一种标记稀释液制造技术

本发明专利技术涉及体外诊断产品领域，具体而言，提供了一种标记稀释液。本发明专利技术提供的标记稀释液，包括缓冲剂、二价金属离子化合物、惰性蛋白、甜菜碱和蔗糖，可以有效降低背景噪音，提高信噪比，可以显著改善NSE检测产品的灵敏度和精密度。同时，NSE检测产品的临床相关性也得到了改善。了改善。了改善。

【技术实现步骤摘要】
一种标记稀释液


[0001]本专利技术涉及体外诊断产品领域，具体而言，涉及一种标记稀释液。

技术介绍

[0002]化学发光以酶作为标记的方案，用到的酶多是辣根过氧化物酶，主要原因是该酶便宜且标记试剂储存较稳定，但辣根过氧化物酶标记试剂灵敏度较碱性磷酸酶低。而碱性磷酸酶没有被广泛应用的原因在于碱性磷酸酶的发光底物是高灵敏度发光底物，灵敏度高也意味着背景值的噪音也非常大。如何提高碱性磷酸酶体系的信噪比是应用碱性磷酸酶系统的难题。
[0003]碱性磷酸酶(alkalinephosphatase，ALP)是一种广泛存在于动物、植物、微生物中的酶。临床体外诊断经常用到的碱性磷酸酶主要从小牛肠粘膜及大肠杆菌中获得，两种来源酶均可在市场购买如Roche、Sigma等。碱性磷酸酶可以催化多种底物显色，所以它在临床免疫体外诊断行业有着广泛的应用。标记了碱性磷酸酶的抗原抗体试剂是临床免疫体外诊断试剂盒的重要组成部分。免疫体外诊断试剂的原理主要通过抗原抗体的特异性结合，然后通过酶催化底物显色，来达到定量诊断的效果，所以保证稳定的标记碱性磷酸酶的抗原抗体的活性和特异性至关重要。
[0004]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0005]本专利技术的第一目的在于提供一种标记稀释液。
[0006]本专利技术的第二目的在于提供上述标记稀释液的应用，可以提高碱性磷酸酶标记体系的信噪比、提高精密度和临床相关性。
[0007]本专利技术的第三目的在于提供一种NSE检测试剂。
[0008]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0009]一种标记稀释液，包括缓冲剂、二价金属离子化合物、惰性蛋白、甜菜碱和蔗糖。
[0010]进一步地，二价金属离子化合物是镁离子化合物和锌离子化合物；
[0011]可选的，镁离子化合物是MgCl2或MgSO4；
[0012]可选的，锌离子化合物是ZnCl2或ZnSO4；
[0013]可选的，所述缓冲剂包括Tris、HEPES、MOPS、PB或MES；
[0014]可选的，所述缓冲剂的pH为5.5-6.5；
[0015]可选的，所述惰性蛋白包括0.5w/v％-2w/v％的BSA或酪蛋白。
[0016]进一步地，甜菜碱在所述标记稀释液中终浓度为0.01w/v％-0.5w/v％；
[0017]可选的，所述甜菜碱在所述标记稀释液中终浓度为0.05w/v％-0.3w/v％；
[0018]可选的，所述甜菜碱在所述标记稀释液中终浓度为0.05w/v％-0.2w/v％。
[0019]进一步地，ZnCl2在所述标记稀释液中终浓度为0.05mM-0.1mM，MgCl2在所述标记稀释液中终浓度为0.5mM-50mM，缓冲剂在所述标记稀释液中终浓度为25mM-75mM；
[0020]可选的，MgCl2在所述标记稀释液中终浓度为1mM-30mM；
[0021]可选的，MgCl2在所述标记稀释液中终浓度为1.5mM-25mM；
[0022]可选的，MgCl2在所述标记稀释液中终浓度为2mM-20mM；
[0023]可选的，蔗糖在所述标记稀释液中终浓度为0.5w/v％-4w/v％。
[0024]进一步地，所述标记稀释液进一步包括甘油；
[0025]可选的，甘油在所述标记稀释液中终浓度为1w/v％-10w/v％；
[0026]可选的，甘油在所述标记稀释液中终浓度为3w/v％-7w/v％。
[0027]进一步地，所述标记稀释液进一步包括100mM-300mM的NaCl和0.05v/v％-0.2v/v％防腐剂；
[0028]可选的，防腐剂包括Proclin300或叠氮钠。
[0029]进一步地，标记稀释液是碱性磷酸酶标记稀释液。
[0030]上述标记稀释液在NSE检测试剂盒中的应用。
[0031]一种NSE检测试剂，包括上述标记稀释液。
[0032]进一步地，试剂还包括生物素标记分子和碱性磷酸酶标分子；
[0033]标记稀释液用于稀释生物素标记分子和碱性磷酸酶标分子。
[0034]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0035]本专利技术提供的标记稀释液，包括缓冲剂、二价金属离子化合物、惰性蛋白、甜菜碱和蔗糖。该标记稀释液可以显著提高碱性磷酸酶检测体系的信噪比，扩大碱性磷酸酶系统的适用范围，特别是应用其制备的NSE检测产品相较于现有技术中的NSE检测产品热稳定性得到显著改善，从而产品效期得到延长。
[0036]本专利技术提供的NSE检测试剂由于采用了本专利技术提供的标记稀释液作为工作液，试剂盒的背景噪音得到降低，其精密度和灵敏度显著提高，同时临床相关性较好，提高了试剂盒的检测准确性并且延长了效期。
附图说明
[0037]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0038]图1为试验例3中未优化镁离子配方的临床相关性结果；
[0039]图2为试验例3中优化镁离子配方的临床相关性结果。
具体实施方式
[0040]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。
[0041]除非另有说明，本文中所用的专业与科学术语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法或材料也可应用于本专利技术中。
[0042]本专利技术提供一种标记稀释液，包括缓冲剂、二价金属离子化合物、惰性蛋白、甜菜
碱和蔗糖。
[0043]该标记稀释液可以显著提高碱性磷酸酶检测体系的信噪比，扩大碱性磷酸酶系统的适用范围，特别是应用其制备的NSE检测产品相较于现有技术中的NSE检测产品热稳定性得到显著改善，同时产品效期得到延长。专利技术人在优化组合物配方时，通过甜菜碱、二价金属离子化合物等组分的共同作用，有效降低背景噪音，提高信噪比，可以显著改善NSE检测产品的灵敏度和精密度。同时，NSE检测产品的临床相关性也得到了改善。
[0044]需要说明的是，本专利技术中“v/v”是指100ml溶液中某物质的毫升数；“w/v”是指每100ml溶液中某物质的克数。
[0045]在优选地实施方式中，二价金属离子化合物是镁离子化合物和锌离子化合物，其中，镁离子化合物优选为MgCl2，锌离子化合物优选为ZnCl2。ZnCl2在标记稀释液中终浓度优选为0.05mM-0.1mM，MgCl2在标记稀释液中终浓度优选为0.5mM-50mM，进一步优选为1mM-30mM，更进一步优选为1.5mM-25mM，更进一步优选为2mM-2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种标记稀释液，其特征在于，包括缓冲剂、二价金属离子化合物、惰性蛋白、甜菜碱和蔗糖。2.根据权利要求1所述的标记稀释液，其特征在于，二价金属离子化合物是镁离子化合物和锌离子化合物；可选的，镁离子化合物是MgCl2或MgSO4；可选的，锌离子化合物是ZnCl2或ZnSO4；可选的，所述缓冲剂包括Tris、HEPES、MOPS、PB或MES；可选的，所述缓冲剂的pH为5.5-6.5；可选的，所述惰性蛋白包括0.5w/v％-2w/v％的BSA或酪蛋白。3.根据权利要求1或2所述的标记稀释液，其特征在于，甜菜碱在所述标记稀释液中终浓度为0.01w/v％-0.5w/v％；可选的，所述甜菜碱在所述标记稀释液中终浓度为0.05w/v％-0.3w/v％；可选的，所述甜菜碱在所述标记稀释液中终浓度为0.05w/v％-0.2w/v％；可选的，蔗糖在所述标记稀释液中终浓度为0.5w/v％-4w/v％。4.根据权利要求2所述的标记稀释液，其特征在于，ZnCl2在所述标记稀释液中终浓度为0.05mM-0.1mM，MgCl2在所述标记稀释液中终浓度为0.5mM-50mM；可选的，MgCl2在所述标记稀释液...

【专利技术属性】
技术研发人员：文飘，刘江洪，夏良雨，
申请(专利权)人：广东菲鹏生物有限公司，
类型：发明
国别省市：