一种与无精子症有关的分子标志物3-(3-羟基苯基)丙酸及其检测方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种与无精子症有关的分子标志物3

【技术实现步骤摘要】
一种与无精子症有关的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸及其检测方法和应用


[0001]本专利技术涉及一种与无精子症有关的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸及其检测方法和应用，属于分析化学及临床医学


技术介绍

[0002]据世界卫生组织(WHO)统计全世界约有15％的育龄夫妇遭受不育的困扰。我国由于人口基数大,新婚夫妇中不孕不育的患者人数远超过百万,因男性因素导致的不育高于50％。无精子症的发生率占男性不育症的10％
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20％。寻找与无精子症有关的生物标志以辅助或者替代精液参数分析非常迫切。男性科学的技术进步可有效弥补常规精液分析的不足,为无精子症的诊断提供了新的方法并且可为无精子症的发生机制提供新的视角。当务之急是提供一种对生育能力进行客观评估的方法。组学技术包含了基因组学、转录组学、蛋白组学和代谢组学。代谢组学是一种新兴的技术,可以用于疾病诊断的生物标志的发现并且可以揭示疾病发生的机制。代谢组学揭示了发生在基因、转录和蛋白层面之下的分子事件,被认为是最近接近疾病表型的组学。目前,无精子症的精浆代谢组改变仍然未知,精浆为精液的主要成分，精浆调节了精液的化学成分,是一种无创伤的样本,特别适合用来发现无精子症诊断和机制研究的生物标志。
[0003]目前代谢组学研究常用技术包括液相色谱
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质谱联用(LC
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MS)、气象色谱
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质谱联用(GC
‑r/>MS)及核磁共振技术(NMR)。核磁共振技术特点是对待测组分无破坏,样本前处理简单,但灵敏度较低；气相色谱
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质谱联用具有较好的灵敏度和重现性,但一般要采用衍生化方法对样本进行前处理,使得实验步骤变得复杂。而LC
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MS具有样本处理简单,灵敏度高,临床实用性强的特点.UPLC
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Q exactive MS是新一代高分辨质谱与超高效液相的组合,具有相比传统LC
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MS更强的灵敏度、特异度和稳定性。故而采用UPLC
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Q exactive MSS进行精浆代谢小分子的代谢组学分析,若能发现稳定的与特发性男性不育发病相关的特异精浆代谢小分子作为生物标志物,并研发相应的代谢小分子标志的UPLC
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Q exactive MS检测方法，将为男性生殖健康做出巨大贡献。

技术实现思路

[0004]本专利技术的一个目的在于提供一种与无精子症提供相关的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸。
[0005]本专利技术另一个目的是为将分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸用于无精子症诊断提供基于UPLC
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Q exactive MS的应用。
[0006]本专利技术再有一个目的是为上述分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸提供色谱质谱用检测和诊断试剂盒。
[0007]为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种无精子症相关的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸，所述分子标志物为3
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(3
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羟基苯基)丙酸。
[0008]本专利技术还提供一种使用如上所述的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸在制备以精液为检测样本的无精子症诊断或监测试剂中的应用。
[0009]本专利技术再提供一种使用如上所述的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸制备的无精子症诊断或监测试剂盒，包括：
[0010]3‑
(3
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羟基苯基)丙酸标准品；
[0011]内标A：肌酐﹑缬氨酸、烟酸、胸腺密啶、戊二酸、L
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苯基丙胺酸、N
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乙酰对氨基酚、马尿酸八种物质的氛标同位素内标；
[0012]内标B：十五烷酸的氩标同位素内标；
[0013]内标C：二十四烷酸的氛标同位素内标、配套Hypersil GOLDC18色谱柱：100mm
×
2.1mm，粒径1.9μm Thermo Scientific，Germany；
[0014]试剂A：含100％甲醇；
[0015]试剂B：含0.1％的甲酸的水；
[0016]试剂C：含0.1％的甲酸的乙腈；
[0017]试剂D：超纯水。
[0018]本专利技术又提供一种无精子症诊断或监测的UPLC
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Q exactive MS的方法，所述方法检测精液中的如上所述的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸。
[0019]本专利技术的目的是通过下列技术措施实现的：
[0020]与人类无精子症相关的3
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(3
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羟基苯基)丙酸，采用UPLC
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Q exactive MS方法检测上述代谢小分子进行无精子症的早期诊断。
[0021]所述的检测和诊断试剂盒，该试剂盒含有3
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(3
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羟基苯基)丙酸标准品。内标A：肌酐、缬氨酸、烟酸、胸腺密啶、戊二酸、L
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苯基丙胺酸、N
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乙酰对氨基酚、马尿酸八种物质的氩标同位素内标。内标B：十五烷酸的氛标同位素内标。内标C：二十四烷酸的氛标同位素内标。配套Hypersil GOLD C18色谱柱(100mm
×
2.1mm，粒径1.9μm Thermo Scientific,Germany)、试剂A(沉淀蛋白用，含100％甲醇)、试剂B(流动相用，含0.1％的甲酸的水)、试剂C(流动相用，含0.1％的甲酸的乙腈)，试剂D(复溶用，超纯水)。
[0022]本专利技术详细描述如下：
[0023]以标准操作程序(SOP)采集符合标准的精液样本﹐系统收集完整的人群基础信息和临床资料，并采用了基于UPLC
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Q exactive MS的代谢组学方法进行分析。
[0024]具体来说研究的实验方法主要包括以下几个部分：
[0025]一、研究对象选择和分组依据
[0026]纳入明确诊断的包括梗阻和非梗阻类型的无精子症80人和健康对照116人，共196人。
[0027]A组：健康对照组(80人)：
[0028]1.年龄在24至36岁之间；
[0029]2.体质指数在19至24之间；
[0030]3.生殖能力健康的男性，而且5
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8个月后有了健康的后代；
[0031]4.无全身重大疾病。
[0032]B组：无精子症疾病组(116人)：
[0033]1.年龄与对照组匹配；...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种无精子症相关的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸，其特征在于，所述分子标志物为3
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(3
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羟基苯基)丙酸。2.一种如权利要求1所述的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸在制备以精液为检测样本的无精子症诊断或监测试剂中的应用。3.一种使用如权利要求1所述的分子标志物3
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(3
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羟基苯基)丙酸制备的无精子症诊断或监测试剂盒，其特征在于，包括：3
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(3
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羟基苯基)丙酸标准品；内标A：肌酐﹑缬氨酸、烟酸、胸腺密啶、戊二酸、L

【专利技术属性】
技术研发人员：沙家豪，袁艳，陈敏健，杨晓玉，王嘉琛，姚莹，
申请(专利权)人：苏州南医大创新中心，
类型：发明
国别省市：