一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法技术

本发明专利技术公开了一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。本发明专利技术是以共价有机框架表面功能化固相微萃取整体柱作为固相微萃取柱，结合管内固相微萃取

【技术实现步骤摘要】
一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法


[0001]本专利技术属于分析化学领域，具体涉及一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。

技术介绍

[0002]苯二氮卓类新型毒品（BZD）是一类中枢神经系统抑制剂，具有抗焦虑、抗惊厥、抗肌肉松弛和镇静安定作用。BZD的作用机制是通过增强γ
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氨基丁酸的神经传递功能和突触抑制效应来发挥中枢神经抑制作用。过量使用 BZD 可引起头晕、嗜睡、便秘、心肺系统疾病以及记忆力减退等副作用，严重者可引起成瘾性甚至死亡。由于BZD价格低廉、易于获取和起效迅速，药物滥用现象日益增多。此外，安神保健品中 BZD的非法添加也会严重危害消费者身体健康。因此，对生物和食品样品中 BZD的含量监测对法医学鉴定、食品安全和药物分析具有重要意义。
[0003]固相微萃取（SPME）具有操作简便、萃取效率高和有机溶剂用量少等优点，是一种广泛应用的样品前处理方法。选择合适的吸附剂是SPME的核心，其对目标物的选择性及吸附效率是高效萃取目标物的关键指标。共价有机框架具有大的共轭结构，能够与苯二氮卓类化合物产生π
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π堆积作用与疏水相互作用。因此，本专利技术将共价有机框架与SPME技术相结合，开发了共价有机框架表面功能化整体柱，并将其作为SPME的吸附剂，结合管内固相微萃取
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高效液相色谱联用系统，开发了一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。实现了微量苯二氮卓类化合物在实际体液样品和饮料样品中的高效富集萃取与高灵敏在线检测。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。本专利技术是以共价有机框架表面功能化整体柱作为固相微萃取整体柱，结合管内固相微萃取
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高效液相色谱（In
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tube SPME
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HPLC）在线联用系统，建立一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。得益于整体柱表面的共价有机框架与苯二氮卓类化合物之间的疏水相互作用与π
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π堆积作用，实现了微量苯二氮卓类新型毒品在实际体液样品和饮料样品中的高效富集萃取与高灵敏在线检测。该固相微萃取方法可实现硝西泮，艾司唑仑，奥沙西泮，三唑仑，地西泮，氟硝西泮等常见苯二氮卓类化合物的高效富集与洗脱，并满足苯二氮卓类新型毒品高效检测要求。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法，其是以共价有机框架表面功能化整体柱作为固相微萃取整体柱，结合管内固相微萃取
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高效液相色谱在线联用系统得以构建。
[0006]其中，上述的共价有机框架表面功能化整体柱是以聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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co
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱作为基质整体柱，使用碱性对苯二胺溶液作为功能化试剂对其表面进行聚对苯二胺纤维功能化；再将亚胺型共价有机框架的反应液与乙酸水溶液的混合液注满整体柱，以聚对苯二胺纤维作为结合位点，在整体柱表面原位生成共价有机框架微球，制得共价有机框架表面功能化整体柱。
[0007]其中，上述的苯二氮卓类新型毒品包括硝西泮，艾司唑仑，奥沙西泮，三唑仑，地西泮和氟硝西泮。
[0008]上述一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法，包括以下步骤：1）共价有机框架表面功能化整体柱的制备：1. 聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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co
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）基质整体柱的制备：先将长度为33毫米，内径为2.1毫米的不锈钢空柱用甲醇冲洗20分钟，放入60℃烘箱烘干待用；基质整体柱的制备填料由300 mg甲基丙烯酸缩水甘油酯、100 mg乙二醇二甲基丙烯酸酯、480 mg 1,4
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丁二醇、120 mg N,N
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二甲基甲酰胺与1.2 mg偶氮二异丁腈组成，用旋涡混合器混匀后，超声15分钟；用注射器将配好的填料注入前述的不锈钢柱中，放入60℃水浴反应24小时；反应结束后，以甲醇为流动相，用液相色谱泵冲洗不锈钢柱约1小时，以去除床层内残留的致孔剂、未反应的单体以及反应生成的一些低聚物，即得到聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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co
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）基质整体柱;2. 聚对苯二胺纤维表面功能化：取2.1628 g对苯二胺与0.4 g氢氧化钠加入20 mL甲醇，用漩涡混合器震荡均匀，超声20分钟，得到1 mol/L碱性对苯二胺甲醇溶液，并将该溶液通过微量注射泵注入聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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co
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）基质整体柱中，注满密封后，常温反应24小时；反应结束后，先以甲醇为流动相，用液相色谱泵冲洗不锈钢柱1小时，再换成乙腈冲洗1小时，即完成基质整体柱的聚对苯二胺纤维表面功能化；3. 共价有机框架表面功能化固相萃取整体柱的制备：取14.06 mg的1,3,5
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三(4
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氨苯基)苯与11.17 mg的2,5
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二乙烯基
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1,4
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苯二甲醛，加入至5mL乙腈配置成共价有机框架反应液；再将共价有机框架反应液、12 mol/L乙酸水溶液与完成表面功能化的基质整体柱分别放入冰箱在4℃下预冷2小时，接着取1.0 mL共价有机框架反应液，加入60 μL12 mol/L乙酸水溶液，震荡混匀，用微量注射泵将其注入完成表面功能化的基质整体柱中，注满密封后，放入60℃水浴反应；1小时后将柱子取出自然冷却10分钟，按前述的方法从反方向再次注入共价有机框架反应液与乙酸水溶液的混合液，注满密封后，再次放入60℃水浴反应；重复上述操作3次；最后一次注入完毕后，不锈钢柱置于60℃水浴中反应12小时，使其充分反应；反应结束后，以乙腈为流动相，用液相色谱泵冲洗不锈钢柱2小时，即得到共价有机框架表面功能化固相萃取整体柱。
[0009]2）管内固相微萃取
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高效液相色谱（In
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tube SPME
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HPLC）在线联用系统的构建：所述的管内固相微萃取
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高效液相色谱在线联用系统由微萃取和分析两部分组成，结构如附图1所示。微萃取部分包括：一个六通阀（V1）、一台液相色谱输液泵（泵A）、0.5 mL定量环。分析部分包括：一台液相色谱输液泵（泵B）、一个六通阀（V2）、共价有机骨架表面功能化固相微萃取整体柱、C18 分析柱、二极管阵列检测器。
[0010]3）苯二氮卓类新型毒品在线联用检测：1. 平衡：首先，六通阀V1和V2都在LOAD位置。装载液通过泵A平衡共价有机骨架表
面功能化固相微萃取整体柱，流速为0.05 mL/min。流动相通过泵B直接经分析柱以获得色谱分离要求的稳定基线，流速为1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法，其特征在于：所述的检测方法是以共价有机框架表面功能化整体柱作为固相微萃取整体柱，结合管内固相微萃取
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高效液相色谱在线联用系统，建立的苯二氮卓类新型毒品的在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法。2.根据权利要求1所述的一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法，其特征在于：所述的共价有机框架表面功能化整体柱是以聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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co
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱作为基质整体柱，使用碱性对苯二胺溶液作为功能化试剂对其表面进行聚对苯二胺纤维功能化；再将亚胺型共价有机框架的反应液与乙酸水溶液的混合液注满整体柱，以聚对苯二胺纤维作为结合位点，在整体柱表面原位生成共价有机框架微球，制得共价有机框架表面功能化整体柱。3.根据权利要求1所述的一种苯二氮卓类新型毒品在线固相微萃取高效液相色谱联用检测方法，其特征在于：所述的苯二氮卓类新型毒品包括硝西泮，艾司唑仑，奥沙西泮，三唑仑，地西泮和氟硝西泮。4.一种制备如权利要求2所述的共价有机框架表面功能化固相微萃取整体柱的方法，其特征在于：包括以下步骤：1）聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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co
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）基质整体柱的制备：先将长度为33毫米，内径为2.1毫米的不锈钢空柱用甲醇冲洗20分钟，放入60℃烘箱烘干待用；基质整体柱的制备填料由300 mg甲基丙烯酸缩水甘油酯、100 mg乙二醇二甲基丙烯酸酯、480 mg 1,4
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丁二醇、120 mg N,N
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二甲基甲酰胺与1.2 mg偶氮二异丁腈组成，用旋涡混合器混匀后，超声15分钟；用注射器将配好的填料注入前述的不锈钢柱中，放入60℃水浴反应24小时；反应结束后，以甲醇为流动相，用液相色谱泵冲洗不锈钢柱约1小时，以去除床层内残留的致孔剂、未反应的单体以及反应生成的一些低聚物，即得到聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）基质整体柱;2）聚对苯二胺纤维表面功能化：取2.1628 g对苯二胺与0.4 g氢氧化钠加入20 mL甲醇，用漩涡混合器震荡均匀，超声20分钟，得到1 mol/L碱性对苯二胺甲醇溶液，并将该溶液通过微量注射泵注入聚（甲基丙烯酸缩水甘油酯
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乙二醇二甲基丙烯酸酯）基质整体柱中，注满密封后，常温反应24小时；反应结束后，先以甲醇为流动相，用液相色谱泵冲洗不锈钢柱1小时，再将流动相换成乙腈冲洗1小时，即完成基质整体柱的聚对苯二胺纤维表面功能化；3）共价有机框架表面功能化固相萃取整体柱的制备：取14.06 mg的1,3,5
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【专利技术属性】
技术研发人员：王家斌，孙健，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：