鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法和应用技术

本发明专利技术属于动物粪便处理领域，公开了鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法和应用，该处理方法包括以下步骤：将戊二醛和含有黏液的鸡巨型艾美耳球虫粪液混合，进行杀菌，然后加入磷酸调pH为1.5

【技术实现步骤摘要】
鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法和应用


[0001]本专利技术属于动物粪便处理领域，具体涉及到鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法和应用。

技术介绍

[0002]近年来由于球虫药物的耐药性及国家对食品安全日渐重视，实施禁止或限制使用抗球虫药物。因此，越来越多养殖企业使用球虫疫苗防控鸡球虫病。球虫疫苗中其中一个虫株—巨型艾美耳球虫，它主要寄生在小肠中段，从十二指肠以下直到卵黄蒂，在严重感染时，病变扩散整个小肠。小肠出现肠道弛缓，充有液体，肠腔内常含有黄色或桔黄的黏液，引起的以肠炎、腹泻、生长迟缓、饲料转化率下降甚至死亡为特征的流行性疾病，对养殖业造成较大的经济损失。而鸡球虫疫苗批量的制备，需要将球虫卵囊从粪便中分离出来。感染巨型艾美耳球虫排出的粪便含有大量黏液(见图1)，黏液中包含大量的巨型艾美耳球虫卵囊(见图2)，黏液黏附性较强，卵囊不易释放获取。在规模生产中，粪便可能会出现不能即刻处理，存放在低温环境中，但由于粪便有大量的肠黏液、未消化饲料等物质，非常适合细菌的繁殖。在细菌的繁殖过程中会出现粪便发酵膨胀(见图17)，无形中增加了粪便的处理量。而现有的球虫卵囊分理技术：采用机械或人工搓磨处理黏液。机械研磨损伤卵囊、影响巨型卵囊孢子化发育同步性以及孢子化率，不利于疫苗品质。人工用手搓洗粪便中的粘液，释放不充分卵囊回收率低，降低分离效率，延长分离时间。亟需进行改进，否则将无法满足球虫疫苗的大规模生产。还有现有的球虫卵囊分离技术并未对粪便的黏液进行处理。
[0003]因此，针对感染巨型艾美耳球虫卵囊后引发肠炎，肠道黏膜脱落，粪便中排出大量粘性比较强的血性黏液，而黏液对卵囊黏附性较强，含黏液粪便卵囊处理难题有待解决。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提供一种鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法和应用，该处理方法在不损伤卵囊的前提下，提高了巨型艾美耳球虫卵囊分离效率和卵囊回收率，卵囊回收率由原来的70％提高至95％以上。
[0005]专利技术构思：本专利技术提供一种鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法，通过将戊二醛和胃蛋白酶联用处理粪液，再进行超声波空化处理后，在不损伤卵囊的前提下，使其完全分散并释放卵囊，以此来提高巨型艾美耳虫卵囊的分离效率和回收率。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采取以下技术方案：
[0007]一种鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法，包括以下步骤：
[0008](1)将戊二醛和含有黏液的鸡巨型艾美耳球虫粪液混合，进行杀菌，然后加入磷酸调pH为1.5
‑
2.5，再加入胃蛋白酶进行分解粪液中黏液，得到浑浊液；
[0009](2)采用超声波空化处理所述浑浊液，得到粪便处理液。
[0010]优选地，步骤(2)还包括将所述粪便处理液过筛，收集滤液，再将滤液离心，收集离
心所得的沉淀物；将饱和食盐水溶液加入所述沉淀物中搅拌均匀，离心漂浮，收集上清液，再加入水，离心，收集沉淀，即得鸡巨型艾美耳球虫卵囊。
[0011]进一步优选地，所述过筛的次数为1
‑
5次。
[0012]进一步优选地，所述过筛是先将粪便处理液和水按体积比为1:(1
‑
2)混合，再过200
‑
500目的筛。
[0013]进一步优选地，所述离心的转速为2000
‑
3000r/min，离心的时间为1
‑
5min。
[0014]进一步优选地，所述饱和食盐水和沉淀物的液固比为(1
‑
3):1L/kg。
[0015]进一步优选地，所述上清液和水的体积比为1:(5
‑
10)。
[0016]优选地，步骤(1)中，所述戊二醛和胃蛋白酶的液固比为(8
‑
16)：(5
‑
10)ml/g。
[0017]优选地，步骤(1)中，所述粪液是由含有黏液的鸡巨型艾美耳球虫粪便和水按固液比为(1
‑
3)：(0.9
‑
0.93)g/mL混合而成。
[0018]戊二醛：具有杀灭细菌繁殖体，并抑制细菌的生长，防止粪便发酵膨胀。如果使用其他一般的杀菌剂如碘制剂在30℃温度条件下保存4小时，粪液会产生大量酸和气，从而出现长霉。
[0019]胃蛋白酶：具有分解因肠炎出现肠道粘膜组织脱落，粪便中排出粘性比较强的血性黏液，使黏液的黏附性降低的功能，与戊二醛联用对含有黏液的鸡巨型艾美耳球虫粪便具有杀菌降低黏液粘度的作用，从而使鸡巨型艾美耳球虫卵囊部分从粪便中释放出来，再利用超声波空化处理将黏液呈均匀状分散碎化，完全将粪液中鸡巨型艾美耳球虫卵囊释放出来。
[0020]优选地，步骤(2)中，所述超声波空化处理的具体操作过程为：先在超声波处理机内壁放置一层800
‑
1200目的尼龙过滤网，再将1000
‑
1100g的钢珠加入尼龙过滤网中，最后把所述浑浊液加入尼龙过滤网中，在300～600W超声功率、20～40KHz频率下进行超声处理10
‑
30分钟。
[0021]使用800
‑
1200目的尼龙过滤网，是因为800目尼龙过滤网的孔径是18μm，1200目尼龙过滤网的孔径是12μm，而巨型卵囊大小为30.7
×
21.0μm，既可以100％隔绝脱出的卵囊进入超声波机内，又可使处理后其他更小的物质穿过尼龙网。
[0022]更优选地，所述尼龙过滤网的孔径为1000目。
[0023]超声波空化处理的原理：超声波在浑浊液中随着液体的缝隙传播开时，液体的分子受到超声波的能量的传递，而具有能量，分子相互作用而产生大量的气泡，这些气泡构成了空化的前提条件，能量聚集到一定的程度的时候气泡破裂产生巨大的能量把整个液体破碎。
[0024]本专利技术利用超声波清洗的空化作用，即在浑浊液中无数气泡快速形成并迅速内爆，由此产生的冲击将浑浊液中的黏液溶解，并释放出其中的巨型球虫卵囊。
[0025]鸡巨型艾美耳球虫粪便中的黏液降低粘性，一是通过胃蛋白酶的分解作用，二是在超声波的作用下，粪便中黏液与钢珠不断摩擦，使粪便黏液组织分解，最大限度降低了黏液的黏附能力，使鸡巨型艾美耳球虫卵囊可以迅速脱出，提高分离效率，并通过球虫卵囊孢子化后的情况可以得出对卵囊无不良影响及损害。
[0026]本专利技术还提供上述的处理方法在动物寄生虫卵囊分离中的应用。
[0027]有益效果
[0028](1)本专利技术利用戊二醛先将粪液中的细菌杀死，再利用胃蛋白酶分解粪便中的黏液，使黏液的黏附性降低，最后结合超声波空化处理细碎粪便中的黏液，得到球虫卵囊，球虫卵囊分离效率提高25.0％以上。对粪液进行超声波空化，超声波可以穿透固体而使整个液体介质振动并产生空化气泡，所以只要有水浸泡的地方，在超声波的作用下，粪便中黏液与钢珠不断摩擦，使粪便黏液组织分解，最本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鸡巨型艾美耳球虫粪便黏液的处理方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将戊二醛和含有黏液的鸡巨型艾美耳球虫粪液混合，进行杀菌，然后加入磷酸调pH为1.5
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2.5，再加入胃蛋白酶进行分解粪液中的黏液，得到浑浊液；(2)采用超声波空化处理所述浑浊液，得到粪便处理液。2.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，步骤(2)还包括将所述粪便处理液过筛，收集滤液，再将滤液离心，收集离心所得的沉淀物；将饱和食盐水溶液加入所述沉淀物中搅拌均匀，离心漂浮，收集上清液，再加入水，进行离心，收集离心沉淀物，即得鸡巨型艾美耳球虫卵囊。3.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，步骤(1)中，所述戊二醛和胃蛋白酶的液固比为(8
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16)：(5
‑
10)ml/g。4.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，步骤(1)中，所述粪液是由含有黏液的鸡巨型艾美耳球虫粪便和水按固液比为(1
‑
3)：(0.9
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0.93)g/mL混合而成。5.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，步骤(2)中，所述超声波空化处理的具体操作过程为：先在超声波处理机内壁放置一层800

【专利技术属性】
技术研发人员：王文莉，区彩芳，赖华英，杨斌，曾莉，温远辉，黎远珍，谭志坚，
申请(专利权)人：佛山市正典生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：