一种乳腺癌远处转移相关标志物的筛选方法及其筛选得到的标志物技术

本发明专利技术公开了一种乳腺癌远处转移相关标志物的筛选方法及其筛选得到的标志物，该筛选方法包括：步骤S1，收集样品；步骤S2，鉴定样本中的外泌体蛋白：采用液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种乳腺癌远处转移相关标志物的筛选方法及其筛选得到的标志物


[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种乳腺癌远处转移相关标志物的筛选方法及其筛选得到的标志物。

技术介绍

[0002]乳腺癌(BC)是全世界最常见的癌症之一，占女性癌症的30％。自1970年代中期以来，由于治疗方案的改进，包括化疗、免疫治疗和靶向治疗的发展，死亡率长期下降。但在过去十年中，临床结果的改善放缓，远处转移仍然是死亡率的主要原因。早期发现和动态评估乳腺癌患者的转移状态对于治疗和对治疗反应中癌症演变的纵向分析具有重要价值。
[0003]目前，临床检测乳腺癌转移通常通过组织活检的方法进行，但组织活检需进行组织切除，对患者身体产生伤害；且切除组织时，手术器械易刮碰病发部位，处理不当癌组织更易发生扩散。

技术实现思路

[0004]为解决现有技术中检测乳腺癌患者是否发生远处转移需进行组织切除，对患者身体产生伤害的问题，本专利技术提供了一种可用于乳腺癌转移检测的外泌体标志物，无须实施手术组织切除即可判断患者乳腺癌转移病情，为乳腺癌的转移检测提供了一种新途径。
[0005]为了达到上述目的，本专利技术提供了一种乳腺癌远处转移相关标志物的筛选方法，包括：
[0006]步骤S1，收集样品：分别从乳腺导管内原位癌患者和乳腺癌远处转移患者的血浆中提取外泌体蛋白；
[0007]步骤S2，鉴定样本中的外泌体蛋白：采用液相色谱
‑
质谱联用的方法对所述外泌体蛋白进行分离、分析，得到不同患者血浆内外泌体蛋白的表达丰度；
[0008]步骤S3，获得乳腺癌远处转移相关标志物：对步骤S2得到的外泌体蛋白表达丰度数据进行t检验分析，计算两类样本间的差异倍数，若差异倍数大于1.5，则说明该外泌体蛋白为乳腺癌远处转移相关标志物。
[0009]可选的，所述差异倍数包括：第一差异倍数，所述第一差异倍数＝该外泌体蛋白在乳腺癌远处转移患者中表达的量/该外泌体蛋白在乳腺导管内原位癌患者中表达的量。
[0010]可选的，所述乳腺癌远处转移包括：乳腺癌靶向肺转移、乳腺癌靶向肝转移和乳腺癌靶向骨转移三种类型。
[0011]可选的，所述差异倍数包括：第二差异倍数，所述第二差异倍数＝该外泌体蛋白在其中一种类型患者中表达的量/该蛋白分别在其他类型患者体内表达的量。
[0012]可选的，所述差异倍数大于2。
[0013]本专利技术还提供了一组根据上述筛选方法筛选得到的标志物，以获得乳腺癌远处转移患者的显著过表达蛋白，包括：
[0014]FLNA、VTN、PKM、G6PD、TALDO1、FBP1、LDHB、PDHB、ACACA、HSD17B12、HACD3、CPB2、SERPINA1、CFH、C7、SERPIND1、F10、F12、SERPINF2、Serpin1、F2、TFPI、KNG1、ACACB、PPP4C和GP1BA中的至少一种。
[0015]本专利技术还提供了一组根据上述筛选方法筛选得到的标志物，以获得乳腺癌靶向肺转移、乳腺癌靶向肝转移和乳腺癌靶向骨转移患者各自的显著过表达蛋白，包括：
[0016]CFD、C6、SERPING1、ITGB3、ITGA2B、VCL、TUBBB、TUBB2A和TUBB中的至少一种；
[0017]ACADVL、TECR、ACSL5、GLB1、PGM5、PGM1、AMY2A、AMY1A和AMY2B中的至少一种；
[0018]HSPH1、STT3A、RAD23A、P4HB、SEC23B、RPA1、RAD23A和CUL4B中的至少一种。
[0019]优选地，上述标志物能够制备乳腺癌远处转移检测产品。
[0020]具体地，该检测产品通过检测待测样品中标志物的表达量，来检测乳腺癌是否发生远处转移，该待测样品为血浆。
[0021]优选地，本专利技术还提供了一种乳腺癌远处转移检测产品，该检测产品包括：检测上述标志物的表达水平的相关试剂。
[0022]与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：
[0023](1)本专利技术通过体外实验鉴定乳腺导管内原位癌(DCIS)患者和乳腺癌远处转移(D
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MET)患者之间小细胞外囊泡(sEV)的差异，得到D
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MET患者体内显著过表达的sEVs蛋白，这些sEVs蛋白能够用于检测乳腺癌患者的癌组织是否发生远处转移，为乳腺癌的转移检测提供了一种新途径。
[0024](2)常见的乳腺癌远处转移通常为：乳腺癌靶向肺转移、乳腺癌靶向肝转移、乳腺癌靶向骨转移。本专利技术进一步将乳腺癌远处转移患者细分，鉴定上述三类常见远处转移患者体内的sEVs蛋白差异，得到三种常见远处转移患者体内显著过表达sEVs蛋白，可进一步对乳腺癌远处转移患者进行精确诊断，方便后续肿瘤治疗方案的制定。
[0025](3)本专利技术提供的用于乳腺癌远处转移检测的标志物，可以通过体外检测的方法判断乳腺癌患者癌组织是否发生远处转移，无需实施手术取样，避免了组织活检对患者身体产生伤害，减轻患者的就诊伤痛。
附图说明
[0026]图1为本专利技术乳腺癌远处转移患者体内差异表达sEVs蛋白分析图。图1的a为乳腺癌远处转移患者差异表达sEVs蛋白涉及的代谢途径。图1的b为乳腺癌远处转移患者差异表达sEVs蛋白的热图。
[0027]图2为本专利技术乳腺癌靶向肺转移、靶向肝转移、靶向骨转移三种类型患者体内差异表达sEVs蛋白分析图。图2的a为上述三种类型患者差异表达sEVs蛋白涉及的代谢途径。图2的b为上述三种类型患者差异表达sEVs蛋白的表达丰度图。
[0028]图3为本专利技术xCell实验结果图。图3的a为乳腺癌靶向肺转移、靶向肝转移、靶向骨转移三种类型患者体内差异富集细胞类型的结果图。图3的b为软骨细胞在上述三种类型患者体内富集情况差异图。图3的c为心肌细胞在上述三种类型患者体内富集情况差异图。图3的d为成纤维细胞在上述三种类型患者体内富集情况差异图。
具体实施方式
[0029]以下结合附图和实施例对本专利技术的技术方案做进一步的说明。
[0030]乳腺癌(BC)是全世界最常见的癌症之一，占女性癌症的30％。近年来，由于治疗方案的改进，死亡率长期下降，但乳腺癌远处转移仍然是造成乳腺癌患者死亡的主要原因。目前，乳腺癌患者是否发生远处转移需通过组织活检进行检测，然而组织活检需进行组织切除，对患者身体产生伤害；且切除组织时，手术器械易刮碰病发部位，处理不当癌组织更易发生扩散。
[0031]为了解决以上技术问题，本专利技术通过对乳腺导管内原位癌患者和乳腺癌远处转移患者进行sEVs蛋白组学分析鉴定，得到26个乳腺癌远处转移相关sEVs蛋白。医护人员通过体外检测该26个sEVs蛋白的表达丰度，即可检测该乳腺癌患者的癌组织是否发生远处转移。
[0032]该26个乳腺癌远处转移相关sEVs蛋白分别为：FLNA、VTN、PKM、G6PD、TALDO1、FBP1、LDHB、PDHB、ACACA、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳腺癌远处转移相关标志物的筛选方法，其特征在于，包括：步骤S1，收集样品：分别从乳腺导管内原位癌患者和乳腺癌远处转移患者的血浆中提取外泌体蛋白；步骤S2，鉴定样本中的外泌体蛋白：采用液相色谱
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质谱联用的方法对所述外泌体蛋白进行分离、分析，得到不同患者血浆内外泌体蛋白的表达丰度；步骤S3，获得乳腺癌远处转移相关标志物：对步骤S2得到的外泌体蛋白表达丰度数据进行t检验分析，计算两类样本间的差异倍数，若差异倍数大于1.5，则说明该外泌体蛋白为乳腺癌远处转移相关标志物。2.如权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述差异倍数包括：第一差异倍数，所述第一差异倍数＝该外泌体蛋白在乳腺癌远处转移患者中表达的量/该外泌体蛋白在乳腺导管内原位癌患者中表达的量。3.如权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述乳腺癌远处转移包括：乳腺癌靶向肺转移、乳腺癌靶向肝转移和乳腺癌靶向骨转移三种类型。4.如权利要求3所述的筛选方法，其特征在于，所述差异倍数包括：第二差异倍数，所述第二差异倍数＝该外泌体蛋白在其中一种类型患者中表达的量/该蛋白分别在其他类型患者体内表达的量。5.如权利要求1所述的筛选方法，其特征在于，所述差异倍数大于2。6.一组根据权利要求1所述的筛选方法筛选得...

【专利技术属性】
技术研发人员：王红霞，杜少倩，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：