一种恩他卡朋原料或其制剂中N-亚硝基二甲胺与N-亚硝基二乙胺的检测方法技术

本发明专利技术涉及药物分析技术领域，具体公开一种恩他卡朋原料或其制剂中N

【技术实现步骤摘要】
一种恩他卡朋原料或其制剂中N
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亚硝基二甲胺与N
‑
亚硝基二乙胺的检测方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，尤其涉及一种恩他卡朋原料或其制剂中N
‑ꢀ
亚硝基二甲胺与N
‑
亚硝基二乙胺的检测方法。

技术介绍

[0002]恩他卡朋，英文名称为entacapone，化学名为(E)
‑2‑
氰基
‑3‑
(3，4
‑
二羟基
‑ꢀ5‑
硝苯基)
‑
N，N
‑
二乙基
‑2‑
丙烯酰胺，结构式如下。恩他卡朋是一种高选择性和强效的儿茶酚胺氧位
‑
甲基转移酶(COMT)抑制剂，临床上主要作为左旋多巴辅助药用于治疗帕金森病。
[0003][0004]现有合成恩他卡朋原料的工艺可能会在恩他卡朋原料中残留两种痕量的亚硝胺类基因毒性杂质：N
‑
亚硝基二甲胺(NDMA)和N
‑
亚硝基二乙胺 (NDEA)。按照ICH M7指导原则，恩他卡朋原料中NDMA的可接受限度＝TTC(ng/天)/MDD(mg/天)＝96.0(ng/天)/2000(mg/天)＝0.048ppm(ng/mg)； NDEA的可接受限度＝TTC(ng/天)/MDD(mg/天)＝26.5(ng/天)/2000(mg/天) ＝0.01325ppm(ng/mg)；其中TTC表示毒理学关注阈值，MDD表示最大每日剂量，恩他卡朋最大每日剂量以2000mg计算。
[0005]常规高效液相色谱检测方法的灵敏度不能满足恩他卡朋原料或其制剂中 NDMA和NDEA的检测要求。为了更好地监控恩他卡朋原料或其制剂产品的质量，保证恩他卡朋产品的临床用药安全，有必要研发一种准确可靠检测恩他卡朋原料或其制剂中NDMA和NDEA的方法。

技术实现思路

[0006]针对现有技术中不能对恩他卡朋原料或制剂中NDMA和NDEA进行有效检测的问题，本专利技术提供一种恩他卡朋原料或其制剂中N
‑
亚硝基二甲胺与N
‑ꢀ
亚硝基二乙胺的检测方法。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提供的技术方案是：
[0008]一种恩他卡朋原料或其制剂中N
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亚硝基二甲胺与N
‑
亚硝基二乙胺的检测方法，采用高效液相色谱与质谱联用法进行检测，包括如下步骤：
[0009](1)供试品溶液和混合对照品溶液的配制：
[0010]取恩他卡朋原料或其制剂，用水配制成供试品溶液；
[0011]取N
‑
亚硝基二甲胺和N
‑
亚硝基二乙胺对照品，用水配制成混合对照品溶液；
[0012](2)对所述混合对照品溶液和供试品溶液进行检测，其中，所述高效液相色谱的条件为：
[0013]采用C18色谱柱，以体积浓度为0.05％
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0.15％甲酸水溶液为流动相A，以体积浓度为0.05％
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0.15％甲酸的甲醇溶液为流动相B，梯度洗脱；
[0014]所述质谱采用APCI离子源，正离子检测模式，其中，所述N
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亚硝基二甲胺的定量离子为：母离子为75.0m/z，子离子为43.2m/z，碰撞电压为23V，所述N
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亚硝基二甲胺的定性离子为：母离子为75.0m/z，子离子为58.1m/z，碰撞电压为17V；所述N
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亚硝基二乙胺的定量离子为：母离子为103.0m/z，子离子为75.1m/z，碰撞电压为16.5V，所述N
‑
亚硝基二甲胺的定性离子为：母离子为103.0m/z，子离子为47.1m/z，碰撞电压为25V。
[0015]相对于现有技术，本专利技术提供的恩他卡朋原料或其制剂中N
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亚硝基二甲胺与N
‑
亚硝基二乙胺的检测方法，采用C18色谱柱，通过特定的流动相，以梯度洗脱方式，配合特定的质谱条件，实现了恩他卡朋原料或其制剂中痕量的 NDMA和NDEA的准确检出，NDMA的检测限为0.005ng/mg，NDEA的检测限为0.0025ng/mg，符合ICH M7的指导原则的检测要求。且本专利技术提供的方法经专属性、精密度、灵敏度等方法学研究及验证，发现本专利技术的方法灵敏、准确、重现性较好，能够用更为简便的方法实现对恩他卡朋中NDMA和 NDEA的定性和定量检测，从而为提高和更好地控制恩他卡朋药品的质量提供有效保障，有利于保证恩他卡朋产品质量的一致性和稳定性，从而有利于提高恩他卡朋产品用药的临床安全性和有效性。
[0016]优选的，流动相A为体积浓度为0.1％的甲酸水溶液，流动相B为体积浓度为0.1％甲酸的甲醇溶液。
[0017]优选的流动相在不产生基线干扰的前提下，能够更好地分离恩他卡朋、 NDMA和NDEA，并且有效改善峰形，使检测结果的准确度及精密度更高。
[0018]优选的，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
[0019]0min，96％
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94％流动相A，4％
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6％流动相B；
[0020]3min，96％
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94％流动相A，4％
‑
6％流动相B；
[0021]5min，80％流动相A，20％流动相B；
[0022]9min，100％流动相B；
[0023]11min，100％流动相B；
[0024]11.1min，96％
‑
94％流动相A，4％
‑
6％流动相B。
[0025]进一步优选的，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
[0026]0min，95％流动相A，5％流动相B；
[0027]3min，95％流动相A，5％流动相B；
[0028]5min，80％流动相A，20％流动相B；
[0029]9min，100％流动相B；
[0030]11min，100％流动相B；
[0031]11.1min，95％流动相A，5％流动相B；
[0032]16min，95％流动相A，5％流动相B。
[0033]优选的梯度洗脱顺序，可以提高主成分与NDMA、NDEA杂质峰之间的分离度和检测的灵敏度，使检测结果定量准确，且精密度高。
[0034]优选的，所述质谱的扫描模式为多反应监测，气帘气体压力为30psi，碰撞气体为Medium，去簇电压为50V，射入电压为10V，碰撞室射出电压为 10V，雾化气体电流为3μA，离子源气体1压力为35psi，离子化温度为 350℃。
[0035]优选的质谱分析条件下，能够最大限度地提高恩他卡朋中NDMA和 NDEA测定的准确性。
[0036]优选的，所述色谱柱的规格为4.6mm*100mm，填料直径为3μm。
[0037]进一步优选的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种恩他卡朋原料或其制剂中N
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亚硝基二甲胺与N
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亚硝基二乙胺的检测方法，其特征在于，采用高效液相色谱与质谱联用法进行检测，包括如下步骤：(1)供试品溶液和混合对照品溶液的配制：取恩他卡朋原料或其制剂，用水配制成供试品溶液；取N
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亚硝基二甲胺和N
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亚硝基二乙胺对照品，用水配制成混合对照品溶液；(2)对所述混合对照品溶液和供试品溶液进行检测，其中，所述高效液相色谱的条件为：采用C18色谱柱，以体积浓度为0.05％
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0.15％甲酸水溶液为流动相A，以体积浓度为0.05％
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0.15％甲酸的甲醇溶液为流动相B，梯度洗脱；所述质谱采用APCI离子源，正离子检测模式，其中，所述N
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亚硝基二甲胺的定量离子为：母离子为75.0m/z，子离子为43.2m/z，碰撞电压为23V，所述N
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亚硝基二甲胺的定性离子为：母离子为75.0m/z，子离子为58.1m/z，碰撞电压为17V；所述N
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亚硝基二乙胺的定量离子为：母离子为103.0m/z，子离子为75.1m/z，碰撞电压为16.5V，所述N
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亚硝基二甲胺的定性离子为：母离子为103.0m/z，子离子为47.1m/z，碰撞电压为25V。2.如权利要求1所述的恩他卡朋原料或其制剂中N
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亚硝基二甲胺与N
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亚硝基二乙胺的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：0min，96％
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94％流动相A，4％
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6％流动相B；3min，96％
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94％流动相A，4％
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6％流动相B；5min，80％流动相A，20％流动相B；9min，100％流动相B；11min，100％流动相B；11.1min，96％
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94％流动相A，4％
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6％流动相B。3.如权利要求1或2所述的恩他卡朋原料或其制剂中N
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亚硝基二甲胺...

【专利技术属性】
技术研发人员：范燕龙，王亚静，董海峰，荣孜杭，安淼，王肖，刘丹，毕贺，马明卓，孙朝利，
申请(专利权)人：石家庄四药有限公司，
类型：发明
国别省市：