高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法技术

本发明专利技术属于药品质量检测技术领域，具体涉及一种高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法。该方法的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为磷酸氢二钠A溶液，所述流动相B为乙睛，通过采用特定的梯度洗脱方式，可在高效液相色谱图中将硫辛酸原料及制剂有关物质(包含硫辛酸和至少6种常见杂质)分离开来；并通过对条件的优化，使得对各组分检测的灵敏性及其含量的准确性进一步得到提升。该方法专属性好、灵敏度高、准确度高、耐用性好，便于对硫辛酸原料及制剂的质量检测与监控，有利于硫辛酸的安全推广与应用。有利于硫辛酸的安全推广与应用。有利于硫辛酸的安全推广与应用。

【技术实现步骤摘要】
高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法


[0001]本专利技术属于药品质量检测
，具体涉及一种高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法。

技术介绍

[0002]硫辛酸(Alpha Lipoic Acid)是一种存在于线粒体的辅酶，具备很高的自由基反应能力，能消除体内的自由基，具有消炎抗衰老的功效。目前被广泛应用于预防和治疗心脏病、糖尿病、肝病和老年痴呆。
[0003]硫辛酸原料及制剂不稳定，容易产生杂质，主要包含杂质A、还原杂质、单氧化杂质、双氧化杂质1、双氧化杂质2、杂质H等。为确保药品安全需要对以上杂质进行控制。目前没有公开的对上述杂质的检测方法，因此需要提供一种硫辛酸原料及制剂有关物质的检测方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，该方法专属性好、灵敏度高、准确度高、耐用性好，便于对硫辛酸原料及制剂的质量检测与监控，有利于硫辛酸的安全推广与应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术通过以下技术方案来实现：
[0006]所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为磷酸氢二钠溶液，所述流动相B为乙腈，采用梯度洗脱，以所述流动相的总体积为100％计，
[0007]在第0～15min，所述流动相A的体积为86.5％，所述流动相B的体积为13.5％；
[0008]在第15～25min，所述流动相A的体积由86.5％递减为65％，所述流动相B的体积由13.5％递增为35％；
[0009]在第25～60min，所述流动相A的体积为65％，所述流动相B的体积为35％；
[0010]在第60～65min，所述流动相A的体积由65％递减为45％，所述流动相B的体积由35％递增为55％；
[0011]在第65～80min，所述流动相A的体积为45％，所述流动相B的体积为55％；
[0012]在第80～81min，所述流动相A的体积由45％递增为86.5％，所述流动相B的体积由55％递减为13.5％；
[0013]在第81～90min，所述流动相A的体积为86.5％，所述流动相B的体积为13.5％。
[0014]本专利技术发现，采用高效液相色谱法对硫辛酸原料及制剂中容易出现的杂质进行检测时，流动相的选择对杂质的分离有较大的影响，经过大量尝试发现，当采用上述方法进行梯度洗脱时，可以很好地将硫辛酸原料及制剂中容易出现的杂质区分出来。
[0015]本专利技术所述的硫辛酸原料及制剂有关物质包括硫辛酸及杂质，所述杂质为选自杂质A、还原杂质、单氧化杂质、双氧化杂质1、双氧化杂质2、杂质H中的一种或一种以上混合
物。
[0016][0017]通过本专利技术中的方法可同时将上述6个已知杂质与其他未知杂质分离开来。
[0018]为了进一步提升检测的准确性和灵敏性，本专利技术对高效液相色谱法的其他条件进行了优化，得到如下优选方案：
[0019]流动相A磷酸氢二钠溶液的浓度为0.002～0.004mol/L，优选为0.003mol/L。
[0020]流动相A磷酸氢二钠溶液的pH值为2.8～3.2，优选为3.0。
[0021]采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂。
[0022]色谱柱的规格为4.6mm
×
250mm，5μm。优选为菲罗门ACE Excel 5C18
‑
Amide，4.6mm
×
250mm，5μm。
[0023]流动相的流速为0.8～1.2mL/min，优选为1.0mL/min。
[0024]本专利技术所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，优选采用以下条件进行测定：
[0025]色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；色谱柱的规格为菲罗门ACE Excel 5C18
‑
Amide，4.6mm
×
250mm，5μm；
[0026]流动相A：浓度为0.002～0.004mol/L、pH值为2.8～3.2的磷酸氢二钠溶液；
[0027]流动相B：乙腈；
[0028]柱温：30～40℃；
[0029]检测波长：210nm～220nm；
[0030]流速：0.8～1.2mL/min；
[0031]采用梯度洗脱，以所述流动相的总体积为100％计，
[0032]在第0～15min，所述流动相A的体积为86.5％，所述流动相B的体积为13.5％；
[0033]在第15～25min，所述流动相A的体积由86.5％递减为65％，所述流动相B的体积由13.5％递增为35％；
[0034]在第25～60min，所述流动相A的体积为65％，所述流动相B的体积为35％；
[0035]在第60～65min，所述流动相A的体积由65％递减为45％，所述流动相B的体积由35％递增为55％；
[0036]在第65～80min，所述流动相A的体积为45％，所述流动相B的体积为55％；
[0037]在第80～81min，所述流动相A的体积由45％递增为86.5％，所述流动相B的体积由55％递减为13.5％；
[0038]在第81～90min，所述流动相A的体积为86.5％，所述流动相B的体积为13.5％。
[0039]供试品溶液的配制：用乙腈将硫辛酸原料及制剂溶解，并用磷酸氢二钠溶液稀释为8.0～12.0mg/mL作为供试品溶液。
[0040]对照品溶液的配制：用乙腈溶解杂质对照品，并用磷酸氢二钠溶液稀释作为混合对照溶液；
[0041]其中，所述杂质对照品选自杂质A、还原杂质、单氧化杂质、双氧化杂质1、双氧化杂质2、杂质H中的一种或一种以上混合物；
[0042]所述杂质的浓度为0.01～0.03mg/mL。
[0043]采用上述浓度范围的供试品溶液和混合对照溶液均可以较为清晰准确地测出供试品中各成分的含量，在实际应用中为了方便计算，可将供试品溶液的浓度及混合对照溶液中各成分的浓度在上述范围内按比例设置。如设置供试品溶液中硫辛酸的含量为10mg/mL，混合对照溶液中各杂质的浓度均为0.02mg/mL，可以在保证准确的同时，更有利于各成分含量的计算。为了同时达到上述目的，在本专利技术限定范围内对各组分的浓度可以有多种按比例设置方式，在此不做进一步限定。
[0044]在实际应用时，优选将供试品溶液过滤后再注入液相色谱仪。
[0045]稀释用的磷酸氢二钠溶液的浓度为0.05mol/L，pH值为2.6
±
0.1。
[0046]本专利技术中采用的磷酸氢二钠溶液(流动相A和稀释用的磷酸氢二钠溶液)的pH值通过磷酸进行调节。
[0047]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
[0048]本专利技术提供的方法可在高效液相色谱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为磷酸氢二钠溶液，所述流动相B为乙腈，其特征在于，采用梯度洗脱，以所述流动相的总体积为100％计，在第0～15min，所述流动相A的体积为86.5％，所述流动相B的体积为13.5％；在第15～25min，所述流动相A的体积由86.5％递减为65％，所述流动相B的体积由13.5％递增为35％；在第25～60min，所述流动相A的体积为65％，所述流动相B的体积为35％；在第60～65min，所述流动相A的体积由65％递减为45％，所述流动相B的体积由35％递增为55％；在第65～80min，所述流动相A的体积为45％，所述流动相B的体积为55％；在第80～81min，所述流动相A的体积由45％递增为86.5％，所述流动相B的体积由55％递减为13.5％；在第81～90min，所述流动相A的体积为86.5％，所述流动相B的体积为13.5％。2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，其特征在于，磷酸氢二钠溶液的浓度为0.002～0.004mol/L，磷酸氢二钠溶液的pH值为2.8～3.2。3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，其特征在于，采用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂。4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，其特征在于，色谱柱的规格为4.6mm
×
250mm，5μm。5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，其特征在于，流动相的流速为0.8～1.2ml/min。6.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定硫辛酸原料及制剂中有关物质的方法，其特征在于，采用以下条件进行测定：色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动...

【专利技术属性】
技术研发人员：白臣生，宋连杰，宋彦会，任传杰，于黎鑫，付清爽，周玲玲，张楠楠，李梦琪，李玲，李颖，
申请(专利权)人：山东齐都药业有限公司，
类型：发明
国别省市：