一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及其用途技术方案

本发明专利技术公开了一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及用途。所述基因元件包括依次连接的第一编码区、第二编码区和第三编码区；所述第一编码区包括第一荧光蛋白报告基因，所述第二编码区包括第二荧光蛋白报告基因，所述第三编码区包括第三荧光蛋白报告基因；所述第一荧光蛋白报告基因、第二荧光蛋白报告基因和第三荧光蛋白报告基因分别位于不同的阅读框中，以使仅一种荧光蛋白能正确表达。本发明专利技术的基因元件通过对目标DNA编辑结果进行实时监控，能确定最佳的编辑时间窗；通过对不同荧光发光细胞数量统计完成对目标DNA编辑结果的预测。此外，还能通过建立人源化细胞模型，进行疾病的基因治疗新技术的评估。基因治疗新技术的评估。

【技术实现步骤摘要】
一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及其用途


[0001]本专利技术涉及基因工程
，具体涉及一种荧光报告基因元件、基因编辑监测系统及其用途。

技术介绍

[0002]自2013年CRISPR
‑
Cas9系统首次成功用于哺乳动物细胞基因编辑以来(Cong et al.,2013；Mali et al.,2013)，世界各国的科学家积极探索将该技术应用于基因功能研究和基因治疗领域(Gao et al.,2018；Kuscu et al.,2017；Lee et al.,2019；Levy et al.,2020；Li et al.,2018；Liang et al.,2017；Liu et al.,2018；Rossidis et al.,2018；Ryu et al.,2018；Song et al.,2020；Villiger et al.,2018；Zeng et al.,2018)。例如，通过CRISPR
‑
Cas9诱导的非同源末端连接(NHEJ)可人为地制造蛋白功能缺失，或通过密码子提前终止引起无本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种荧光报告基因元件，其特征在于，所述基因元件包括依次连接的第一编码区、第二编码区和第三编码区；所述第一编码区包括第一荧光蛋白报告基因，所述第二编码区包括第二荧光蛋白报告基因，所述第三编码区包括第三荧光蛋白报告基因；所述第一荧光蛋白报告基因、第二荧光蛋白报告基因和第三荧光蛋白报告基因分别位于不同的阅读框中，以使仅一种荧光蛋白能正确表达。2.如权利要求1所述的基因元件，其特征在于，所述基因元件还包括第一切割元件、第二切割元件、第三切割元件和第四切割元件；所述第一荧光蛋白报告基因和第一切割元件位于所述第一编码区，所述第二切割元件、第二荧光蛋白报告基因和第三切割元件位于所述第二编码区，所述第四切割元件和第三荧光蛋白报告基因位于所述第三编码区。3.如权利要求2所述的基因元件，其特征在于，包括如下技术特征中的至少一项：A1)所述第一切割元件与所述第二切割元件串联；A2)所述第三切割元件和所述第四切割元件串联；A3)所述第一荧光蛋白报告基因、所述第二荧光蛋白报告基因和所述第三荧光蛋白报告基因之间互不相同。4.如权利要求2所述的基因元件，其特征在于，包括如下技术特征中的至少一项：B1)所述第一编码区的上游连接有启动子；优选地，所述启动子为真核启动子；B2)所述第一荧光蛋白报告基因、所述第二荧光蛋白报告基因、所述第三荧光蛋白报告基因分别独立选自TopazYFP、mCherry、TagBFP、CFP、GFP和RFP中的一种；B3)所述第一切割元件、所述第二切割元件、所述第三切割元件和所述第四切割元件为2A肽段。5.如权利要求4所述的基因元件，其特征在于，包括如下技术特征中的至少一项：C1)所述启动子选自CMV或CAG；C2)所述第一...

【专利技术属性】
技术研发人员：索伦，吴海波，边雪娇，张硕，吕祁峰，匡延平，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属第九人民医院，
类型：发明
国别省市：