一种棕榈油假丝酵母及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种棕榈油假丝酵母(Candida palmioleophila)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.22737。本发明专利技术筛选出来的棕榈油假丝酵母同时具有异养硝化和好氧反硝化功能，能够耐受高浓度的亚硝酸盐且具有优异的降解效果，在初始pH＝4.0～8.0之间的培养基上生长都能够达到较高的活菌数，酸碱耐受度广，对恶劣环境的适应性较强。应性较强。

【技术实现步骤摘要】
一种棕榈油假丝酵母及其应用


[0001]本专利技术涉及一种棕榈油假丝酵母及其应用，具体涉及一种特别适合用于降解养殖废水中的氨氮、亚硝酸盐氮和总氮的棕榈油假丝酵母，属于环境微生物


技术介绍

[0002]自改革开放以来，我国的水产养殖业在科学的指导下迅速发展，现在渔业养殖产量已经超过了捕捞产量，为提高养殖产量，我国水产养殖业走上了集约化、工厂化的养殖道路。在高密度的养殖方式下，养殖水环境恶化，超过了水体的自净能力，污水治理需求日渐增大。有研究数据表明，在养殖动物的饵料中，氮盐的同化利用效率仅有30％，大量有机氮、无机氮被残存在排泄物和剩余饵料中，过量的饵料不能被水产动物完全吸收利用，导致大量有机物废物的沉积，破坏了水体自身的分解系统，使水体自净能力减弱，导致水体中氨氮和亚硝酸盐氮等污染物浓度升高。
[0003]据相关报道，当水体中氮含量＞0.2mg/L时，就具备了使水体富营养化的条件。在含氮化合物中，氨氮和亚硝酸盐氮对水产养殖生物的影响较大，水生生物对氨非常敏感，过高浓度的氨通过鳃和皮膜进入水产养殖动物体内的话，会使鳃表皮细胞损伤，降低其血液的携氧能力，影响水生生物的生理、生化反应，严重时导致水生动物窒息死亡。一定浓度的亚硝酸盐对水产动物具有毒害作用，主要表现在与水产动物血液中的血红蛋白反应，降低了其运输氧的能力，导致养殖动物组织缺氧、窒息死亡，在影响其生长发育的同时，也对人类的生命健康造成严重威胁。有文章表明，人类在摄入足量亚硝酸盐的情况下，亚硝酸通过与人体蛋白质分解产生的仲胺发生反应生成亚硝胺，亚硝胺是具有致畸和胚胎毒性的致癌物质。亚硝酸盐会引起肠源性青紫症，引起呼吸困难，损害中枢神经系统，诱发昏迷、惊厥、意识丧失等多种症状。
[0004]目前，脱氮的技术方法主要是从物理、化学和生物三大类方向进行研究。生物脱氮技术由于具有处理效果好、没有二次污染、处理成本低、操作管理方便等优点得到广泛应用，成为水体中有效的脱氮方法。自然界中存在能够高效将氨氮与亚硝酸盐氮降解的菌株，通过人工将具有该性状的菌株筛选出来，深入研究该菌的生长特性、脱氮特性及其在污水脱氮中的应用，对提高污水的脱氮处理效率和经济性有着重要的理论价值和实际意义。
[0005]中国专利申请CN202110333162.7公开了一种能够耐高盐环境的异养硝化棕榈油假丝酵母(Candida palmioleophila)，其是从含盐量为9％的异养硝化培养基中筛选分离得到，于盐度为4600mg/L的医药化工废水中测试效果，36h氨氮去除率达到69.3％，42h总氮去除率达到52.9％，COD去除率达到93.1％，其适用于具有高盐和高浓度有机污染物特点的医药化工废水，但其仅具有异养硝化作用，不能同时进行好氧反硝化，不能在含高含量亚硝酸盐氮的养殖废水中降解亚硝酸氮，因而不适合用于含氨氮、高含量亚硝酸盐氮和低盐的养殖废水的净化。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对现有的微生物菌种不适用于含氨氮、高含量亚硝酸盐氮和低盐的养殖废水的现状，提供一种适用于养殖废水/污水净化的棕榈油假丝酵母、含该棕榈油假丝酵母的微生物菌剂及其应用。
[0007]本专利技术要求保护一种棕榈油假丝酵母Candida palmioleophila NOB
‑
1，其18S rDNA序列如SEQ ID No:1所示，26S rDNA序列如SEQ ID No:2所示，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏号为CGMCC No.22737，保藏日期为2021年6月21日。
[0008]本专利技术还要求保护包含上述棕榈油假丝酵母的微生物菌剂。
[0009]本专利技术技术方案的有益效果是：
[0010](1)本专利技术筛选出来的棕榈油假丝酵母同时具有异养硝化和好氧反硝化功能，在接种菌液量为1250ppm时，48h后养殖污水中的氨氮降解率达到99.3％，亚硝酸盐降解率达到98.7％，总氮降解率达到61.2％。
[0011](2)本专利技术筛选出来的棕榈油假丝酵母能够耐受高浓度的亚硝酸盐且具有优异的降解效果，针对浓度220mg/L以内的亚硝酸盐氮，48h降解率达到99％以上，针对浓度300
‑
400mg/L的亚硝酸盐氮，72h后经定性检测，培养液中亚硝酸盐氮为阴性。
[0012](3)本专利技术筛选出来的棕榈油假丝酵母在初始pH＝4.0～8.0之间的培养基上生长都能够达到较高的活菌数，酸碱耐受度广，对恶劣环境的适应性较强。
[0013](4)本专利技术筛选出来的棕榈油假丝酵母对盐含量耐受程度较高，在NaCl含量为25
‰
以下的培养基中生长时，活菌数基本不受影响。
[0014]上述微生物菌剂的制备方法如下：
[0015](1)菌种活化：取棕榈油假丝酵母Candida palmioleophila NOB
‑
1接种于营养肉汤培养基中，于25
‑
35℃、150
‑
300rpm的条件下培养12
‑
48h，得到菌种活化液；
[0016](2)发酵：待发酵罐内的发酵培养基消毒完毕后，将步骤(1)所得的菌种活化液按照5
‑
15vol％的接种量接种于发酵罐中的发酵培养基中，控制温度25
‑
35℃，通气比为(1
‑
2):1、150
‑
300rpm的条件下发酵，待溶氧开始上升时停止发酵，得发酵液；
[0017](3)制备微生物菌剂：将步骤(2)所得的发酵液稀释，即得微生物菌剂。
[0018]进一步，所述发酵培养基的组成如下：碳源15
‑
30g/L，氮源5
‑
15g/L，PO
43
‑6‑
10g/L，K
+
0.2
‑
0.5g/L，Mg
2+
0.03
‑
0.1g/L，Na
+
0.2
‑
0.8g/L，Fe
2+
(5
‑
15)*10
‑3g/L，余量为水，且pH为6.5
‑
8；
[0019]优选的，所述发酵培养基的组成如下：碳源20
‑
25g/L，氮源8
‑
12g/L，PO
43
‑7‑
9g/L，K
+
0.2
‑
0.4g/L，Mg
2+
0.03
‑
0.05g/L，Na
+
0.3
‑
0.5g/L，Fe
2+
(8
‑
10)*10
‑3g/L，余量为水，pH为6.5
‑
7.5。
[0020]进一步，所述营养肉汤培养基的组成为：蛋白胨10g/L，牛肉粉3g/本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种棕榈油假丝酵母(Candida palmioleophila)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.22737。2.根据权利要求1所述的棕榈油假丝酵母，其特征在于，所述棕榈油假丝酵母的18S rDNA序列如SEQ ID No:1所示，26S rDNA序列如SEQ ID No:2所示。3.一种微生物菌剂，其特征在于，包含权利要求1或2所述的棕榈油假丝酵母。4.权利要求3所述微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：(1)菌种活化：取棕榈油假丝酵母接种于营养肉汤培养基中，于25
‑
35℃、150
‑
300rpm的条件下培养12
‑
48h，得到菌种活化液；(2)发酵：待发酵罐内的发酵培养基消毒完毕后，将步骤(1)所得的菌种活化液按照5
‑
15vol％的接种量接种于发酵罐中的发酵培养基中，控制温度25
‑
35℃，通气比为(1
‑
2):1、150
‑
300rpm的条件下发酵，待溶氧开始上升时停止发酵，得发酵液；(3)制备微生物菌剂：将步骤(2)所得的发酵液稀释，即得微生物菌剂。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成如下：碳源15
‑
30g/L，氮源5
‑
15g/L，PO
43
‑6...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱文卉，张洁，刘圣鹏，朱威，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝赛德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：