序列和一个DNA标签序列，各个慢病毒质粒上的DNA标签序列不同；其中，所述基因ORF表达盒含有启动子和一个基因的ORF序列。2.根据权利要求1所述的慢病毒质粒文库，其中，所述基因ORF表达盒的启动子为EF
‑
1α启动子和/或T7启动子。3.根据权利要求1或2所述的慢病毒质粒文库，其中，所述筛选标记基因表达盒含有CMV启动子、GFP基因和嘌呤霉素基因。4.根据权利要求3所述的慢病毒质粒文库，其中，所述筛选标记基因表达盒还含有P2A信号剪切肽元件，所述P2A信号剪切肽元件位于GFP基因和嘌呤霉素基因之间。5.根据权利要求1
‑
4中任意一项所述的慢病毒质粒文库，其中，所述慢病毒质粒文库为含有人趋化因子受体基因的ORF序列的慢病毒质粒文库。6.根据权利要求5所述的慢病毒质粒文库，其中，所述基因的ORF序列选自：NM_001122951.3、NM_001296.5、NM_020311.3、NM_178445.2、NM_001295.3、NM_016602.3、NM_001123041.3、NM_001164680.2、XM_017005685.1、NM_005508.5、NM_000579.4、NM_004367.6、NM_001838.4、NM_001301714.2、NM_005201.4、NM_031200.3、NM_001130910.2、NM_001171174.1、NM_000634.3、NM_001557.4、NM_001142797.2、XM_005262256.3、XM_005262257.3、NM_001348056.2、NM_001348059.2、NM_001008540.2、NM_001716.5、...

【专利技术属性】
技术研发人员：傅征，武莹，韩连斌，李双，刘振欣，令狐玉婷，
申请(专利权)人：北京镁伽科技有限公司，
类型：发明
国别省市：